枯草芽孢杆菌对海兰褐商品蛋鸡产蛋后期蛋品质和蛋壳超微结构的影响

2015-01-21王翔宇孙考仲柏明娜张玉科牛淑玲

饲料工业 2015年10期

■王翔宇孙考仲田颖崔宇张磊柏明娜张玉科牛淑玲

（1.吉林大学动物科学学院，吉林长春 130062；2.吉林省永吉县动物疫病预防控制中心，吉林永吉 132200；3.辽宁省农机质量监督管理站，辽宁沈阳 110034；4.辽宁医学院，辽宁锦州 121001）

鸡蛋在收集、分级、包装、运输、储藏和加工等作业环节中都不可避免地受到载荷的作用，导致蛋壳产生裂纹和破裂，蛋壳破损所造成的损失率在6%～10%之间。尤其在蛋鸡的产蛋后期，所产鸡蛋的蛋壳变薄、破软壳率增加。因此，研究如何提高产蛋后期蛋鸡的蛋壳品质具有重要的意义。枯草芽孢杆菌是农业部公布的12种可直接饲喂动物的饲料级微生物添加剂之一。吴俊锋等(2012)试验研究表明，枯草芽孢杆菌及其发酵豆粕能够极显著提高蛋黄颜色、降低蛋壳比例，使蛋壳厚度、蛋壳强度及蛋黄比例有所增加。李俊波等(2009)研究指出，在蛋鸡日粮中添加枯草芽孢杆菌制剂具有显著降低鸡蛋破损率、提高蛋重和蛋壳厚度的趋势。本试验以产蛋后期海兰褐商品蛋鸡为研究对象，通过在基础日粮中添加枯草芽孢杆菌，研究其对蛋品质和蛋壳超微结构的影响，旨在为改善产蛋后期蛋壳结构、提高蛋壳品质和降低鸡蛋破损率提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 试验设计

本试验在长春市绿园区鹏宇养殖场内进行。选取380日龄健康、产蛋均匀的海兰褐商品蛋鸡480只，随机分成2组，每组240只鸡，组内3个重复。对照组饲喂基础日粮，试验组在基础日粮中添加500 mg/kg的枯草芽孢杆菌。预饲期为7 d，试验期45 d。

1.2 试验日粮

基础日粮组成及营养水平见表1。枯草芽孢杆菌由沈阳博善英胜生物科技有限公司提供，其中枯草芽孢杆菌含量＞2.0×1010CFU/g，添加剂量按说明书，为500 mg/kg。

1.3 饲养管理

预饲期7 d，试验期45 d，采用人工饲喂，每日喂料3次，喂料时间分别为6：00、11：00、16：00。每天15：00 收蛋。

1.4 测定指标及方法

表1 基础日粮组成及营养水平（风干基础）

1.4.1 蛋品质的测定

分别于试验的第1、3、5周，每周的前3 d，每天以每个重复为单位，随机取蛋10枚，用于测定蛋品质。鸡蛋重量、蛋白高度、蛋黄颜色和哈氏单位由蛋品质测定仪EA-019（以色列奥卡品牌）自动地测量和计算；蛋壳强度用蛋壳强度测定仪EFR-01（以色列奥卡品牌）测定;蛋壳厚度由蛋壳厚度测试仪ESTG-1（以色列奥卡品牌）测试；蛋形指数用游标卡尺进行测定；蛋黄重的测定是将鸡蛋小心打碎，仔细分离蛋黄蛋清，剪断蛋黄上系带，使其与蛋清完全分开，将蛋黄上的蛋清用滤纸吸干，然后称重。蛋黄比例是蛋黄重占鸡蛋总重的百分比。

1.4.2 蛋壳超微结构的观察

1.4.2.1 鸡蛋壳样品选取和处理

每组随机选取6枚鸡蛋，将鸡蛋敲碎，去除蛋清、蛋黄等内容物，先用自来水后用去离子水冲洗干净，然后自然风干后备用。

1.4.2.2 扫描电镜制样和观察

本试验用zeiss EVO18钨丝灯扫描电镜进行观察。将制备好的鸡蛋壳小块样品，用导电胶带黏于样品台上。黏好的样品喷金之后，置于电镜样品仓中，在高真空下，对样品各个部位，在不同倍率下分别进行观察拍照。

1.5 数据处理与分析

所有数据均采用SPSS 13.0软件进行单因素方差分析，用LDS法进行多重比较。试验数据用“平均数±标准误”表示。

2 结果

2.1 枯草芽孢杆菌添加剂对蛋鸡蛋品质的影响(见表2)

表2 枯草芽孢杆菌添加剂对蛋鸡蛋品质的影响

从表2可以看出，试验组蛋重高于对照组5.28%，且差异极显著（P＜0.01）；试验组的蛋壳强度高于对照组22.21%，且差异显著（P＜0.05）。同时，试验组的蛋壳颜色、蛋壳厚度、蛋形指数、蛋黄比例、哈氏单位相比于对照组均有提高的趋势，但差异均不显著（P＞0.05）。

