盐酸左旋咪唑对雏鸡免疫功能及生长性能影响的研究

■郭 洋 刘敏跃 李 鹏 马晓威 祝鑫一 张 燚 何剑斌 刘明春

（1.沈阳农业大学畜牧兽医学院，辽宁沈阳 100866；2.辽宁省农牧业机械研究所有限公司，辽宁沈阳 110036；3.沈阳市苏家屯区动物卫生监督管理局，辽宁沈阳 110101；4.东北大学档案馆，辽宁沈阳 100014）

免疫增强剂也称免疫佐剂，是一类通过非特异性途径提高机体对抗原或微生物特异性反应的物质，该途径包括增强巨噬细胞活性，增强抗原物质的免疫原性和稳定性，促进抗体的合成与分泌等。根据其来源可以将其分为如下几类：微生物制剂类，如分枝杆菌及其他细菌制剂；生物制剂类，如胸腺因子及转移因子等；中草药类，如黄芪、党参等；化学合成小分子类，如左旋咪唑。左旋咪唑(Levamisole)为咪唑衍生物，是兽医临床广泛应用的抗蠕虫药物，作为一种免疫增强剂，可使机体免疫功能由低下恢复正常，同时也能增强正常机体细胞免疫和体液免疫，且具有改善增重和饲料转化率的作用，并且具有广谱、高效、药源充足、性质稳定等优点。自Renoux等(1971)发现左旋咪唑能增强小鼠布氏杆菌菌苗免疫效果后，人们对左旋咪唑的免疫调节作用进行了广泛的研究。为了研究左旋咪唑对雏鸡免疫功能及生长性能的影响，进行了相关试验。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 试验动物

海兰褐雏鸡，1日龄购入，雌、雄兼有，饲喂不含任何抗菌药物的全价饲料，自由采食与饮水。

1.1.2 受试药物

盐酸左旋咪唑可溶性粉(规格：100 g∶25 g)，沈阳市兽药厂生产；地塞米松：作为免疫抑制剂对照，江苏中邦制药有限公司生产；小牛胸腺肽注射液：作为免疫增强剂对照（规格：20 mg∶2 ml，0.9%生理盐水稀释20倍，每瓶稀释40 ml），山东米歇尔生物制品有限公司生产；鸡新城疫低毒力活疫苗（La Sota株）。规格：500羽份，吉林正业（原吉林省生物制品厂）生产。

1.1.3 试验试剂

PBS（pH值7.2、0.01 mol/l）；阿氏液；鸡新城疫标准阳性血清及阴性血清（两者均系辽宁省动物疫病预防控制中心惠赠）；1%鸡红细胞(Red Blood Cell,RBC)悬液：健康鸡采血，每只采2 ml，共采4只，与等体积阿氏液混合，用pH值7.2的PBS洗涤3次（1 000 r/min、10 min离心），用PBS配成1%RBC悬液，4℃保存。

1.2 试验方法

1.2.1 试验动物分组及免疫

至30日龄时，选无临床症状的健康雏鸡180只，随机分为6组，每组30只，雌、雄各半。其中1组为空白对照组，1组为免疫增强剂（胸腺肽）对照组，1组为免疫抑制剂（地塞米松）对照组，另3组为试验组（分别为左旋咪唑低、中、高剂量组）。

左旋咪唑可溶性粉：混饮，每千克体重4 mg（低剂量组）、8 mg（中剂量组）、12 mg（高剂量组），连用3 d；地塞米松：肌肉注射，2.5 mg/kg体重，连用3 d；小牛胸腺肽注射液：肌肉注射，0.4 ml/只，连用3 d。给药后第3 d进行免疫，将每瓶新城疫疫苗用0.9%生理盐水稀释至50 ml，肌肉注射，0.5 ml/只。

1.2.2 体液免疫检测

免疫后第7、14、21 d，随机从各组取10只鸡心脏采血，采用微量法进行血凝抑制（HI）试验检测抗体效价，求出每组平均值，从而确定受试药物对鸡只体液免疫所产生的作用。

1.2.3 体重、脾脏指数、法氏囊指数测定

免疫后第7、14、21 d，每组随机抽取10只鸡，空腹称重后，放血致死。小心取出脾脏和法氏囊，用吸水纸吸干血迹，分别称取重量，计算脾脏指数[脾重量（mg）/体重（g）]及法氏囊指数[法氏囊重（mg）/体重（g）]。每组求出平均值。

1.2.4 数据统计及处理

结果以“平均值±标准差”表示，利用SPSS 13.0统计软件进行方差分析，比较各时间点抗体效价及其他相关指标的差异性。

2 结果与分析

2.1 体液免疫检测结果(见表1)

表1 各组鸡血清ND抗体滴度HI检测结果（log2）

从表1可知，除低剂量组外，左旋咪唑其他剂量组在各时间点上，鸡血清ND抗体滴度均显著或极显著高于空白对照组（P＜0.05或 P＜0.01），其中中剂量组各时间点上血清抗体滴度最高，但是与免疫增强剂组相比仍有显著差距(P＜0.05)。免疫抑制对照组在14 d和21 d两个时间点上其ND抗体滴度均与空白对照组有极显著差异（P＜0.01）。上述结果表明，适量的左旋咪唑可以在一定时间内提高受试鸡只的ND血清抗体水平。

2.2 体重、脾脏指数、法氏囊指数检测结果（见表2～表4）

表2 各组鸡平均体重检测结果(g)

