人附睾蛋白4和糖类抗原125在卵巢癌诊断中的应用探讨

邱晓明，陈添彬，陈静，陈媛媛（福建医科大学附属第一医院检验科，福建福州 350005）

卵巢癌是一种常见的妇科生殖器官恶性肿瘤，病死率极高。一直以来糖类抗原125（CA125）被广泛应用于卵巢癌的诊断、疗效观察和病情监测，但是由于其假阳性率高、特异性差，对卵巢癌的诊断效能有限。人附睾蛋白4（HE4）是胰蛋白酶抑制剂属性的乳清酸性蛋白，当处于成熟糖基化形式时其相对分子质量为（20～25）×103［1－3］。HE4在呼吸道和生殖器官组织上皮中呈低表达，但在卵巢癌组织中呈高表达［4］。有文献报道超过80%的卵巢上皮癌患者的血清中发现HE4升高［5－6］，因此，HE4可作为卵巢癌血清肿瘤标志物。本研究通过测定卵巢癌患者、卵巢癌手术后患者及妇科生殖器官良性肿瘤患者的血清HE4及CA125水平，探讨HE4在卵巢癌的诊断、治疗、预后观察中的应用价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料选择本院2012年1月至2013年10月收治的疑似妇科生殖器官肿瘤患者574例为研究对象，年龄15～85岁，中位数为42岁。其中卵巢癌患者18例（卵巢癌组），年龄22～72岁，中位数为57岁；卵巢癌术后复查12例（卵巢癌术后组），年龄26～67岁，中位数为45岁；其他良性肿瘤及非肿瘤性疾病患者544例（良性组）年龄15～85岁，中位数为40岁。

1.2 方法所有患者均采空腹静脉3mL，3000r／min离心10min分离血清，用罗氏Cobase 601全自动电化学发光免疫分析仪测定HE4和CA125水平，试剂、校准品和质控品均为罗氏原装配套产品。

1.3 统计学处理采用SPSS18.0统计软件对数据进行统计处理，结果以中位数表示。采用Kolmogorov－Smirnova检验数据是否符合正态分布，不符合正态分布的数据，组间比较采用非参数检验（独立样本Kruskal－Wallis检验），P＜0.05表示比较差异有统计学意义。

2 结果

2.1 正态分布检验经Kolmogorov－Smirnova检验，HE4和CA125在人群中呈非正态分布（P＜0.05）。

2.2 三组患者两项指标比较卵巢癌组患者血清HE4和CA125水平中位数（262.0pmol／L，373.3U／mL）均明显高于良性组（48.0pmol／L，17.2 U／mL）和卵巢癌术后组（49.2 pmol／L，18.4U／mL），比较差异有统计学意义（P＜0.05）；良性组与卵巢癌术后组比较差异无统计意义（P＞0.05）。

2.3 HE4水平的趋势在所有受试人群中，HE4水平在50岁以后有升高趋势。见图1。

图1 HE4水平的趋势图

2.4 两项指标的ROC 曲线分析结合组织病理学诊断，对574例患者的HE4、CA125水平进行ROC 曲线分析，得到HE4及CA125曲线下面积分别为0.984和0.911。HE4对于诊断卵巢癌的最佳临界值为115.7pmol／L，灵敏度为94.4%，特异性为96.9%。CA125对于诊断卵巢癌的临界值为122.25 U／mL，灵敏度为77.8%，特异性为92.3%，若以正常参考值上限35U／mL作为界值，灵敏度为83.3%，特异性为75.4%。

3 讨论

卵巢癌是妇科肿瘤中病死率居首位的恶性肿瘤，其症状表现与是否存在附件包块有关，然而，由于大多数附件包块是良性的，因此将卵巢癌从附件包块中筛选出来或在术前评估患者患恶性肿瘤的风险，对治疗方案的制定至关重要［7］。目前临床上常用的卵巢肿瘤标志物为CA125，由于CA125在其他疾病中也可升高［8］，因此对卵巢癌的鉴别作用不佳。HE4是一项新的卵巢癌特异性肿瘤标志物，国内少部分实验室已开展此项检测项目，但其正常参考值范围尚无统一标准。罗氏诊断公司HE4电化学发光检测试剂盒说明书提供的参考值为西班牙和德国两家实验室获得的健康妇女HE4水平，HE4≤140 pmol／L为正常值范围。

