原发性肺腺癌组织中COX-2、EGFR、PDGFR 和nm23的表达变化及意义

张爱丽，孙蕾娜，张丹丹，王文普(天津港口医院，天津300456;天津医科大学附属肿瘤医院)

原发性肺腺癌组织中COX-2、EGFR、PDGFR 和nm23的表达变化及意义

张爱丽1，孙蕾娜2，张丹丹1，王文普1
(1天津港口医院，天津300456;2天津医科大学附属肿瘤医院)

摘要:目的观察环氧合酶2(COX-2)、表皮生长因子受体(EGFR)、血小板衍生生长因子受体(PDGFR)和转移抑制基因23(nm23)蛋白在原发性肺腺癌中的表达变化，探讨其与临床病理因素的关系。方法应用免疫组化S-P法检测COX-2、EGFR、PDGFR和nm23蛋白在109例原发性肺腺癌组织和30例正常肺组织中的表达。结果COX-2、EGFR、PDGFR蛋白在肺腺癌组织中的阳性率分别为78.0%、58.7%、74.3%，均显著高于正常肺组织(P均＜0.05)。nm23蛋白在肺腺癌组织中的阳性率为60.6%，显著低于正常肺组织(P＜0.05)。COX-2蛋白的表达与肺腺癌患者的年龄相关(P＜0.05); EGFR蛋白的表达与患者的年龄、淋巴结转移及TNM分期相关(P均＜0.05); nm23蛋白的表达与淋巴结转移及TNM分期相关(P均＜0.05)。肺腺癌组织EGFR和nm23、PDGFR和nm23的表达均呈负相关(r =－0.448，P＜0.05; r =－0.432，P＜0.05)，EGFR和PDGFR的表达呈正相关性(r = 0.403，P＜0.05)。结论在肺腺癌组织中，COX-2、EGFR、PDGFR表达升高，nm23蛋白表达降低，综合检测上述指标在判断肿瘤的恶性程度、估计预后等方面具有一定价值。

关键词:肺肿瘤;环氧合酶2;表皮生长因子受体;血小板衍生生长因子受体;转移抑制基因23doi: 10.3969/j.issn.1002-266X.2015.37.022

原发性肺癌的发病率在全球实体肿瘤中排名第一，亦居癌症相关死亡的首位［1］。肺腺癌约占原发性肺癌的45%，其起病隐匿、侵袭性强、预后差。随着分子生物学研究的不断深入，发现肺癌的发生、发展及转移是一个多阶段、多步骤、渐进演化的过程，这一过程与癌基因及其产物紧密联系。我们检测了表皮生长因子受体(EGFR)、环氧合酶2(COX-2)、血小板衍生生长因子受体(PDGFR)和转移抑制基因23(nm23)在肺腺癌组织中的表达，探讨其与原发性肺腺癌临床病理因素之间的关系。

1　资料与方法

1.1临床资料收集天津医科大学附属肿瘤医院2010年8月～2013年12月手术切除的109例肺腺癌患者的标本，其中患者男45例、女64例，年龄32～87岁、中位年龄62岁;有淋巴结转移者41例，无转移者68例。按照国际抗癌联盟2009年肺癌分期标准分期，Ⅰ期34例、Ⅱ期39例、Ⅲ期36例。患者术前均未接受任何抗肿瘤治疗。取远离肿瘤的正常肺组织30份作为对照。

1.2组织COX-2、EGFR、PDGFR和nm23的检测采用免疫组化S-P法。所有标本经10 %中性

甲醛固定，常规脱水后石蜡包埋，4 μm厚连续切片，HE常规染色和免疫组化染色。采用主要试剂有COX-2、EGFR、PDGFR和nm23，均购自北京中杉金桥生物技术有限公司，免疫组织化染色方法和步骤严格按试剂盒说明书进行，分别用PBS代替一抗作空白对照，已知阳性切片作阳性对照，光镜下观察HE染色切片和免疫组化染色切片。

1.3结果判定COX-2和nm23阳性信号定位于细胞质，EGFR和PDGFR阳性信号定位于细胞膜和(或)细胞质。根据其阳性细胞比例和染色强度进行阳性细胞评分:肿瘤细胞无着色为0分，淡黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分;阳性细胞数＜25%为1分，25%～50%为2分，51%～75%为3分，＞75%为4分;上述2项得分相乘得出总分:0分为－，1～4分为+，5～8分为+ +，9～12分为+ + +。

