正交试验优化伸筋草袋泡剂制备工艺

陈华张志勇黄伟芹叶建新杨小莹

（1新兴县人民医院，广东 云浮527400；2广东省新兴中药学校）

正交试验优化伸筋草袋泡剂制备工艺

陈华1张志勇2黄伟芹1叶建新2杨小莹2

（1新兴县人民医院，广东 云浮527400；2广东省新兴中药学校）

目的：对伸筋草袋泡剂制备工艺进行优化。方法：以加醇量、乙醇浓度及药粉与清膏质量比3个因素，伸筋草袋泡剂色泽、均匀性、溶化性、口感与总生物碱的溶出百分率为考察指标，采用正交试验，优化伸筋草袋泡剂制备工艺。结果：最佳制备工艺为伸筋草粗粉加10倍量30%乙醇，回流提取3次，药粉与浓缩清膏按质量比2.5倍混合制粒装袋。结论：该提取工艺稳定、合理、可行。

伸筋草袋泡剂；生物碱；醇提工艺；正交试验

伸筋草制备成半生型袋泡剂较汤剂更方便服用，有一定的特色和优势[1]，但其有效成分复杂，可溶性成分溶出低、口感与溶化性差[2-4]，为克服这些缺点，本文采用正交试验设计，以总生物碱的溶出百分率与综合评价为考查指标，对伸筋草袋泡剂制备工艺进行优化，提高有效成分溶出率。

1 仪器与材料

UV-2550型紫外分光光度计（日本岛津公司），766B-2远红外线辐射干燥箱（上海浦东荣丰科学仪器有限公司），SF100型多功能粉碎机（上海凯旋中药机械制造有限公司），8411型电动振筛机（浙江杭州三思仪器有限公司），DCH-160自动包装机 （天津市永创伟业包装机械有限公司），HH-S11-4-Z电热恒温水浴箱（上海医用恒温设备厂），FA1004电子天平（上海舜宇恒平科学仪器有限公司）。伸筋草药材购于广州清平药材市场，经中药学高级实验师鉴定为正品，并符合《中国药典》2010年版一部规定[5]。蔗糖粉、乙醇为分析纯，水为自制蒸馏水。

2 方法

2.1 制备工艺的优化设计

2.1.1 因素水平的确定根据相关文献[6-10]，影响伸筋草袋泡剂质量的因素有乙醇浓度、加醇量、提取次数和时间、药粉与清膏质量比等，本研究结合预试与前期单因素考察情况，选取3个主要因素，采用3因素3水平正交设计进行了优化，将单因素考察的最佳参数定为水平2，比其低与高者分别作为1与3水平，各因素水平见表1。

表1 正交试验因素水平

2.1.2 袋泡剂的制备将伸筋草药材净选、剔除杂质，于60℃下干燥烘干[5]，在多功能粉碎机上粉碎，并用电动振筛机过 2号筛（10～ 24目）[1]分等，得到粒度均匀粗粉。取伸筋草粗粉各50 g，共9份，按正交试验表1选择的条件进行9组试验，药材加乙醇加热提取3次[6]，分别为1.5，1，0.5 h，合并提取液，过滤，浓缩制成清膏。将上述药材粉碎通过2号筛，伸筋草粗粉作为吸汁颗粒，与清膏、适量蔗糖粉按质量比例混合均匀，制软材，手工制粒，60℃以下烘干，整粒。将上述颗粒以无菌滤纸袋在袋泡茶自动包装机上包装，参考《中国药典》2010年版用量用法[5]，制成每小包 5克袋泡剂，并做好相应标记，密封于塑料袋中备用。

2.2 综合评价

综合评价内容包括：①色泽（满分10分，考察每袋颗粒物料混合是否均匀或颜色一致性，评分越高越好）；②均匀性（考察每袋的质量差异，质量差异小或颗粒大小均匀无结块评分高）；③溶化性（考察每袋颗粒物料溶化速度与程度）；④口感（考察每袋颗粒甜度，入口甜度适宜细腻评分高）。综合评分结果见表2。

表2 综合评分结果

2.3 溶出度的测定

取按正交试验表1选择条件制备的伸筋草半生药型袋泡剂9份，进行9组试验，分别置于500m L烧杯中，各加90℃蒸馏水300 m L，分别保温浸泡20 m in；过滤，取样1 m L，以苦参生物碱为对照，采用酸性染料比色法测定溶出液中总生物碱的含量，20 m in时总生物碱的溶出百分率：

F20min=溶出液中总生物碱的含量/投料药材中生物碱理论含量 ×100%。

结果见表3。

2.4 试验结果分析

为使袋泡剂有良好溶化性与口感，并能溶出完全，以袋泡剂的综合评分与F20min作为优化考察指标，正交试验设计数据及结果见表3～ 4。

由表3～4可以看出，因素A对综合评分结果的影响有统计学意义（P＜0.05），因素A，C对综合评分、F20min结果的影响有统计学意义（P＜0.05）；因素B对结果的影响无统计学意义（P＞0.05）。以尽可能高的综合评分与F20min为优化筛选目标，多重比较同时兼顾生产成本，综合得出最佳工艺条件为A2B1C2，即药材粗粉加10倍量30%乙醇，提取3次，药粉与浓缩清膏按质量比2.5倍混合，制粒装袋。

