马钱子碱、马钱子粉及九分散抗炎镇痛的药效学比较研究

郑德俊，潘娅，李晶

(1.广州市第一人民医院，广东 广州 510600;2.华南理工大学化学与化工学院，广东 广州 510640)

马钱子(semen strychnine)是马钱科植物马钱(Strychnos nuxvomica L)的成熟种子［1］，具散结消肿、通络止痛之功效［2］，是治疗类风湿性关节炎(RA)的有效药物，其质地坚硬，临床常粉碎后使用，其所含生物碱类成分毒性大，常配伍其他药物作为复方运用。九分散是以马钱子为君药，配伍麻黄、乳香、没药组成的复方［3］，具活血散瘀、消肿止痛之功，用于治疗风湿痹症［4］。类风湿性关节炎以关节肿胀、疼痛难忍为临床表现，临床治疗主要以抗炎、镇痛为主，马钱子、九分散中起镇痛、抗炎作用的有效成分及毒性成分是其生物碱类，包含马钱子碱(Brucine)、士的宁碱［5－6］，其中马钱子碱的毒性比士的宁碱小。现有研究也表明，马钱子碱有良好镇痛、抗炎作用，但马钱子碱与原药、复方疗效对比如何，提纯之后的单体成分药效是增强还是减弱，尚未见相关报道。

本研究通过经典抗炎镇痛实验对单体成分(马钱子碱)、单味药(马钱子粉)及其复方(九分散)进行了药效学实验比较。在同剂量条件下，比较马钱子碱与原药及复方在镇痛、抗炎作用上的优劣，研究单体成分药效作用的特点，兼顾安全性及有效性，为进一步合理运用、开发治疗RA镇痛药提供理论依据。

1 材料

马钱子购于广州清平药材市场，经广州中医药大学鉴定教研室鉴定符合《中国药典》相关规定，马钱子粉由马钱子直接粉碎成粗粉制成;马钱子碱由马钱子经提取浓缩精制而成(自制，含量97.8%);九分散(北京同仁堂股份有限公司同仁堂制药厂);其余试剂均为分析纯。

昆明种小鼠，体质量(20±2)g，由广州中医药大学实验动物中心提供，动物许可证号 SCXK(粤)2008－0020。

2 实验方法

2.1 对热板法［7］致痛小鼠的镇痛作用 取雌性小鼠，放入(55±0.5)℃热板水浴中，以舔后足作为疼痛反应指标，预测小鼠痛阈值以大于5s、小于30s为合格小鼠，将痛阈合格的40只小鼠随机分为四组。在室温条件下，分别口服灌胃生理盐水、马钱子粉、马钱子碱、九分散，生理盐水组灌服等量生理盐水，其他三组剂量以临床剂量为标准，按照人与小鼠剂量换算，确定马钱子碱剂量为0.48mg/kg，以含马钱子碱量计算马钱子粉、九分散剂量，分别为 20.38mg/kg、17.46mg/kg。四组连续给药7天，每天1次，于末次给药0.5h、1h分别测定每只小鼠痛阈值。如60s仍无舔足反应，则以60s计。

2.2 对冰醋酸［8］致痛小鼠扭体反应的镇痛作用 取小鼠40只，雌雄各半，分组及给药方法同2.1项下。连续给药7天，于第7天腹腔注射0.6%醋酸0.2ml/10g，同时用秒表计时，记录各鼠出现第1次扭体反应的时间(即潜伏期)及10min内各鼠的扭体次数。以下列公式计算药物的镇痛百分率(%)。

2.3 对小鼠耳肿胀［9］的抗炎作用 取雄性小鼠40只，分组及给药方法同2.1项下。连续给药7天后，第8天每只小鼠右耳均匀涂二甲苯0.05ml/只，致炎15min，将小鼠脱颈椎处死，用直径8mm的打孔器冲下左右耳廓，分别在电子天平上称重后，按以下公式计算耳肿胀度和抑制率。

2.4 统计学处理

所有数据均输入SPSS 15.0软件进行统计分析，各组计量数据以(s)表示，两组之间的比较采用t检验，P＜0.05表示差异具有统计学意义。

3 结果与讨论

3.1 对热板法致痛小鼠的镇痛作用 马钱子粉、马钱子碱与九分散对热板致痛小鼠的镇痛作用影响结果见表1。

表1 对热板法致痛小鼠的镇痛作用(n=10，s)

表1 对热板法致痛小鼠的镇痛作用(n=10，s)

注:与生理盐水组相比，*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01;组间比较，#P ＜0.05，##P ＜0.01。

组别 给药前的痛阈(s)给药后的痛阈(s)0.5h 1h生理盐水组16.2 ±1.67 18.7 ±1.56 16.2 ±1.95马钱子粉组 15.3 ±1.72 23.31 ±0.93＊＊ 22.5 ±0.42＊＊马钱子碱组 16.7 ±1.34 38.3 ±1.33＊＊## 35.2 ±1.74＊＊##九分散组 16.5 ±2.39 25.4 ±3.40＊＊# 22.9 ±0.26＊＊

与生理盐水组相比，给药前各组小鼠的基础痛阈值差异无统计学意义(P＞0.05)，给药后组间具有显著差异，有统计学意义(P＜0.01)。三组给药组相比，三组制剂均于0.5h后提高热板致痛小鼠的痛阈值，1h后降低，其中0.5、1h后马钱子碱的镇痛作用均优于马钱子粉组及九分散组(P＜0.01)，而0.5h九分散组作用优于马钱子粉组(P＜0.05)，1h后两组镇痛作用相当，无显著性差异(P＞0.05)。结果表明，马钱子碱是镇痛作用的主要成分，能明显提高小鼠痛阈值，具显著镇痛作用，且起效时间快，维持时间久，单药及复方配伍对热板法致痛小鼠的镇痛作用不及单体成分，复方的镇痛作用优于单药。

