噻托溴铵对慢性阻塞性肺疾病患者肺功能及相关炎症介质表达的影响

朱 娜 胡 鑫 黄 禹 杨春燕

解放军第一七一医院呼吸内科，江西九江 332000

慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease，COPD）是一种以气流受限呈进行性发展且不完全性可逆为特征的疾病，伴有炎性反应[1]。国内COPD患病率约为8.2%[2]，近年来发病率和病死率呈上升趋势，严重影响了患者的生活质量，也给患者家庭及社会带来较大的经济负担。 2006 年慢性阻塞性肺疾病全球倡议（GOLD）指出COPD 是能够被预防和治疗的，并认为使用吸入性长效支气管扩张剂可延缓COPD患者病情的恶化，减轻患者的临床症状[3]。长效支气管扩张剂包括长效抗胆碱能药物和长效P 受体激动剂[4]。 噻托溴铵（Tiotropium Bromide）为新型长效抗胆碱能药物[5]，本研究探讨其对COPD 患者肺功能及相关炎症介质表达的影响。

1 资料与方法

1.1 病例纳入与排除标准

病例纳入标准：①既往无呼吸道感染、心血管疾病、支气管哮喘病等其他肺部疾病；②近半个月内未使用其他支气管扩张剂或糖皮质激素者；③所有患者均签署知情同意书。 排除标准：①对噻托溴铵等抗胆碱药物过敏者；②患有严重心脏、肝、肾等重要脏器疾病者；③患有高血压、糖尿病等全身慢性疾病者；④孕妇或哺乳期妇女。

1.2 一般资料

选择2013 年10 月～2014 年10 月解放军第一七一医院门诊和住院部收治的中重度COPD 患者共100 例为研究对象，将其随机分为两组，观察组和对照组，每组各50 例。所有研究对象均符合中华医学会呼吸病学分会COPD 学组制订的COPD 诊治指南[6]，诊断标准按照GOPD 诊断标准[7]。 所选患者均为中重度COPD 患者，肺功能符合如下诊断标准[8]：第1 秒用力呼气量占用力肺活量的百分比（FEV1/FVC）均小于70%。 中度患者：50%≤第1 秒用力呼气量 （FEV1）＜80%预计值，重度患者：30%≤FEV1＜50%预计值。对照组中男31 例，女19 例；年龄40～78 岁，平均（64.3±6.9）岁；其中中度COPD 患者29 例，重度COPD 患者21 例。观察组中男33 例，女17 例；年龄41～79 岁，平均（65.2±7.1）岁；其中中度COPD 患者30 例，重度COPD患者20 例。 两组患者性别比、年龄、病情等一般资料比较，差异无统计学意义（P ＞0.05），具有可比性。

1.3 方法

对照组：常规治疗，吸入糖皮质激素，口服茶碱，急性发作时吸入短效β 激动剂予以缓解。 观察组：在对照组治疗的基础上吸入噻托溴铵（商品名：天晴速乐， 正大天晴药业集团股份有限公司， 批号20060454）18 μg，1 次/d。 2 个月为1 个疗程。 治疗期间禁止使用其他抗胆碱能药物。

1.4 观察指标及其检测方法

1.4.1 肺功能检测 使用日本CHEST 肺功能仪检测患者肺功能。具体方法：分别检测治疗前、治疗后2 个月FEV1、FEV1/FVC，FEV1占预计值的百分比。注意事项：①为确保检查的顺利进行以及获得可靠的检测结果，患者在检查之前需要练习用口：深吸气，然后快速用爆发力吹气并持续吹气6 s。 ②支气管激发试验和支气管扩张试验按要求需要停用相应支气管扩张剂。③支气管激发试验、支气管扩张试验等会出现一些不良反应如胸闷、咳嗽、心悸、气促、轻微手颤、面红、头痛、咽痛、头晕等，一般休息后可自行缓解。 检查时需做好处理不良反应的准备工作。