CA125和HE4的联合检测，可用于女性卵巢癌风险评估［9］。本研究结果显示，卵巢癌患者血清HE4和CA125浓度中位数分别为262.0pmol／L 和373.3 U／mL，均明显高于良性组和卵巢癌术后组，比较差异有统计学意义（P＜0.05），良性组与卵巢癌复发组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。故HE4和CA125均可作为卵巢癌的辅助诊断以及术后监测肿瘤是否切除完全或有无复发的指标。对于卵巢癌的诊断，HE4在ROC曲线下的面积、诊断灵敏度和特异性都优于CA125。诊断界值设定为115.7pmol／L时，HE4对卵巢癌诊断的灵敏度为94.4%，特异性为96.9%，单一指标即可达到很好的辅助诊断效果，联合检测的意义更多地体现在风险评估上。本研究所得的诊断界值115.7pmol／L 低于试剂盒提供正常上限值140pmol／L，笔者分析这可能是由于种族差异及仪器差异引起的，提示每个实验室应建立适用于各实验室的正常参考值范围和医学决定值水平。本研究中HE4检测对诊断卵巢癌的特异性与Moore等［10］报道的数据相近，但是灵敏度却明显高于该报道，这可能是由于该报道以140pmol／L 为正常上限值作为阳性判别依据造成的。本研究所得恶性卵巢癌组和良性组HE4水平均值与陈斌鸿等［11］报道的数据相近，这也反映了HE4水平在人群中分布的相似性。本研究结果显示，女性在50岁以后HE4水平有升高趋势，提示HE4水平可能与女性绝经年龄有关。

综上所述，血清HE4检测在恶性卵巢癌辅助诊断中具有良好的应用效能。HE4检测可以单独用于卵巢癌的诊断或治疗监测，也可以与CA125检测联合用于卵巢癌的风险评估，但每个实验室应当建立适合各实验室的正常参考值范围。

［1］Israeli O，Goldring－Aviram A，Rienstein S，et al.In silico chromosomal clustering of genes displaying altered expression pattern in ovarian cancer［J］.Cancer Genet Cytogenet，2005，160（1）：35－42.

［2］Bingle L，Singleton V，Bingle CD.The putative ovarian tumor marker gene HE4（WFDC2），is expressed in normal tissue and undergoes complex alternative splicing to yield multiple protein isoforms［J］.Oncogene，2002，21（17）：2768－2773.

［3］Kirchhoff C.Molecular characterization of epididymal protein［J］.Rew Repord，1998，3（2）：86－95.

［4］Drapkin R，Von Horsten HH，Lin Y，et al.Human epididymis protein 4（HE4）is a secreted glycoprotein that is over expressed by serous and endometrioid ovarian carcinomas［J］.Cancer Res，2005，65（6）：2162－2169.

［5］Hellstrom I，Raycraft J，Hayden－Ledbetter M，et al.The HE4（WFDC2）protein is a biomarker for ovarian carcinoma［J］.Cancer Res，2003，63（13）：3695－3700.

［6］Moore RG，Brown AK，Miller MC，et al.The use of multiple novel tumor biomarkers for the detection of ovarian carcinoma in patients with a pelvic mass［J］.Gynecol Oncol，2008，108（2）：402－408.

［7］Montagnana M，Danese E，GiudiciS，et al.HE4in ovarian cancer：from discovery to clinical application［J］.Adv Clin Chem，2001，55（1）：1－20.

［8］Bast RC Jr，Brewer M，Zou C，et al.Prevention and early detection of ovariancancer：mission imposible［J］.Recent Results Cancer Res，2007，174（6）：91－100.

［9］董作亮，杜雪，李江，等.血清人附睾分泌蛋白4和卵巢恶性肿瘤风险值在上皮性卵巢癌的诊断和风险评估中的应用价值［J］.中国慢性病预防与控 制，2013，21（4）：400－442.

［10］Moore RG，McMeekin DS，Brown AK，et al.A novel multiple marker bioassay utilizing HE4and CA125for the prediction of ovarian cancer in patients with a pelvic mass［J］.Gynecol oncol，2009，112（1）：40－46.

［11］陈斌鸿，李彩霞，伍启康，等.人附睾蛋白4在卵巢癌诊断中的临床效能评价［J］.国际检验医学杂志，2013，34（12）：1514－1515.