梅毒螺旋体抗体测定方法比较

金花

【摘要】目的：对胶体金法、酶联免疫法(ELISA)、免疫发光法、凝集法（TPPA）四种梅毒螺旋体抗体测定方式进行比较。方法：选取我院60份确诊为梅毒患者的血清，同时抽取60例健康人群的血清，对四种检测方式进行比较。结果：四种检测方法中凝集法检测率为100%，准确率最高，酶联免疫法与免疫法光法的阳性平均检出率为98%，而胶体金法的梅毒阳性检出率为95%，且假阳性出现比例为3%，与其他三种检测率比较,p＜0.05,差异具有统计学意义。结论：胶体金法在操作中简便快速，但假阳性假阴性均有发生，质量控制没有另外三种方法好，凝集法检出率最高，为最准确的梅毒抗体检测方式。

【关键词】 梅毒螺旋体抗体；胶体金；测定

【中图分类号】R446.5 【文献标识碼】B【文章编号】1004-4949(2014)07-0489-01

梅毒是一种由苍白密螺旋体苍白亚种病毒所引起的疾病，本病起病较慢，是一种全身性的疾病，主要通过性来传播。由于本病对患者的伤害较大且发病缓慢，因此本病的早期诊断是非常重要的。血清诊断为主要的诊断方式，目前在临床中通常有胶体金法、酶联免疫法、免疫发光法、凝集法四种，本院将对四种抗体测定方式进行研究比较，寻找准确率最高的测定方式。

1资料与方法

1.1一般资料

选取我院2012年3月——2014年3月间60份确诊为梅毒患者的血清，同时抽取60例健康人群的血清，60例梅毒患者中有37例为一期梅毒患者，16例为二期梅毒患者，7例为三期梅毒患者。所有患者血清均来自于我院体检以及住院部患者群中，所有标本收集完成后均行血清分离处理，放置冰箱保存。

1.2仪器试剂

方法一：胶体金法（SYP）试剂来源：北京万泰生物药业股份有限公司。

方法二：酶联免疫法(ELISA)仪器:科华ST-360酶标仪试剂来源：英科新创（厦门）科技有限公司。

方法三：免疫发光法(CMIA)仪器：ABBORT C16200 全自动生化免疫分析仪，试剂配套。

方法四：凝集法（TPPA）试剂来源：富士瑞必欧珠式会社。

1.3结果观察

对四种测定方式测定的梅毒阳性率进行比较，并做好详细记录。

1.4数据统计

数据均采用spss17.0软件进行处理，计数资料均以%表示，采用卡方检验，p＜0.05认为差异具有统计学意义。

2.结果

对四种测定方式测定的梅毒阳性率进行比较后，总结出以下结果：

表1阳性检测率

检测方式 一期梅毒37例 二期梅毒16例 三期梅毒7例 健康人群60例胶体金法 35例（94.6%） 15例（93.8%） 7例（100%） 2例（3.3%）酶联免疫法 36例（97.3%） 16例（100%） 7例（100%） 1例（1.7%）免疫发光法 36例（97.3%） 16例（100%） 7例（100%） 0例凝集法 37例（100%） 16例（100%） 7例（100%） 0例P ＜0.05 - - ＜0.05四种检测方法中凝集法检测率为100%，准确率最高，酶联免疫法与免疫发光法的阳性平均检出率为98%，而胶体金法的梅毒阳性检出率为95%，且假阳性出现比例为3%，与其他三种检测率比较p＜0.05认为差异具有统计学意义。

3讨论

近年来梅毒在我国的发病率依旧呈现上升的趋势，因此对其进行筛检、防治能够有效的减少梅毒发病率。人体是梅毒螺旋体的唯一的宿主，人体感染梅毒后机体会产生梅毒特异性和非特异性两种抗体。特异性抗体就是实验室检测中的抗体因子，对其进行检测也称为梅毒螺旋体血清试验［1］。其检测方式通常有胶体金法、酶联免疫法、免疫发光法、凝集法四种。而非特异性梅毒抗体是由于梅毒螺旋体在破坏的过程中会释放抗原性物质，而抗原性物质会刺激机体产生抗体性反应素，非梅毒螺旋体特异性抗体进行检测多应用在梅毒患者初筛实验中。

凝聚法主要是将提纯的梅毒螺旋体抗原包被在人工载体明胶颗粒上，对血清中所含有的梅毒螺旋体抗体进行检测。凝胶法所用试剂灵敏度高且特异性非常强，因此对梅毒螺旋体抗体具有较高的检出率，此观点在我院的调查中也被充分证实，而且凝聚法是国际上公认的梅毒确诊方式。但此种方式在临床中也有一定的限制性，例如窗口期问题［2］。凝聚法主要是对IgM 和 IgG两者的混合体进行检测，无法判定疾病活动与否，因此不可作为疗效诊断。而且此方式的试剂成本高、操作程序繁琐且检测时间较长，因此在高密度的检测中并不适合，且由于实验成本昂贵因此对于普通人群也会造成较大的经济负担［3］。

酶联免疫法检测率与凝聚法基本相近，具有较高的梅毒螺旋体抗体检出率。此种检测方式是在基因工程的基础上建立的。其检测是通过重组多肽抗原的方式对梅毒抗体进行检测，重组多肽抗原与以往使用的抗原不同，重组多肽抗原具有更高的灵敏性，提高了检测的检出率。且酶联免疫法可以进行全自动大量的检测，且重复性较高，能够方便结果的保存和管理，且检出率高，因此在临床中应用非常广泛。但此法同凝聚法相同，都是对IgM 和 IgG 的混合体进行检测，因此也存在相同的问题，不可作为疗效诊断［4］。但酶联免疫法的操作方式非常简便，且成本较比凝聚法要廉价很多，因此非常适合普通患者。

胶体金测试方式是近年来兴起的一种免疫检测技术，此种方式操作简便、检测速度快捷，因此在临床中应用也非常广泛。该试验应用现代生物工程技术制备的高度纯化单克隆梅毒螺旋体的基因工程抗原，能选择寻找可以相结合的抗体。但此方式也有一定的缺陷，若患者体内抗体含量过高或过低时，容易出现假阴性、假阳性结果。

免疫发光法的检测原理为标本中的梅毒抗体和包被有重组梅毒抗原的微粒子结合后，洗涤，加入标记有acridinium的抗人IgM或IgG，再次洗涤，加入预激发液和激发液，通过相对光强度对梅毒抗体水平进行测试。此种方式的阳性检出率较高，但同样为高成本检测方式。

总之，凝聚法的阳性检出率最高，其次为免疫法光法和酶联免疫法，胶体金法的阳性检出率最低。

参考文献

［1］贺军涛,尹佳锋,杨波,张彦平,吴晓康,孟浩,王香玲.梅毒螺旋体生物学特性及测定方法学评价［J］.西部医学,2013,19(07):98-99

［2］宋焕景,侯生根,陈建春,彭德志.梅毒特异性抗体试验生物学假阳性分析［J］.国际检验医学杂志,2013,07(03):127-128

［3］苏红霞.三种方法检测梅毒螺旋体抗体比较分析［J］.中国医疗前沿,2012,13(24):117-119

［4］郭喜燕,徐静.全自动化学发光法与TPPA法检测血清梅毒螺旋体抗体的方法比较［J］.中国现代药物应用,2012,14(09):625-626