1.4.2 运动耐力检测 以6 min 步行距离（6MWD）观察患者治疗后运动耐力改变情况。 具体如下：依据2002年美国胸科学会提出的六分钟步行试验指南[9]，在长35 m 的走廊里进行检测。 试验前给患者讲解清楚试验过程，并且排除干扰。 检测开始后患者在走廊里尽力行走，记录患者在6 min 内能够完成的最远距离。1.4.3 血清炎症介质检测 分别于治疗前、治疗后2 个月空腹抽取静脉血4 mL，于试管中低温离心，取上清血清，-20℃冷冻保存，待统一测定血清中白介素（IL）-8、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）的浓度。 采用酶联免疫吸附测定（ELISA）试剂盒， 试剂盒购自北京普尔伟业生物科技有限公司，检测方法严格按照试剂盒说明书操作。ELISA 法具体操作步骤：①标准品稀释：按照试剂盒操作说明。②加样：分别设空白孔对照孔（空白对照孔不加样品以及酶标试剂，其他步骤均相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标板上准确加入标准品50 μL，待测样品孔中加入样品稀释液40 μL 和待测样品10 μL（样品稀释5 倍）。③温育：封板膜封板后置37°C 孵育30 min。 ④配液：将洗涤液按照使用说明用蒸馏水稀释适当倍数后备用。⑤洗涤：揭掉封板膜，甩去液体，每孔加200 μL 洗涤液，静置30 s 后弃去，重复5 次，拍干。 ⑥加酶：处空白孔外，每孔加入酶标试剂50 μL。 ⑦温育：同操作步骤3。⑧洗涤：同操作步骤5。⑨显色：每孔先加入显色剂A 50 μL，再加入显色剂B 50 μL，摇床上混匀，37°C 避光显色15 min。⑩终止：每孔加终止液50 μL，反应终止。 11○测定：以空白孔为基准，450 nm 波长下测量各孔的OD 值。

1.5 统计学方法

采用SPSS 16.0 软件进行统计分析， 计量资料以均数±标准差（s）表示，采用t 检验，以P ＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组治疗前后肺功能指标比较

两组患者治 疗前FEV1、FEV1/FVC、FEV1占预计值的百分比比较，差异均无统计学意义（P ＞0.05）。治疗后两组患者肺功能FEV1、FEV1/FVC、FEV1占预计值的百分比均较治疗前显著增加，差异有统计学意义（P ＜0.05）。 观察组治疗后FEV1、FEV1/FVC、FEV1%预计值明显高于对照组，差异有统计学意义（P ＜0.05）。见表1。

2.2 两组治疗前后运动耐力变化比较

治疗前，对照组和观察组平均6 min 步行距离分别为（272.6±42.1）、（271.7±40.0）m，差异无统计学意义（P ＞0.05）。 治疗后对照组和观察组平均6 min 步行距离[（304.0±45.2）、（349.0±45.2）m]均较治疗前显著增加，差异有统计学意义（P ＜0.05），且观察组较对照组增加更明显（P ＜0.05）。 见图1。

表1 两组治疗前后肺功能指标比较（s）

表1 两组治疗前后肺功能指标比较（s）

注：FEV1：第1 秒用力呼气量：FVC：用力肺活量

组别 例数 FEV1（L）治疗前 治疗后 t 值 P 值FEV1/FVC（%）治疗前 治疗后 t 值 P 值观察组对照组t 值P 值50 50 1.31±0.50 1.18±0.60 0.98＞0.05 1.58±0.75 1.22±0.72 8.14＜0.05 5.32 4.98＜0.05＜0.05 47.87±13.23 47.67±9.08 0.92＞0.05 55.90±15.07 50.86±7.89 9.23＜0.05 4.21 3.87＜0.05＜0.05 FEV1 占预计值的百分比（%）治疗前 治疗后 t 值 P 值37.25±18.91 31.22±18.73 0.58＞0.05 44.20±0.78 31.78±0.72 9.30＜0.05 5.20 6.06＜0.05＜0.05