1.4统计学方法采用SPSS17.0统计软件。数据以百分比表示，比较采用χ2检验。相关性检验应用Spearman相关分析。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1肺腺癌组织及正常肺组织COX-2、EGFR、PDGFR和nm23蛋白表达比较COX-2和nm23阳性着色在细胞质，EGFR和PDGFR阳性着色在细胞膜和(或)细胞质。COX-2、EGFR、PDGFR蛋白在肺腺癌组织中的阳性率分别为78.0%(85/109)、58.7%(64/ 109)、74.3%(81/109)，在正常肺组织中的表达分别为16.7%(5/30)、26.7%(8/30)、53.3%(16/30)，两组织各指标比较，P均＜0.05。nm23蛋白在肺腺癌组织中的阳性率为60.6%(66/109)，显著低于正常肺组织93.3%(28/30)(P＜0.05)。

2.2肺腺癌组织COX-2、EGFR、PDGFR和nm23蛋白的表达与临床病理因素的关系见表1。

表1　肺腺癌组织COX-2、EGFR、PEGFR、nm23蛋白的表达与临床病理因素的关系

2.3肺腺癌组织中COX-2、EGFR、PDGFR和nm23蛋白表达的相关性肺腺癌组织中EGFR和nm23、PDGFR和nm23蛋白的表达均呈负相关性(r分别为－0.448、－0.432，P均＜0.05)，EGFR和PDGFR蛋白的表达呈正相关(r =0.403，P＜0.05)。COX-2蛋白的表达和EGFR、nm23、PDGFR之间均无相关性(r分别为－0.086、0.069、0.042，P均＞0.05)。

3　讨论

COX-2是前列腺素合成过程的重要限速酶，为诱导性酶，在大多数细胞中不表达或少量表达。当细胞受到细胞因子、生长因子和致癌物等刺激时，表达上调，并参与炎症和肿瘤的形成和发展。据文献［2、3］报道，COX-2蛋白在肺腺癌组织中的阳性率为31.3%～55%。Turk等［3］对非小细胞肺癌的研究发现，COX-2蛋白在肺癌中的表达与肺癌分期、组织学类型、预后无关，COX-2不是肺癌的一个独立的预后因素。本研究发现，COX-2蛋白在肺腺癌组织中的阳性率为78.0%，显著高于正常肺组织中的表达，且仅与肺腺癌患者的年龄相关，与患者的性别、肿瘤大小、分化程度、淋巴结转移及TNM分期无关，提示COX-2可能参与肺腺癌发生的早期阶段，而与肺腺癌的转移和预后无关。

EGFR是一种细胞膜表面的糖蛋白受体，具有酪氨酸激酶活性，在多种上皮性肿瘤高表达。在正常肺组织中EGFR蛋白的阳性率很低，在肺腺癌组织中的阳性率为68.4%～88.2%［4～6］。Liang等［5］对133例肺腺癌标本的免疫组化研究表明，EGFR蛋白的表达与患者的性别、年龄、吸烟状况、淋巴结转移与否以及分期无关。而时衍同等［6］认为，EGFR蛋白高表达与组织学分级低分化、淋巴结转移及肿瘤高分期有关。本研究中，EGFR蛋白在肺腺癌组织中的阳性率为58.7%，显著高于正常肺组织，且与淋巴结转移和高分期相关，表明EGFR蛋白的表达上调可能促进肿瘤的发生、发展和转移，EGFR蛋白的阳性表达提示预后不良。

