老年子宫内膜样癌患者术后组织神经纤毛蛋白1、2和锌指E-盒结合同源异形盒-1的表达及意义

王琰琰

(辽宁医学院附属第一医院妇产科，辽宁 锦州 121001)

肿瘤发展过程中常伴有明显的侵袭和播散。神经纤毛蛋白(NRP)1和2作为内皮细胞表面的受体，不仅可以促进癌变，还可能与肿瘤的生长进程相关〔1,2〕。转录因子锌指E-盒结合同源异形盒(ZEB)-1在正常组织中的表达常较微弱，而当形成肿瘤性增生后，常常出现较强的表达，其可能与肿瘤性增殖有关〔3〕。本文旨在检测老年子宫内膜样癌患者癌组织中NRP1、2和ZEB-1的表达及相关性。

1 材料与方法

1.1临床资料 我院行手术治疗的子宫内膜样癌老年患者145例为研究组，均符合世界卫生组织(WHO)中的标准，并再次经病理科主治医师确诊。年龄60～78岁，平均63.7岁。术前均未进行任何放疗和化疗。选取行子宫肌瘤术后证实为正常子宫内膜组织90例为对照组，年龄60～77岁，平均63.1岁。两组一般临床特征无差别(P<0.05)。

1.2NRP1、2和ZEB-1蛋白的表达 选择NRP1和ZEB-1的浓缩液(购自武汉博士德生物工程公司)，在实验前进行预实验，选择最理想的配比浓度进行正式实验。NRP1和ZEB-1的正式实验应用免疫组化SP法，应用DAB染色。均设阳性对照和阴性对照。严格按说明书进行操作，严格质量控制，减少人为误差。

1.3NRP1、2和ZEB-1蛋白表达的判定 NRP1和2均以在细胞质和(或)细胞膜上形成棕黄的颗粒为阳性细胞，ZEB-1以细胞核上形成棕黄色颗粒为阳性细胞，NRP1、2和ZEB-1均计数6个400倍视野的细胞总数，计算阳性率。NRP1、2和ZEB-1均以阳性率≥25%为阳性，以<25%为阴性。

1.4统计学处理 采用SAS6.12软件进行χ2检验和相关性分析。

2 结 果

2.1两组NRP1、2和ZEB-1阳性表达比较 研究组NRP1、2和ZEB-1阳性表达率明显高于对照组(P<0.000 1)。见表1。

2.2研究组NRP1、2和ZEB-1与临床特征的关系 研究组NRP1、2和ZEB-1的表达均与肿瘤的TNM分期、浸润深度、脉管累犯和Ki67指数密切相关(P均<0.05)。见表2。

2.3研究组NRP1、2和ZEB-1相关性分析 研究组NRP1和2(r=0.47,P=0.041 3)、NRP1和ZEB-1(r=0.47,P=0.029 7)、NRP2和ZEB-1(r=0.46,P=0.025 1)均具有正相关性。

表1 两组NRP1、2和ZEB-1阳性率的比较〔n(%)〕

表2 研究组NRP1、2和ZEB-1与临床特征的关系〔n(%)〕

3 讨 论

子宫内膜癌在老年人中多见，常表现为侵袭性生长和转移。在肿瘤形成过程中，间质的血管丰富。研究认为其进展时多种基因和蛋白表达失常〔4,5〕。NRP1、2是一种跨膜糖蛋白，最初是作为轴突导向分子Semaphorin的受体而发现，在神经细胞导向、轴突生长方面发挥重要作用〔6〕。研究显示非神经源性组织中NRP1、2的表达很低，但是当细胞出现不典型增生或癌变时，其表达明显升高，尤其高表达于肿瘤细胞中〔7,8〕。龚宇等〔9〕通过研究NRP1对喉癌HEP2细胞的增殖特点后认为，NRP1可以在肿瘤血管生成中起重要促进作用，其对癌细胞自身增殖和迁移有明显影响，并认为有效拮抗NRP1可能成为肿瘤治疗的新途径。也有学者认为NRP1在作用过程中可以减少细胞凋亡，同时对间质的血管生成有一定价值〔10,11〕。ZEB是一类具有锌指结构的蛋白，包含2个成员，即ZEB-1和2，ZEB-2又称Smad相互作用蛋白，由于都具有相同锌指结构而能与含有CACCT的盒序列结合，可以有效调控靶基因的表达。目前研究显示ZEB-1可以和上皮细胞内的钙结合蛋白结合抑制其转录，有效促进上皮和间质的转化过程〔12,13〕。研究显示ZEB-1的表达具有多样性，但是重点参与肿瘤边缘上皮细胞和间质细胞的转化过程〔14,15〕，因此肿瘤中ZEB-1表达增高，但是肿瘤边缘区的细胞表达尤为强烈，并对部分间质形成一定影响，即间质也可以见到ZEB-1的表达。也有观点认为ZEB-1可能调控肿瘤进展过程中的多项功能，如细胞增殖和转移〔16,17〕。

本实验结果显示NRP1、2和ZEB-1蛋白可以有效促进肿瘤的发生和进展。NRP1、2和ZEB-1均为肿瘤的诱导和促进蛋白起明显的作用。NRP1、2和ZEB-1高表达时肿瘤处于进展状态。NRP1和2对肿瘤的作用是与肿瘤的脉管形成相关的，而NRP1、2可以针对血管内皮细胞进行刺激和产生活化作用，使肿瘤间质的血管生成更快，肿瘤体积增加的明显。本实验提示NRP1、2和ZEB-1三者可以有效地促进肿瘤细胞的增生和繁殖过程，也是肿瘤进展中独特的作用。NRP1、2和ZEB-1的表达与肿瘤的预后相关，即NRP1、2和ZEB-1高表达患者的预后差。NRP1、2对肿瘤的调节作用和ZEB-1对肿瘤的作用通路不是在一个水平上，但是三者均与血管生成相关，因此三者的联系可能与血管内皮生长因子相关，也可能与血管内皮生长因子受体相关，但是其作用机制有待更多实验证实。

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