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美国金星大圆叶橡皮树的组培研究

2014-08-08田松英

绿色科技 2014年5期
关键词:外植体琼脂蔗糖

作者简介:田松英(1964—),女,山东诸城人,研究员,主要从事园林绿化工作。中图分类号:S688文献标识码:B文章编号:16749944(2014)05009702

1引言

橡皮树是桑科榕属植物,在北方为盆栽观赏花卉,橡皮树因管理粗放,适应性强,叶片光亮等优点备受人们喜欢。美国金星大圆叶是中科院筛选的优良橡皮树品种,其株型美观,叶椭圆近圆形,叶片椭圆近圆形,长6~8cm,宽5~7cm,深绿色,有光泽。托叶红色。适于中小型盆栽,是优良的室内观叶植物。对其扩繁推广具有较高的经济效益和社会效益。为此笔者选择了组培途径批量生产橡皮树脱毒种苗,满足园艺栽培的大量需求。

2材料与方法

2.1实验材料来源和培养

实验材料来源于北京中科院种苗,引进的种苗经过1个月的正常管理,生长正常后取其生长饱满的嫩茎和芽尖做外植体。

2.2外植体的处理方法

用刀片采取外植体后先用清水加洗洁精清洗干净,再用蒸馏水冲洗5遍,沥干水后用0.1%氯化汞水溶液消毒5min,用蒸馏水冲洗干净放入无菌室的超净工作台上准备接种。

2.3培养基的筛选

分化培养基的筛选:选用基本培养基MS+蔗糖40g+琼脂条8g+不同浓度的6-BA+KT+2-4D。

生根培养基的筛选:选用基本培养基1/2MS+20g蔗糖+8g克琼脂条+不同浓度的IAA和IBA。

2.4试验流程

母液的配制(大量元素、微量元素、铁盐、有机物、激素)→制培养基→外植体选择处理→消毒→接种→培养→数据汇总→分析讨论。

2.5实验内容

根据表1和表2的培养基配比进行最佳培养基筛选,筛选出橡皮树分化和生根的最佳植物激素浓度配比。确定最佳配方后进行增殖继代培养,继代苗达到一定数量后可进行批量生根培养,获得栽培种苗。

表1分化培养基激素浓度(mg/L)配比

配比序号6-BAKT2-4.D10.50.250.121.00.750.131.51.00.140.51.00.151.00.50.161.50.750.1

表2生根培养基激素浓度(mg/L)配比

配比序号IAAIBA10.250.120.50.130.250.240.50.2

3组织培养实验结果与分析

3.1增殖培养阶段

通过多次实验数据记录,通过加权平均分析获得表3,从表中可见配比5应是最佳培养方案,即:MS+蔗糖40g/L+琼脂条8g/L+6-BA1.0mg/L+KT0.5mg/L+2-4D0.1 mg/L 为继代增殖培养基。培养基pH值6.0。

表3不同激素浓度(mg/L)配比分化效果

培养序号分化程度继代周期继代系数1差501.52较好2453一般4044一般3535好2076一般303

3.2诱导生根阶段

在生根培养时采用MS(大量元素1/2)+ 20g蔗糖+8g克琼脂条+不同浓度的IAA和IBA。通过交叉实验(表4)获得最佳生根培养基为1/2MS大量元素+IAA05mg/L+IBA01-02mg/L+蔗糖20g/L+琼脂8g/L,pH值58~60。

3.2炼苗与移栽阶段

生根培养基中的小苗根系发育完好,半数根长达到1.2cm以上时可准备炼苗。将炼苗的试管苗取出,洗净培养基后移入珍珠岩获蛭石中培养。初期的试管苗比较娇嫩,一定要注意温度、光照和湿度的调节,这一时期是成功的关键环节。在珍珠岩(蛭石)培养15~20d后,正式移栽到消毒后的培养基质中进行栽培管理。

表4不同浓度(mg/L2)激素对生根的诱导

IAAIBA生根时间生根率0.250.112700.50.17960.250.210830.50.2795

4结论与讨论

通过对不同激素浓度的培养基的实验对比,筛选出了最佳橡皮树分化的培养基配方是:MS+2.4-D0.1mg/L+6-BA1.0mg/L+KT0.5mg/L+蔗糖40g/L+琼脂条8g/L。pH值为5.8~6.0。培养室温度18~25°的条件下30d可继代一次,平均每瓶可继代5瓶以上。最佳生根的培养基配方是:1/2MS大量元素+IAA0.5mg/L+IBA0.1~0.2mg/L+蔗糖20g/L+琼脂8g/L。pH值5.8~6.0。

铁盐的配制:在配制铁盐时一定注意水浴加热慢慢融化螯合。

最佳培养流程:母液的配制、培养基的制作(包括培养基的pH值调试)、培养基消毒(消毒后稳定12h以后接种最好)接种室用紫外线消毒20min以上,接种前20min打开超净工作台的风机,需接种的外植体在接种后放入缓冲间,然后在培养室内进行分化(生根)培养。

炼苗:组培苗的炼苗方式应该遵循循序渐进式,先打开培养器皿的封口膜,几小时后用镊子小心取出植株用清水清洗干净根部的培养基,再用蛭石或珍珠盐在栽植育苗盘内,喷水后在实验室内稳定3~4d,然后放入温室内炼苗(不能暴晒),两周后脱毒苗生长正常,可以入消毒后的培养土中正常养护。成活率在95%以上。为了节约成本可以对生根培养基进行回收利用。根据实验数据分析,经过脱毒的橡皮树繁殖速度快,根系发达,抗性强,植株整齐,株型美观,长势旺盛,且易形成批量生产,生根苗当年生长量在15cm左右,两年就能成为商品出售。

参考文献:

[1] 陶秀冬,李康,杨秀文,等.橡皮树组织培养及快繁技术研究[J].新疆农业科学,1996(6).

[2] 黄毅.食用菌生产理论与实践[M].

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