表3 正交试验设计及结果

表4 方差分析

2.5制备工艺验证

按优选出的工艺条件A2B1C2，重复进行3批样品试验，进一步验证次优化工艺合理性，结果见表5。验证结果表明，3批样品按优选工艺试验，F20min都接近正交试验中的最大值，综合评价好，表明此优化工艺合理、稳定、可行，可作为批量生产的工艺参数。

表5 验证试验

3 讨论

3.1试验中，采用90℃蒸馏水300 m L，分别浸泡20 m in，是为了更符合人们使用袋泡剂的实际情况。民间群众风湿关节肿痛等症用药时，将伸筋草制剂置于杯内，用沸水 150～ 200 m L，加盖浸泡10～ 20 m in左右即可饮用，每次用1～ 2袋，每日2～ 3次。伸筋草是常用的抗风湿类中药，对筋脉拘急、关节屈曲、类风湿关节肿痛等疗效确切，且袋泡剂价格低廉、使用简单方便。

3.2伸筋草药材中总生物碱的提取也可采用酸水提取法[7]和超临界萃取法[9]，但酸水提取法工艺pH值过低，影响口感，提取工艺复杂、时间长、提取率低，其工艺不适用于工业化大生产；超临界萃取法对设备要求较高。故本试验采用了工艺相对简单、时间短、转化率高的醇提法。

3.3伸筋草中含有石松碱、伸筋草碱等多种生物碱成分，由于无市售石松碱或伸筋草碱，故以与这2种生物碱结构相近的苦参生物碱为对照，采用酸性染料比色法测定溶出液中生物碱的含量，以F20min粗略反应使用中总生物碱的溶出程度。

3.4如果考虑到糖尿病人服用，可采用甜菊苷、三氯蔗糖、阿斯巴甜或者蛋白糖代替糖粉进行试验，或者制备成无蔗糖型颗粒装袋。

3.5伸筋草袋泡剂继承了其汤剂原有的吸收快、价格低廉、方便服用的优势，又能减少原药材中挥发性成分及不耐热物质的散失、破坏，并具有较高浸出率与溶出速度，其体积小、便于运输和携带，并改善了口感、易于分剂量，更适合民间群众风湿关节肿痛等症的长期饮用，其制备简易，适宜批量生产。

[1] 张志勇，陈华，杨小莹，等.伸筋草袋泡剂的制备方法研制[J].中国民族民间医药，2014，18（12）：5.

[2] 史利利，何永志.伸筋草石松三萜化学成分[J].中国实验方剂学杂志，2012，18（9）：90-92.

[3] Wang XJ，Zhang GJ，Zhuang PY，et al.Lycojaponicumins A-C，Three alkaloids w ith an unprecedented skeleton from Lycopodi-um japonicum[J].Org Lett，2012，14（10）：2614-2617.

[4] 张志勇，陈华，杨小莹，等.伸筋草及其制剂研究进展[J].中国药师，2014，17（3）：474-477.

[5] 国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）[S].北京：中国医药科技出版社，2010：165-166.

[6] 何凡，刘威，徐秋阳，等.伸筋草醇提工艺研究[J].辽宁中医药大学学报，2011，13（7）：145-146.

[7] 何凡，刘威，徐秋阳，等.伸筋草总生物碱提取工艺[J].中国试验方剂学杂志，2011，17（7）：25-27.

[8] 廖仰平，叶建新，区伟雄，等.田基黄袋泡剂的制作方法研究[J].中国民族民间医药，2012，10（20）：13-14.

[9] 潘利明，韩亮.伸筋草超临界萃取物工艺参数优化及药效验证[J].时珍国医国药，2007，18（8）：1944-1995.

[10] 林志云，潘利明.伸筋草超临界提取精油的β-环糊精包合工艺研究[J].中药材，2007，30（8）：1030-1031.

Preparation Technology of Common Clubmoss Straw Bag Bubble Agent Optim ized by Orthogonal Test

Chen Hua1，Zhang Zhiyong2，Huang Weiqin1，Ye Jianxin2，Yang Xiaoying2（1 The People’s Hospital of Xinxing County，Guangdong Yunfu 527400，China；2 Xinxing Traditional Chinese Medicine School of Guangdong Province）

Objective：To optim ize the preparation technology of common clubmoss straw bag bubble agent.M ethods：The orthogonal test was conduced to optim ize the preparation technology of common clubmoss bag bubble agent using three factors including the amount of alcohol，ethanol concentration and the mass ratio of powder and paste，and the follow ing indexes were used for investigation such as the colour and luster of common clubmoss straw bag bubble agent，color uniformity，melting，taste and dissolution percentage of total alkaloids.Results：As the optimal preparation process，10 times amount of 30%ethanol was added to common clubmoss herb coarse powder，circum fluence extracting for 3 times，2.5 times of mass ratio of powder and concentrated paste for mixing，granule making and packaging.Conclusion：The extraction process was stable，reasonable and feasible.

Common Clubmoss Bag Bubble Agent；Alkaloids；Alcohol Extraction Process；Orthogonal Test

10.3969/j.issn.1672-5433.2015.06.005

2015-03-03）

广东省中医药局科研课题（20132066）

陈华，女，主管药师。研究方向：药剂学与临床药学。E-mail：46220732@qq.com

张志勇，男，高级讲师。研究方向：药剂学。通讯作者E-mail：zhiyong502@qq.com