内皮素－1在肝纤维化和肝硬化中的变化及意义

张小华

（武汉大学基础医学院，湖北 武汉430071；公安县人民医院普外科，湖北 公安434300）

黄玉荣，杨娟

（公安县人民医院普外科，湖北 公安434300）

内皮素（ET）是近年来发现的重要血管活性物质，其对肝硬化患者肝损害和门脉血流动力学的影响受到广泛关注［1－3］。我们通过检测患者血清ET－1、透明质酸酶（HA）、Ⅲ型前胶原（PⅢP）、Ⅳ型胶原（Ⅳ－C）、层粘连蛋白（LN）水平，探讨ET－1在肝硬化形成中的意义，并分析ET－1与门脉血流动力学的关系，为疾病的治疗提供依据。

1 对象与方法

1.1 对象

选取我院2013年1月至2014年1月收治的肝炎肝硬化患者60例（观察组）和慢性肝炎患者20例（对照组）。观察组中男36例、女24例，年龄19～71（42±11）岁。均符合2000年西安第10次全国传染病与寄生虫病会议修订的 《病毒性肝炎防治方案》中肝硬化诊断标准，肝功能Child－Pugh分级A级20例、B级22例、C级18例。对照组中男13例、女7例，年龄21～68（36±12）岁。所有患者均无原发性心、肺、肾疾病和糖尿病、高血压等内分泌系统疾病及其他炎性疾病。观察组与对照组一般情况比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。

1.2 方法

所有患者采血前3d停用血管活性剂、利尿剂等，禁食12h后自肘静脉采血3ml注入装有10g／dl EDTA－Na2和抑肽酶的聚苯乙烯试管中混匀，4℃离心，分离血浆－20℃保存待测；进行彩色多普勒超声检查，观察门静脉主干血流方向，用脉冲多普勒在门静脉官腔中取样，取样角度＜60°，并测量门静脉宽度（Dpv）、门静脉血流速度（Vpv），根据血管面积和流速计算门静脉血流量（Qpv）。

主要仪器：GC－1500型γ放射免疫计数器（安徽中科中佳科学仪器有限公司）、EOS－880半自动生化分析仪（意大利）、HP－M2410型彩色多普勒超声仪（日本）。主要试剂及药盒：北京东亚免疫技术研究所制造的ET测定试剂盒、10g／dl EDTA－Na2、抑肽酶，上海海军医学生物技术中心制造的 HA、Ⅳ－C、LN试剂盒，芬兰Orion Diagnostica公司制造PⅢP试剂盒。

1.3 统计学分析

采用SPSS19.0统计软件进行统计分析。计量资料均以（±s）表示，计量资料组间比较采用t检验，计数资料组间比较采用χ2检验及直线相关分析。P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 肝硬化患者血清ET－1和HA、PⅢP、Ⅳ－C、LN水平及其与肝功能分级的关系

观察组患者血清ET－1和HA、PⅢP、Ⅳ－C、LN水平均明显高于对照组，差异具有统计学意义（P＜0.05）；血清ET－1、HA、PⅢP、Ⅳ－C、LN水平呈现出肝功能C级＞B级＞A级，且均明显高于对照组，差异具有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 肝硬化患者血清ET－1和HA、PⅢP、Ⅳ－C、LN水平及其与肝功能分级的关系

2.2 肝硬化患者血清ET－1与HA、PⅢP、Ⅳ－C、LN的相关性分析

肝硬化患者血清ET－1与HA、PⅢP、Ⅳ－C、LN呈现明显正相关。见表2。

表2 肝硬化患者血清ET－1与HA、PⅢP、Ⅳ－C、LN的相关性

2.3 不同肝功能状态下血清ET－1与Dpv、Vpv、Qpv的关系

观察组患者血清ET－1、Dpv、Vpv、Qpv均明显高于对照组，差异具有统计学意义（P＜0.05）；与肝功能分级同步，Dpv呈现C级＞B级＞A级，且与A级比较，B级明显升高，差异具有统计学意义（P＜0.05），与B级比较，C级明显升高，差异具有统计学意义（P＜0.05）。Vpv、Qpv均呈现A级＞B级＞C级，且与A级比较，B级明显升高，差异具有统计学意义（P＜0.05），与B级比较，C级明显升高，差异具有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

表3 不同肝功能状态下血清ET－1与Dpv、Vpv、Qpv的关系

由表3知，患者血清ET－1与Dpv呈现强正相关（r＝0.837，P＜0.05），与Vpv、Qpv呈明显负相关（r＝－0.752、－0.714，P＜0.05）。

3 讨论

肝硬化是临床上常见的慢性肝病，肝功能损害、门脉高压是其突出表现［4］。内皮素（ET）来源于内皮细胞，由21个氨基酸残基构成，具有广泛的病理生理作用，对机体多种组织、器官产生复杂的生物学效应［5－8］。ET家族认为由3个血管活性肽构成，在ET－1、ET－2、ET－3中，ET－1具有最强的缩血管作用［9－10］，肝脏为机体ET来源的主要场所之一，而ET－1和其受体作为病原因素和诱发因子在肝脏疾病中被广泛研究［11－12］。

肝硬化时ET－1水平表现为肝功能C级＞B级＞A级＞对照组，表明肝硬化患者血清ET－1升高与肝功能损害程度有关。肝功能越差，ET－1升高越明显，提示ET－1对肝硬化形成和发展起重要作用。肝脏合成ET－1部位主要在间质细胞及胆道上皮细胞［13－14］。正常人肝脏间质细胞及胆道上皮细胞ET－1弱表达，ET－1受体在肝内广泛分布于肝细胞、窦状隙内皮细胞、门静脉、中央静脉，故肝硬化内皮细胞、胆道上皮细胞ET－1合成明显升高［15－16］。ET－1能调节肝脏微循环，促使肝血窦收缩，导致肝血窦血流减少甚至完全停止，细胞供氧减少，从而发生缺血、缺氧性损伤及慢性纤维化等［17－19］。同时肝脏是ET－1清除场所之一，肝硬化患者清除ET－1能力下降，血清ET－1会明显升高。肝硬化时肝细胞变性坏死外，同时部分肝细胞增生，肝内血管重建，增生的血管内皮合成分泌ET－1，肝功能减退对ET－1灭活能力降低［20］。随着ET－1水平增高，引起肝内小血管、肝窦、门静脉收缩而导致门脉血流动力学改变，血管壁对切应力的感应变化进一步刺激ET－1释放增加，加重门脉高压，构成恶性循环［21］。

HA、PⅢP、Ⅳ－C、LN可以反映胶原生成及纤维化情况。本研究中患者血清ET－1和HA、PⅢP、Ⅳ－C、LN均明显高于对照组，并且肝硬化患者血浆中ET－1水平随Child－PughA、B、C级呈递增变化，B级与A级、C级与B级ET－1水平差异明显，表明ET－1与肝硬化的严重程度呈明显正相关性。

门静脉宽度（Dpv）、门静脉血流速度（Vpv）和门静脉血流量（Qpv）反映了门脉血流动力学的变化。本研究中比较了不同肝功能状态下门静脉宽度（Dpv）、门静脉血流速度（Vpv）和门静脉血流量（Qpv）水平与血清ET－1水平相关性，呈现血清ET－1与Dpv呈现强正相关，与Vpv、Qpv呈明显负相关，反映了ET－1对门脉血流动力学的影响。

综上所述，肝硬化者血浆ET－1水平反映了肝硬化的严重程度，并对肝硬化门脉血流动力学造成紊乱，在门脉高压的形成及发展中起重要作用。

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