培哚普利对慢性心力衰竭患者血浆偶联因子6表达变化的影响

章海燕，龙明智

0 引言

线粒体偶联因子6(CF6)是线粒体ATP合酶的亚基，其生物学效应是参与质子传递、能量转导和ATP生成过程。近年发现，CF6密集分布于血管内皮细胞膜表面并分泌进入血液，抑制前列环素(PGI2)及一氧化氮(NO)的合成或释放，以循环激素样方式发挥收缩血管、升高血压等广泛生物学效应[1]。原发性高血压、终末期肾病大血管并发症、冠心病及急性心肌梗死患者血浆CF6含量大幅增加，提示其在以内皮功能紊乱为核心的心血管疾病中可能起重要作用。慢性心力衰竭患者早期即存在严重的内皮细胞损伤及功能紊乱，笔者在前期试验中发现，CF6在慢性心力衰竭患者血浆中水平明显增高[2-4]。本研究旨在观察慢性心衰患者应用指南规定的标准化治疗后，其血浆CF6及PGI2水平的变化情况，以期为ACEI应用于心衰患者提供更多的临床理论依据。

1 资料与方法

1.1 研究对象 选取2010年12月至2013年6月入住本院心内科的慢性心力衰竭患者60例，男32例，女28例，平均年龄(69.77±13.35)岁。NYHA分级Ⅰ级10例，Ⅱ级19例，Ⅲ级20例，Ⅳ级11例。所有患者入院后常规进行查体、心电图、超声心动图、血脂、血糖、肝肾功能等检查。有酮症酸中毒、急性感染、严重肝肾疾病、恶性肿瘤、扩张性心肌病、肥厚性心肌病所致心力衰竭病例被排除在外。另选择同期门诊健康体格检查者20例，继往无任何心血管疾病及其他特殊疾病，男12例，女8例，平均年龄(68.13±9.02)岁。

1.2 标本收集 将健康对照组设为A组，同时将慢性心衰患者分为B、C、D 3组:B组20例(男10例，女10例)，因既往使用ACEI或ARB出现干咳或低血压等不良反应无法继续采用ACEI治疗的患者；C组20例(男12例，女8例)，在传统心衰治疗的基础上加用培哚普利2 mg；D组20例(男9例，女11例)，为传统治疗加用培哚普利4 mg。所有患者分别在入院即刻及第5、10、14天，抽取肘静脉血2 mL加入到含10%乙二胺四乙酸(EDTA)2 mg的抗凝管中，并加入抑肽酶1 000 kU，4 ℃离心(3 000 r/min)15 min。取血浆于-70℃条件下保存备用。

1.3 指标测定 CF6药盒为美国Pheonix pharmaceutical Inc生产提供，PGI药盒由解放军总医院科技开发放免技术所提供。样品操作程序严格按药盒说明进行。CF6多克隆抗体与人CF6交叉反应性为100%。与大鼠、小鼠CF6交叉反应性分别为1%、2%，与人内皮素-1、血管紧张素Ⅱ、C-型利钠利尿肽-22等均无交叉反应。CF6放免的敏感性为ED50∶1～270 pg/mL，样本酸化后按说明书进行测定。

2 结果

2.1 四组患者基本资料比较 四组患者年龄、性别、血压、血糖、三酰甘油(TG)等比较差异无统计学意义(P>0.05)。慢性心衰各组的总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)明显高于A组，而高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)明显低于A组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 四组患者基本资科比较

2.2 慢性心衰组与健康对照组入院即刻血浆CF6及PGI2水平比较 在入院即刻和体检当日抽取慢性心衰患者和健康对照者血液，进行CF6及PGI2水平的测定。与健康对照组相比，慢性心衰组CF6水平明显升高，差异有统计学意义(P<0.01)；PGI2水平低于健康对照组，两组比较差异有统计学意义(P<0.01)。见表2。

2.3 慢性心衰各组入院期间CF6及PGI2动态变化情况 慢性心衰各组经治疗后，血清CF6水平逐渐下降，而PGI2水平随之逐渐上升。B、C、D组CF6水平分别在入院第14、10、5天较入院时出现明显下降，PGI2在同一时间点出现明显上升趋势。且随着培哚普利剂量的增加，其下降或上升趋势更为明显。见表3。

表2 两组入院即刻血浆CF6及前列环素(PGI2)的水平测定结果(pg/mL)

表3 慢性心衰各组入院期间CF6及PGI2动态变化水平(pg/mL)

3 讨论

CF6是线粒体ATP合酶柄区的一个亚单位，是基本的能量转导物质，又是一种血管活性物质[5]。体内各种组织中均有CF6分布，以心肌中含量最高，血管内皮细胞膜也密集分布CF6。对心血管疾病的研究发现，CF6作为迄今唯一的前列环素内源性阻滞剂，在高血压、糖尿病、冠心病等心血管疾病中显著升高，并与血管性假血友病因子等内皮损伤标志物水平明显相关[6-9]。