各组鸡只的平均初始体重差异不显著，从第14 d开始到试验结束，左旋咪唑中剂量组鸡只体重高于空白对照组，且差异极显著（P＜0.01），同时也高于左旋咪唑低剂量组和高剂量组。试验结果表明，相比高、低剂量组来说，中等剂量的左旋咪唑对受试鸡只增重的促进作用更为明显。但是，与免疫增强剂组相比，各剂量组左旋咪唑的增重效果均有所不如，且差异显著或极显著（P＜0.05或 P＜0.01）。免疫抑制剂地塞米松则能影响试验中后期鸡只体重的增长。

对于脾脏指数的影响方面，根据表3可知，左旋咪唑中剂量组鸡只的脾脏指数在第7 d和第14 d时显著或极显著高于空白对照组（P＜0.05或P＜0.01），同时在所有时间点上均高于左旋咪唑低剂量组和高剂量组。表明相比高、低剂量组来说，中等剂量的左旋咪唑对受试鸡只的脾脏发育有促进作用。此外，胸腺肽和地塞米松分别作为免疫增强剂和免疫抑制剂能够显著或极显著促进或抑制鸡只脾脏的发育（P＜0.05或P＜0.01）。

表3 各组鸡平均脾脏指数检测结果

表4 各组鸡平均法氏囊指数检测结果

根据表4可知，第14 d和第21 d时，左旋咪唑中剂量组鸡的法氏囊指数均高于空白组、低剂量组和高剂量组，且差异显著或极显著(P＜0.05或 P＜0.01)。表明中等剂量的左旋咪唑对受试鸡只的法氏囊的发育有促进作用。但是，与免疫增强剂组相比，试验前期(第7 d)的法氏囊指数仍有显著差异(P＜0.05)，而试验全期免疫抑制剂地塞米松则对法氏囊的试验全期生长发育并无显著影响。

3 讨论

3.1 左旋咪唑的免疫调节作用

左旋咪唑属咪唑骈噻唑类抗线虫药，后来人们又发现其具有免疫调节作用。左旋咪唑的免疫调节机理表现在以下几个方面：①促进免疫细胞的增殖、成熟,增强其吞噬、趋化功能,诱导机体产生各种细胞因子；②增加机体抗体的产生水平；③抗氧化和清除机体自由基；④增强巨噬细胞功能,激活、提高补体活性。此外，左旋咪唑还具有促进动物生长发育等功效。

王书全等通过试验证明了左旋咪唑能明显提高新城疫LaSota疫苗特异性免疫应答抗体水平,免疫器官指数、血液中ANAE+T淋巴细胞百分率显著提高。王新卫等通过试验证明了左旋咪唑的添加能够提高新城疫抗体滴度,并且与免疫后时间长短有关系。张传津用盐酸左旋咪唑-维生素E可溶性粉对疫苗免疫后的鸡进行试验，结果表明，盐酸左旋咪唑-维生素E可溶性粉具有促进机体细胞免疫和体液免疫应答反应的作用,口服盐酸左旋咪唑-维生素E可溶性粉后，鸡对IBD疫苗及ND疫苗特异性免疫应答反应明显增强,血清ND抗体及IBD抗体水平明显升高,血液中ANAE+淋巴细胞百分率显著提高。

本试验结果表明，左旋咪唑可以增强雏鸡的体液免疫水平，提高ND疫苗抗体滴度；试验中，中等剂量（8 mg/kg）的左旋咪唑较高剂量组（12 mg/kg）和低剂量组（4 mg/kg体重）的免疫增强作用更为明显，说明左旋咪唑的免疫调节作用与使用剂量存在一定关系。此结果与上述报道和Gavkare等的报道相符合。

本试验还证明了左旋咪唑对免疫器官的发育也有积极影响，对于脾脏、法氏囊指数均有提高作用，同时其作用也与使用剂量呈一定关系。免疫器官重量的增加是器官生长发育快的表现，而指数的提高则意味着免疫系统成熟较快，说明左旋咪唑可促进雏鸡早期免疫器官的生长发育和迅速成熟，从而使雏鸡的整体免疫机能加强，抵抗各种病原微生物感染的能力和抗各种应激的能力得到一定程度的提高；平均体重的增加则显示了左旋咪唑对雏鸡生长性能的正面影响。

3.2 关于免疫抑制剂与免疫增强剂对照组

地塞米松是本试验过程中作为对照使用的免疫抑制剂，试验过程中，地塞米松表现出了较强的免疫抑制作用，较好地实现了免疫抑制对照的作用，与操继跃等的报道相符合。

此外，虽然左旋咪唑对雏鸡的免疫及生长性能具有正向调节作用，但与本试验中所应用的对照免疫增强剂——小牛胸腺肽相比，其免疫增强水平还存在一定差距，这可能是由于小牛胸腺肽为胸腺提取物，其作用效果较化学合成的左旋咪唑更好；同时，也可能是由于不同的给药方式（本试验中胸腺肽采用了肌肉注射，而左旋咪唑则采用了混饮）造成了两者效果的差异，造成差异的具体原因将在后续试验中进行探讨。

通过本次试验对两种免疫增强剂的免疫效果进行了比较，有效地验证了左旋咪唑的免疫增强作用，可见左旋咪唑可以作为免疫增强剂用于鸡只的饲养，具有较为广阔的市场前景。

（参考文献13篇，刊略，需者可函索）