图1 两组治疗前后运动耐力变化比较

2.3 血清炎症介质比较

两组患者治疗前血清IL-8、MCP-1 和TNF-α 水平比较差异无统计学意义（P ＞0.05）。 两组患者治疗后血清IL-8、MCP-1 和TNF-α 水平均显著低于治疗前（P ＜0.05）， 观察组比对照组效果更加显著 （P ＜0.05）。 见表2。

3 讨论

COPD 患者肺组织以及气道中的M 受体减少，胆碱能性气道收缩致使气道阻塞[10]，因此抗胆碱能药物在治疗COPD 中发挥了重要作用。噻托溴铵为新型抗胆碱药物，被GOLD 推荐作为COPD 患者的基础用药[3]，其与内源性ACH 竞争性结合M3 受体而选择性拮抗M3 受体功能从而具有治疗效果[11]，因此它较其他抗胆碱能药物有更好的治疗效果。

肺功能检查被认为是诊断COPD 的“金标准”[12]，COPD 患者由于气道和肺泡壁损坏，肺的弹性回缩能力降低，引起FEV1和FVC 下降[13]。 本次研究数据表明， 观察组给予噻托溴铵治疗后FEV1、FEV1/FVC 均较治疗前显著提高（P ＜0.05），与对照组比较，疗效显著（P ＜0.05），提示噻托溴铵对COPD 的治疗效果还是很明显的。

表2 两组治疗前后血清炎症介质水平比较（ng/mL，s）

表2 两组治疗前后血清炎症介质水平比较（ng/mL，s）

注：IL-8：白介素-8；MCP-1：单核细胞趋化蛋白-1；TNF-α：肿瘤坏死因子α

组别 例数IL-8治疗前 治疗后 t 值 P 值MCP-1治疗前 治疗后 t 值 P 值观察组对照组t 值P 值50 50 0.82±0.29 0.84±0.30 1.32＞0.05 0.31±0.26 0.78±0.21 10.14＜0.05 11.32 14.98＜0.05＜0.05 39.05±13.50 41.30±11.20 1.56＞0.05 39.05±13.50 41.30±11.20 1.56＞0.05 9.21 12.87＜0.05＜0.05 TNF-α治疗前 治疗后 t 值 P 值79.56±8.31 80.96±7.42 0.98＞0.05 65.17±5.81 71.28±5.37 10.34＜0.05 8.20 9.06＜0.05＜0.05

6 min 步行距离检测方法安全、无创、易行，已在临床上广泛应用于反映患者的运动耐量，以此了解患者的呼吸系统状况及全身状况[14-16]。 本研究分别在治疗前后对患者进行6 min 步行距离测试，结果发现治疗之前两组患者步行最远距离无显著性差异（P ＜0.05），治疗2 个月后观察组患者步行最远距离显著大于对照组（P ＜0.05），说明噻托溴铵可以很好地改善患者的呼吸系统，提高患者的运动耐量。 同时，由于6 min步行距离检测方法可以评价患者的全身状况，包括神经系统、呼吸系统、心血管系统等器官和系统的功能状况， 是比较全面了解患者整体生命质量的指标，因此可以看出噻托溴铵对患者的治疗效果很理想。

炎性因子在COPD 的发病中起着非常重要的作用，巨噬细胞可产生细胞因子TNF-α，进而刺激气道单核细胞和中性粒细胞等释放IL-8，诱导炎性反应[17]。MCP-1 是一种单核细胞趋化因子， 对炎症细胞有重要的趋化作用[18]。 有学者认为炎性因子可在一定程度上反映肺功能，可作为COPD 病情的判断指标[19-22]。噻托溴铵还可以抑制炎性反应来发挥治疗COPD 的作用[23]。本研究结果表明，观察组给予噻托溴铵治疗后可显著减少患者血清中IL-8、MCP-1、TNF-α 浓度，与对照组比较差异有统计学意义（P ＜0.05），说明噻托溴铵明显减轻了患者的炎性反应，全身抗炎作用显著。

综上所述， 吸入噻托溴铵具有显著的抗炎作用，可有效改善COPD 患者肺功能， 增加患者运动耐力，可考虑作为治疗COPD 的首选用药。

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