醋酸氯己定溶液质量标准提升研究

胡文军，邓朝晖，李爱红

（中国人民解放军广州军区联勤部药品仪器检验所，广东 广州 510500）

醋酸氯己定溶液质量标准提升研究

胡文军，邓朝晖，李爱红

（中国人民解放军广州军区联勤部药品仪器检验所，广东 广州 510500）

目的提高醋酸氯己定溶液的质量控制标准。方法建立测定醋酸氯己定溶液中醋酸氯己定含量的高效液相色谱法（HPLC）法。色谱柱：Grace Smart柱（250 mm×4．6 mm，5 m），用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：0．02 mol／L磷酸二氢钾溶液（取磷酸二氢钾2．7 g，加水溶解并定容至1 000 mL，用磷酸调pH至2．5）-乙腈（65∶35）；检测波长：258 nm。结果醋酸氯己定质量浓度在10．02～160．31 g／mL范围内与峰面积线性关系良好，回收率为102．47%，RSD为1．60%(n=9)。结论提高后的质量标准可行。

醋酸氯己定溶液；醋酸氯己定；高效液相色谱法

醋酸氯己定溶液是2002年版《中国人民解放军医疗机构制剂规范》收载的医院制剂，具有消毒、防腐作用，临床用于皮肤、黏膜消毒。其处方为醋酸氯己定0．2 g（规格0．02%）或0．5 g（规格0．05%），加水适量，按制备工艺制成1 000 mL，即得[1]。已有文献报道了采用紫外分光光度法[2]和高效液相色谱(HPLC)法[3-5]测定不同药物中醋酸氯己定的含量，但后者目前尚未被2010年版《中国药典(二部)》收载，2002年版《中国人民解放军医疗机构制剂规范》也是采用紫外分光光度法测定处方中醋酸氯己定含量的HPLC法[6-8]。本试验中拟建立测定醋酸氯己定溶液中醋酸氯己定含量的HPLC法，以增强测定方法的专属性和准确度。

1 仪器与试药

Waters 2695型高效液相色谱仪（美国Waters公司）；XS105型分析天平（梅特勒公司）。醋酸氯己定溶液（规格0．02%，批号为130711-1，130711-2，30711-3；规格0．05%，批号为130711-1，130711-2，30711-3，中国人民解放军第458医院提供）；醋酸氯己定对照品（中国药品生物制品检定所，批号为100183-201003，含量为96．2%）；乙腈（Merck公司，色谱纯），水为纯化水，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2．1 色谱条件

色谱柱：Grace Smart柱（250 mm×4．6 mm，5 μm），用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：0．02 mol／L磷酸二氢钾溶液（取磷酸二氢钾2．7 g，加水溶解并定容至1 000 mL，用磷酸调pH至2．5）-乙腈（65∶35）；检测波长：258 nm。理论板数按醋酸氯己定峰计算不低于2 000。

2．2 溶液制备

精密称取醋酸氯己定对照品适量，加水溶解并定量稀释制成每1 mL中约含25 μg醋酸氯己定的对照品溶液。精密量取样品5 mL，加水稀释制成每1 mL含醋酸氯己定25 μg的溶液，即得供试品溶液。取依处方比例，按生产工艺制备所得的不含醋酸氯己定的阴性对照品溶液，按供试品溶液制备方法制成阴性对照品溶液。

2．3 方法学考察

专属性考察：按拟订色谱条件，分别注入对照品溶液、供试品溶液和阴性对照品溶液各10 μL进行测定。结果表明，醋酸氯己定分离完全，阴性无干扰(见图1)。

图2 高效液相色谱图

线性关系考察：称取醋酸氯己定对照品约0．25 g，精密称定，置250 mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。分别精密量取贮备液0．5，2，4，5，6，7，8 mL，置50 mL容量瓶，加水制成醋酸氯己定质量浓度分别为 10．02，40．08，80．17，100．21，120．25，140．29，160．3 μg／mL的系列溶液，依法测定，以质量浓度（X）为横坐标、峰面积（Y）为纵坐标进行线性回归，得醋酸氯己定的回归方程 Y=13 160 X+53 121，r=0．999 8(n=7)。结果表明，醋酸氯己定质量浓液在10．02～160．31 μg／mL范围内与峰面积呈良好的线性关系。

精密度试验：取醋酸氯己定对照品溶液适量，按拟订色谱条件，连续进样6次，记录色谱图。结果的 RSD为0．2%(n=6)，表明仪器精密度良好。

重复性试验：精密量取样品（规格为0．02%，批号为130711-1）适量，依法制备供试品溶液，按拟订色谱条件测定含量。结果的RSD为0．2%（n=6），表明方法重复性良好。

回收试验：分别取醋酸氯己定对照品适量，加75%乙醇配成相当于标示量80%，100%，120%的供试品溶液，各精密量取3份，照拟订色谱条件测定，计算回收率。结果见表1。