PDGFR是酪氨酸蛋白激酶家族成员，是一种跨膜糖蛋白，能够促进血管生成和细胞的分裂与增殖，在机体生长发育、创伤修复等生理过程中起着极其重要的作用。Donnem等［7］研究结果表明PDGFR蛋白在肿瘤细胞中高表达预示着预后不良，而在间质细胞中高表达预示着较好的预后，认为PDGFR抑制剂用于非小细胞肺癌的治疗时应综合考虑各种因素。本研究中，PDGFR蛋白在肺腺癌组织中的阳性率为74.3%，显著高于正常肺组织中的表达，而与患者的性别、年龄、肿瘤大小、分化程度、淋巴结转移及TNM分期均无相关性，表明PDGFR可能参与肺腺癌发生的早期阶段，但与肺腺癌的预后无直接关系。

nm23基因是目前研究较多的转移抑制基因，该基因缺失、突变或功能丧失会促进肿瘤发生和转移。Liu等［8］通过对452例Ⅰ期非小细胞肺癌组织进行免疫组化染色，发现nm23蛋白的阳性率为70.8%，认为nm23是估计预后的一个重要且独立的生物学指标。Goncharuk等［9］对53例肺腺癌和51例肺鳞癌进行免疫组化检测，发现nm23-H1蛋白的表达缺失与非小细胞肺癌的高分期、远处转移呈正相关，但与淋巴结转移无关。本研究结果显示，nm23蛋白在肺腺癌组织中的阳性率为60.6%，显著低于正常肺组织，且与无淋巴结转移和低分期相关，表明nm23可能抑制肺腺癌的发生、发展和转移，可以作为肺腺癌患者预后较好的一个指标。

本研究发现，肺腺癌组织中EGFR和nm23、 PDGFR和nm23的阳性表达均呈负相关性，提示EGFR、PDGFR与转移抑制基因nm23之间的表达失平衡是原发性肺腺癌发生、发展的原因之一。EGFR 和PDGFR的表达呈正相关性，表明EGFR、PDGFR在肺腺癌的发生、发展中可能起协同作用。

肿瘤的发生、侵袭及转移是多个因素相互作用的复杂过程，多个因素相互促进，共同增强肿瘤的侵袭和转移能力。本研究表明，COX-2、EGFR、PDGFR 和nm23均与原发性肺腺癌的发生和发展密切相关，并具有协同作用，它们的综合检测在判断肿瘤的恶性程度、估计预后及指导临床治疗等方面具有一定价值。

参考文献:

［1］Jemal A，Bray F，CentermM，et al.Global cancer statistics［J］.CA Cancer J Clin，2011，61(2): 69-90.

［2］Kim SJ，Rabbani ZN，Dong F，et al.Phosphorylated epidermal growth factor receptor and cyclooxygenase-2 expression in localized non-small cell lung cancer［J］.Med Oncol，2010，27(1): 91-97.

［3］Turk HM，Camci C，Sevinc A，et al.Cyclooxygenase-2 expression is not amarker of poor survival in lung cancer［J］.Asian Pac J Cancer Prev，2012，13(1): 315-318.

［4］Ping W，Xia C，Fu S，et al.Immunohistochemistry with a novelmutation-specificmonoclonal antibody as a screening tool for the EGFR L858Rmutational status in primary lung adenocarcinoma ［J］.Tumour Biol，2015，36(2): 693-700.

［5］Liang Z，Zhang J，Zeng X，et al.Relationship between EGFR expression，copy number andmutation in lung adenocarcinomas［J］.BMC Cancer，2010，10: 376.

［6］时衍同，潘丽，王刚平，等.EGFR、VEGF及Ki-67在肺浸润性腺癌和微浸润性腺癌及浸润前病变组织中的表达及意义［J/ CD］.中华临床医师杂志(电子版)，2013，7(22): 9883-9889.

［7］Donnem T，Al-Saad S，Al-Shibli K，et al.Prognostic impact of platelet-derived growth factors in non-small cell lung cancer tumor and stromal cells［J］.J Thorac Oncol，2008，3(9): 963-970.

［8］Liu C，Liu J，Wang X，et al.Prognostic impact of nm23-H1 and PCNA expression in pathologic stage I non-small cell lung cancer ［J］.J Surg Oncol，2011，104(2): 181-186.

［9］Goncharuk VN，del-Rosario A，Kren L，et al.Co-downregulation of PTEN，KAI-1，and nm23-H1 tumor/metastasis suppressor proteins in non-small cell lung cancer［J］.Anndiagn Pathol，2004，8(1): 6-16.

收稿日期:( 2015-06-30)

文章编号:1002-266X(2015)37-0057-03

文献标志码:B

中图分类号:R734.2