CF6在体内的释放可受多种因素影响，剪切力或TNF-α等因素刺激可使其释放进入血液循环[10-11]。当心肌缺血、血管内皮损伤导致细胞坏死和凋亡时，CF6也可受刺激释放进入血液循环[12]。进入循环中的CF6是一个强烈的血管收缩肽，能够抑制磷脂酶A2(PLA2)的活性，减少质膜花生四烯酸的释放，从而抑制PGI2的合成。本研究发现，慢性心衰患者在入院早期血液中CF6的水平明显高于正常人群，PGI2水平显著低于健康对照组，差异均有统计学意义。推测其可能的机制为：慢性心力衰竭患者往往存在严重的心肌和内皮细胞受损，同时伴有神经体液因子的激活、血流动力学的改变，上述参与慢性心衰病理生理机制的因素均可刺激心肌细胞、血管内皮细胞释放CF6进入血液循环，因此，CF6水平在慢性心力衰竭患者血液中明显升高，进一步抑制PGI2的合成，导致其在血液中浓度的降低。既往研究也证实这一点，CF6与其心功能分级亦有较强的相关性，心功能越差的患者，血液中CF6含量越高。

本研究同时动态观察了慢性心衰患者入院给予进一步治疗后，血液中CF6及PGI2的变化情况。结果显示，各组患者血液中的CF6水平在治疗后均下降，PGI2相应上升。且随着培哚普利剂量的增大和治疗时间的延长，其CF6下降和PGI2上升的趋势越明显。高剂量培哚普利组、低剂量培哚普利组和常规治疗组的CF6水平分别在第5、10、14天较入院时明显下降，且随着时间的推移，各组CF6水平较前进一步降低，说明培哚普利可以明显降低慢性心衰患者的CF6水平，提高PGI2水平，上述趋势呈剂量依赖性和时间依赖性，推测其可能的原因为：ACEI作为慢性心衰治疗的基石，可以有效改善慢性心衰患者血流动力学，抑制神经内分泌激素，提高和改善内皮细胞功能。而培哚普利作为ACEI，可能通过上述机制，抑制CF6向血液中的释放，并提高PGI2水平，从而治疗心衰，改善心衰患者预后。既往研究证实，CF6可作为内皮细胞受损的标志之一，并且参与了慢性心力衰竭的病理生理过程，本研究进一步提示其可能作为慢性心力衰竭诊断、治疗及预后可能的血清标志物。

参考文献：

[1] Chai SB,Hui YM,Li XM,et al.Plasma level of mitochondrial coupling factor 6 increases in patients with coronary heart disease[J].Circ J,2007,71(5):693-697.

[2] Ashitate T,Osanai T,Tanaka M,et al.Overexpression of coupling factor 6 causes dysfuction under high-salt diet in mice[J].J Hypertens,2010,28(11):2243-3351.

[3] Sagara S,Osanai T,Itoh T,et a1.Overexpression of coupling factor 6 attenuates exercise-induced physiological cardiac hypertrophy by inhibiting PI3K/Akt signaling in mice[J].J Hypertens,2012,30(12):778-786.

[4] 章海燕,龙明智,吴智文.偶联因子6水平在慢性心力衰竭中的变化及与预后的关系[J].医学临床研究,2013,30(2):234-236.

[5] 张晓元,马丹,杨光,等.线粒体偶联因子-6的作用机制及临床效应[J].中华临床医师杂志,2013,7(6):2605-2607.

[6] Osanai T,Magota K,Tanaka M,et al.Intracellular signaling for vasoconstrictor coupling factor 6:novel function of subunit of ATP synthase as receptor[J].Hypertension,2005,46(5):1140-1146.

[7] 马健,庞继恩.血浆线粒体偶联因子6在冠心病患者冠脉循环中浓度的变化[J].心血管康复医学杂志,2011,20(1):693-697.

[8] Li XL,Xing QC,Dong B,et al.Plasma level of mitochondrial coupling factor 6 increases in patients with type 2 diabetes mellitus[J].Int J Cardiol,2007,117(3):411-412.

[9] Osanai T,Tanaka M,Magota K,et al.Coupling factor 6-induced activation of ecto-F1F(o) complex induces insulin resistance,mild glucose intolerance and elevated blood pressure in mice[J].Diabetologia,2012,55(2):520-529.

[10]Osanai T,Tanaka M,Kamada T,et a1.Mitochondrial coupling factor 6 as a potent endogenous vasoconstrictor[J].J Clin Invest,2001,108(7):1023-1030.

[11]Sasakia S,Osanaia T,Tomitaa H,et al.Tumor necrosis factor a as an endogenous stimulator for circulating coupling factor 6[J].Cardiovascular Research,2004,62(3):578-586.

[12]Tomita H，Osanai T.Troglitazone and 15-deoxy-delta(12,14)-prostaglandin-J2 inhibit shear-induced coupling factor 6 releasein endothelial cells[J].Cardiovasc Res，2005,67(1):134-141.