3.2 对冰醋酸致痛小鼠扭体次数的镇痛作用 对冰醋酸致痛小鼠扭体次数的镇痛作用结果见表2。

表2 对冰醋酸致痛小鼠扭体次数的镇痛作用(n=10，s)

表2 对冰醋酸致痛小鼠扭体次数的镇痛作用(n=10，s)

注:与生理盐水组相比，*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01;组间比较，#P ＜0.05，##P ＜0.01。

组别 扭体次数 镇痛百分率(%)45.8 38.4 ±1.61 －马钱子粉组 21.5±4.32＊＊ 44.0马钱子碱组 15.3 ±1.37＊＊## 60.2九分散组 20.8 ±1.84＊＊生理盐水组

结果表明，与生理盐水组相比，给药组均具显著性差异，能抑制冰醋酸所致的小鼠扭体反应，减少小鼠扭体次数，差异具统计学意义(P＜0.01)。三组给药组相比，马钱子碱组镇痛百分率最高为60.2%，优于九分散组的45.8%及马钱子粉组的44.0%，具显著性差异(P＜0.01)，而九分散组与马钱子粉组作用相当，无显著性差异(P＞0.05)，说明单味马钱子碱具有明显的镇痛作用，单药及复方配伍对冰醋酸致痛小鼠扭体次数的镇痛作用不及单体成分，复方与单药作用相当。

3.3 对小鼠耳肿胀的抗炎作用 对小鼠耳肿胀的抗炎作用结果见表3。

表3 对小鼠耳肿胀的抗炎作用(n=10，s)

表3 对小鼠耳肿胀的抗炎作用(n=10，s)

注:与生理盐水组相比，*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01;组间比较，#P ＜0.05，##P ＜0.01。

组别 耳肿胀度(mg)抑制率(%)55.3 22.6 ±1.22 －马钱子粉组 15.4±2.71＊＊ 36.6马钱子碱组 11.7 ±1.01＊＊## 48.2九分散组 10.1 ±1.15＊＊##生理盐水组

结果表明，与生理盐水组对比，三组均能明显抑制二甲苯引起的小鼠耳肿胀，具有显著性差异，有统计学意义(P＜0.01)。三组相比，九分散的抗炎抑制率作用较优，为55.3%，优于马钱子碱组的48.2%及马钱子粉组的 36.6%，具有显著性差异(P＜0.05，P＜0.01)。而马钱子碱组抗炎作用明显优于马钱子粉组，具有显著性差异(P＜0.01)，说明复方对小鼠耳肿胀的抗炎作用明显优于单体成分及单味药，而马钱子碱抗炎疗效要明显优于马钱子粉。

4 结论

马钱子具有散结消肿止痛功效，是治疗风湿痹症的良药，因其有大毒，临床使用安全范围小。九分散是以马钱子为主药的经典方，起效时间快，疗效确切，因含有马钱子口服给药副作用大，且散剂剂量不易控制易引起中毒。因此无论单药还是复方，尽管疗效显著，但其毒副作用都影响了在临床的使用范围。马钱子碱是马钱子的有效成分，其毒性只有同类生物碱士的宁碱的1/8 ～1/30［10］，安全性高，因此对马钱子碱的镇痛、抗炎作用进行研究更具有开发意义和价值。

本研究通过经典镇痛实验，比较了马钱子碱与原药粉及其复方的镇痛作用。研究表明，马钱子碱镇痛作用显著，起效快，维持时间久，0.5、1h后对热板致痛小鼠及冰醋酸致痛小鼠扭体反应的镇痛作用均优于原药粉及九分散(P＜0.01)，提示镇痛是马钱子碱的主要功效，提纯的单体优于未提纯的原药，也优于复方配伍的九分散，在镇痛作用上，可单独运用马钱子碱进行止痛治疗。

抗炎实验结果表明，马钱子碱对二甲苯引起的小鼠耳肿胀抗炎抑制率为48.2%，低于九分散的55.3%(P＜0.05)，优于原药粉及生理盐水组，具有显著性差异(P＜0.01)，表明中药的复方配伍增强了抗炎作用，方中其余三药通过协同促进作用增强了马钱子的抗炎疗效，体现出中药复方配伍的优势。抗炎结果说明，在抗炎作用上，九分散具有综合优势，要优于单体成分或单药，提纯的单体成分的抗炎作用要显著优于原药粉。

从药效结果考虑，马钱子碱、马钱子粉、九分散均具有抗炎、镇痛作用，其中马钱子碱的镇痛作用显著，而九分散的抗炎作用较强，两者的抗炎、镇痛作用均优于马钱子粉，表现出单一成分和复方的各自优势，可根据临床用药的目的分别选择单体或复方进行对症治疗。从制剂成型角度考虑，复方成分复杂，提取、制备、纯化、成型工艺均较为复杂，散剂剂量不易准确控制，而单体成分制备、工艺、剂型设计简便，剂量容易准确控制。从安全性角度考虑，采用单体成分用药可减少原药粉及复方中其他生物碱类成分的毒性反应，同时也能克服剂量不准造成的毒副作用。综合比较，马钱子碱在镇痛作用上具有显著优势，可提高安全性及有效性，具有较好的研究价值，有望进一步开发成镇痛制剂，发挥其高效的止痛作用。

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