蒺藜总皂苷对家兔动脉粥样硬化模型血清IL-6、TGF影响的实验研究

张 波，赵晓莲，杨 宇，张明远，梁衍锋，王芳芳

（佳木斯大学基础学院，黑龙江 佳木斯 154007）

近年来，随着人民生活水平的不断提高，心脑血管疾病的发病率呈现逐年上升，并且已经超过肿瘤的的趋势，成为发病率和死亡率跃居我国第一位的疾病。而动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）正是其重要的病理生理学基础［1］。随着基础研究和临床试验不断的深入，治疗AS 趋向于毒性低、副作用小等方向。我国有着悠久的中医药传统，丰富的药用动植物资源是巨大的医药宝库，从中药中筛选出药物不仅是可行的途径，而且同西药筛选相比较，具有筛选时间短、节省人力、物力、财力、毒性低、副作用小等优势。蒺藜总皂苷为心脑疏通胶囊的主要成分［2］，是目前临床上广泛应用于治疗心血管疾病的中成药，并显示出良好的应用价值，然而目前对其在抑制炎症细胞浸润、免疫性因子表达方面的研究却很少，且其作用机制尚无定论。本文研究者复制了AS家兔模型，检测GSTT 对家兔血清中炎症因子、抗炎因子水平的影响，进而为心脑疏通胶囊在临床上应用于AS治疗的机制进行初步的探讨。

1 材料与方法

1.1 实验药物

IL-6放射免疫试剂盒由北京北免东雅生物技术研究所提供；TGF酶联免疫试剂盒购于上海逸晗生物有限公司。

1.2 实验方法

50只健康雄性纯种日本大耳白兔（购自佳木斯大学实验动物中心），兔龄4～5个月，体重（1.8±0.2）kg，实验前普通饲料喂养1周后，随机分为5组：正常对照组继续喂以正常普通饲料无任何添加；AS模型组给予高脂饲料喂养；小剂量治疗组，给予高脂饲料同时添加6.3mg／kg·d GSTT；大剂量治疗组，给予高脂饲料添加12.6mg／kg·d GSTT；阳性药物对照组，给予高脂饲料添加2.35mg／kg·d辛伐他汀，定期称体重、抽血。连续喂养6周后，禁食8h，腹腔注射20%乌拉坦20mL／kg，麻醉状态下沿腹正中线切开皮肤、结缔组织，活体剥离腹主动脉取血2mL。

1.3 实验指标

腹主动脉取的全血，静止几分钟后，分离上层血清，全自动生化分析仪测定血清总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）；血清IL-6水平由酶联免疫吸附方法测定；TGF水平放射由免疫分析方法测定。

1.4 统计学方法

采用SPSS17.0软件进行统计学分析，实验所得数据以均数±标准差方式表示。多组样本均数的比较采用AVON分析。

2 结果

2.1 TC、TG 水平的测定

与正常对照组相比较，模型组，大、小剂量GSTT 治疗组，阳性药物对照组，血清中TC 及TG 水平明显升高（P＜0.05），说明AS 模型建立成功。与AS 模型组相比较，GSTT 大、小剂量治疗组，阳性药物对照组TC、TG 浓度水平显著降低（P＜0.05）；大、小剂量治疗组比较差异无显著性（P＞0.05）。见表1。

表1 实验第5周各实验组TC、TG 水平（±s，mmol／L）

表1 实验第5周各实验组TC、TG 水平（±s，mmol／L）

＊与空白对照组比较P＜0.05，＃ 与模型组比较P＜0.05。

2.2 IL-6、TGF水平的测定

与AS模型组相比较，GSTT 大、小剂量治疗组，阳性药物对照组血浆IL-6浓度水平升高、同时TGF 浓度水平显著降低（P＜0.05）；大、小剂量治疗组比较差异无显著性（P＞0.05）。见表2。