2.2 枯草芽孢杆菌添加剂对鸡蛋蛋壳超微结构的影响

2.2.1 蛋壳外表面

通过电镜观察，两组的蛋壳外表面如图1～4所示。两组的鸡蛋壳外表面均有明显的龟背状裂纹，其上分布有大小不等的气孔。在100×的显微水平，对照组的蛋壳外表面的龟背状裂纹较少且分布不均；试验组的蛋壳外表面的龟背状裂纹多且分布均匀，裂纹细而密。在1 000×的显微水平，可以看到对照组蛋壳外表面的裂隙较宽，单位面积里裂隙较少；试验组的裂隙较窄，单位面积里的裂隙较多。

图1 对照组鸡蛋壳外表面(100×)

图2 试验组鸡蛋壳外表面(100×)

图3 对照组鸡蛋壳外表面(1 000×)

图4 试验组鸡蛋壳外表面(1 000×)

2.2.2 蛋壳横断面(见图5～图6)

图5 对照组鸡蛋蛋壳横断面(250×)

图6 试验组鸡蛋蛋壳横断面(250×)

电镜观察显示，鸡蛋壳的横断面由内向外依次可分为：壳膜层、乳锥层、柱状层、表面晶体层和表层。由图5～6可看出，在250×的显微水平，对照组的乳头较少而且乳头较宽；试验组的乳锥层的突起结构更加紧密，乳头数较多而且乳头较窄。柱状层约占整个蛋壳厚度的二分之一，蛋壳的柱状层由块状晶体单元组成,块状晶体单元相互连接增加了蛋壳的整体性,增强了蛋壳的耐压强度。试验组的柱状层的晶体数明显增多，排列更加复杂，为蛋壳强度的增强提供了结构基础。表面晶体层约占整个蛋壳厚度的三分之一。该层由紧密排列的晶体组成，本试验观察到试验组的表面晶体层结构更加致密，进一步增强了蛋壳的强度。

3 讨论

3.1 枯草芽孢杆菌添加剂对蛋鸡蛋品质的影响

本研究结果表明，试验组的蛋重极显著高于对照组（P＜0.01），试验组的蛋壳颜色、蛋壳厚度、蛋形指数、蛋黄比例、哈氏单位均优于对照组,但差异均不显著（P＞0.05）,这与李丽红(2004)的试验结果相一致。芽孢杆菌在肠道内生长繁殖过程产生了乳酸或VFA,能使肠道内pH值降低，而酸性环境促进了Ca和P两种矿物元素的电离，这是他们被吸收的必要条件。Ab⁃delqader A等(2013)发现，用1 g/kg的枯草芽孢杆菌饲喂产蛋后期的白壳蛋鸡,其产蛋量、蛋重、蛋壳重量、蛋壳厚度、蛋壳密度相比于对照组都有所提高，这可能是添加枯草芽孢杆菌后，蛋鸡的消化道环境更有利于Ca、P的吸收。本试验发现：试验组与对照组的蛋壳厚度虽无显著差异,但试验组的蛋壳强度显著高于对照组（P＜0.05），关于枯草芽孢杆菌对蛋壳强度影响机理有待于进一步探究。

3.2 枯草芽孢杆菌添加剂对鸡蛋蛋壳超微结构的影响

通过蛋壳外表面的照片看到，蛋壳在产出时就有裂纹区,这些裂纹区很可能成为以后破裂的始点。通过电镜观察发现：试验组蛋壳的外表面有明显的程度不一的龟背状裂纹,且裂纹细而密,对照组的裂纹稀而少。试验组的乳锥层的突起结构较紧密，乳头数较多而且乳头较窄，对照组的乳头较少而且乳头较宽；试验组的柱状层的晶体数明显增多，排列更加复杂；而对照组的柱状晶体数则较少；且试验组的表面晶体层也更加致密。万秋蓓等(2006)曾通过对海赛克斯鸡蛋壳扫描电镜的观察来探索影响蛋壳强度的机理，试验结果发现鸡蛋壳强度的大小可能与壳膜层壳膜的厚度、壳膜纤维的粗细,锥体层乳头间空隙的大小以及覆盖层上裂隙的深浅和数量有关。李琦章等(2011)对蛋壳超微结构观测记录与蛋壳常规质量指标相关分析结果表明，蛋壳外表面的裂隙数、乳头数均与蛋壳强度呈极显著正相关；而裂隙宽、乳头宽与蛋壳强度呈显著负相关。本试验也发现试验组蛋壳超微结构的变化对蛋壳强度有一定的影响，而关于枯草芽孢杆菌对蛋壳超微结构影响的作用机制，也有待于进一步探究。