表1 醋酸氯己定加样回收试验结果（n=9）

稳定性试验：取供试品(批号为130712-1)溶液，分别于0，3，6，12，24 h时进样测定含量。结果的 RSD为0．7%(n=5)，表明供试品溶液在24 h内稳定性良好。

定量限：精密称取醋酸氯己定对照品适量，加水稀释制成每1 mL中约含醋酸氯己定0．012 5 μg的溶液。按信噪比为10∶1，测得复方醋酸氯己定的定量限为0．012 5 μg／mL。

2．4 样品含量测定

采用拟订方法测定，结果规格为0．02%，批号为130712-1，130712-2，130712-3的样品含量分别为标示量的 99．42%，99．01%，98．86%；规格为0．05%，批号为130712-1，130712-2，130712-3的样品含量分别为标示量的 98．47%，100．32%，97．13%，均符合规定。

3 讨论

醋酸氯己定为孕激素类药物，2010年版《中国药典(二部)》及2002年版《中国人民解放军医疗机构制剂规范》均采用紫外分光光度法进行含量测定。为减少测定误差，方便试验操作，笔者建立了HPLC法测定醋酸氯己定软膏的含量。经方法学验证，该法操作简单、快速可靠，具有良好的线性、回收率和重复性，可用于醋酸氯己定溶液中醋酸氯己定的含量测定。

取醋酸氯己定对照品适量，加水制成每1 mL中含醋酸氯己定约25 μg的溶液，参照紫外-可见分光光度法[6]在200～400 nm波长扫描，根据紫外光谱图，选择258 nm为检测波长。本试验中对不同比例的流动相进行筛选，结果文中的流动相最佳，保留时间适当，峰形好。

药典中采用HPLC法进行含量测定时，通常以含量测定时的样品及对照品色谱图可用于醋酸氯己定的专属性鉴别试验，建议列入质量标准中，以提高检验效率。

参考文献:

[1]中国人民解放军总后勤部卫生部．中国人民解放军医疗机构制剂规范[M]．北京：人民军医出版社，2002：164．

[2]孙成宏，李云霞．紫外分光光度法测定复方醋酸氯己定涂膜剂中醋酸氯己定的含量[J]．解放军医药杂志，2013，25（8）：91-93．

[3]卢素格，刘红丽，杨瑞春．高效液相色谱测定皮肤消毒液中醋酸氯己定含量[J]．中国消毒学杂志，2011，28（3）：317-318．

[4]黄铁花，胡 松，张 耕．HPLC法同时测定复方黄松洗液中盐酸小檗碱和醋酸氯己定的含量[J]．中国药房，2013，24（39）：3 709-3 710．

[5]王 璐．高效液相色谱法测定复方替硝唑氯己定含漱液中醋酸氯己定含量[J]．中国药业，2012，21（15）：53-54．

[6]国家药典委员会．中华人民共和国药典（二部）[M]．北京：中国医药科技出版社，2010：附录29-附录31．

[7]中华人民共和国卫生部．中华人民共和国卫生部消毒技术规范[M]．北京:国家标准出版社，2008：121-122．

[8]张苏蘅，田晓薇，康阿龙．高效液相色谱法测定施美乐涂膜中醋酸氯己定含量[J]．中国药业，2013，22（6）：60-61．

Quality Control of Chlorhexidine Acetate Solution

Hu Wenjun,Deng Zhaohui,Li Aihong
(Institute for Drug and Instrument Control of Guangzhou Military Area Command,Guangzhou,Guangdong,China 510500)

Objective To improve the standard of the quality control of Chlorhexidine Acetate Solution．M ethods A method to determine Chlorhexidine Acetate by HPLC was established．The chromatographic column was the Grace Smart Column（250 mm×4．6 mm，5 m）, filled with octadecysilane chemically bonded silca;the mobile phase was monopotassium phosphate 0．02 mol／L(2．7 g to 1 000 mL，pH 2．5)-acetonitrile(65∶35);the detection wauelength 258 nm．Results Chlorhexidine Acetate showed excellent linearity,which were at the range of 10．02～160．31 μg／mL．The average recoveries was 102．47%,RSD was 1．60%(n=9)．Conclusion The methods were simple,sensitive and with good reproducibility and could be used to control the quality of Chlorhexidine Acetate Solution．

Chlorhexidine Acetate Solution;chlorhexidine acetate;HPLC

R927.2；R979.7

A

1006-4931(2015)21-0113-03

胡文军，男，浙江诸暨人，博士研究生，副主任药师，研究方向为药品检验，（电话）020-88698373（电子信箱）stars3＠sina．com。

2014-09-30；

2015-03-05)

全军医疗机构制剂标准提高科研专项课题，项目编号：13ZJZ19-3。