表2 实验第5周各实验组IL-6、TGF水平（±s，mmol／L）

表2 实验第5周各实验组IL-6、TGF水平（±s，mmol／L）

＃与模型组比较P＜0.05。

3 讨论

动脉粥样硬化的发生过程是一个相当缓慢的过程，而且是一个变化的动态过程［3］。现国际上已公认，高脂血症是导致AS的最重要原因，其中TC、LDL-C 被视为致AS的危害因子。高血脂诱发家兔动脉粥样硬化，是经典的研究动脉粥样硬化病理机制和治疗方法的动物实验模型。本实验中TG、TC 水平明显增高，说明高脂血症实验动物模型成功建立。二级干预试验表明：降低血TC、TG 水平能显著减缓肢体和冠状粥样斑块的形成。在本次实验研究中，蒺藜总皂苷能够显著降低实验性AS 家兔血清中TC和TC 的含量水平，说明其能延缓动脉粥样硬化血脂的形成。

随着研究逐步深入，一些化学因子和细胞因子不断被检出，近年来又重新提出了AS是炎症的观点，AS的表现符合炎症表现的普遍规律［4～6］，而越来越多的证据表明，炎症过程在动脉粥样硬化及其并发症的发生与发展过程中起着重要作用［7］，近年来对其发病机制的研究过程中发现炎症启动动脉粥样硬化的发生并影响其进程［8］，其实质上是对AS发病机理研究的概括和启示。

从AS是一种炎症的观点出发，其治疗只有针对炎症发生发展的基本环节，才能真正达到防治的目的。炎症的表现既有损伤一面，也有抗损伤一面，不能一概而论。血管炎症标记物的血浆水平有助于区分高危心血管病患者。这些标记物包括P选择素（P-selectin）、白介素-6（IL-6）、白介素-1（IL-1）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、肿瘤转化因子（TGF）、可溶性细胞内黏附因子和C反应蛋白（CRP）。免疫反应在AS中的作用是由微环境中致炎因子／抗炎因子平衡决定［9］。

本实验对蒺藜总皂苷拮抗动脉粥样硬化炎症反应的作用机制进行了实验研究，可能通过：①降低血浆TG和LDL-C水平，延缓动脉粥样斑块的形成；②IL-6含量降低、TGF的含量升高，说明蒺藜总皂苷具有明显抑制炎症因子的形成以及促进抗炎因子生成的作用。减轻血管壁炎症反应，进而产生抗AS的作用。为心脑疏通胶囊应用于动脉粥样硬化的抗炎治疗给予我们一些新的启示，展现出一种新的研究方向和途径，为其临床应用提供了坚实的理论基础。

［1］管高峰，华先平，王琳，等.丹红注射液对动脉粥样硬化家兔血管壁炎症的影响［J］.中西医结合心脑血管病杂志，2006，10（4）：884-886

［2］胡文兰.高密度脂蛋白抗动脉粥样硬化的研究进展［J］.国外医学内科学分册，2003，30（6）：235-323

［3］陈贺中，朱晓峰，赵丽娜.动脉粥样硬化病因的现代概念［J］.黑龙江医药科学，1999，22（3）：40

［4］Ross R.Atherosclerosis-an inflamrnatory disease［J］.N Engl J Med，1999，340：115-126

［5］Leinnoen M，Soiklsu P.Infectious and atherosclerosis［J］.Scand Cardiovas J，2000，34（1）：12-20

［6］Kiechl S，Egger G，MayM，et al.Chronic infectious and risk of carotid atherosclerosis prospective results from a large population study［J］.Circulation，2001，103（8）：1064-1070

［7］Li JJ.Silent myocardial ischemia may be related to inflammatory response［J］.Med Hypotheses，2004，62：252-256

［8］王贺田，李娟.急性冠状动脉综合征与炎症的关系［J］.黑龙江医药科学，2007，30（6）：88-89

［9］Ficht lscherer S，Brener S，Heeschen C，et al.Interleukin-10serum levels and syst emic endothelial vasoreact ivit y in patients withcoronary artery disease［J］.J Am Coll Cardiol，2004，44（1）：44-49