德国洋甘菊花序中总皂苷的含量测定

兰 卫， 郭玉婷， 耿 直， 倪 健

(1新疆名医名方与特色方剂学自治区重点实验室， 乌鲁木齐 830011； 2北京中医药大学中药学院， 北京 100029；3新疆医科大学对口协作办公室， 乌鲁木齐 830011)

德国洋甘菊(MatricariachamomiliaL.)又称母菊，为菊科母菊属一年生草本植物。洋甘菊为德国洋甘菊干燥的花或全草，维吾尔语称“巴木乃”，性味一级干、二级热，味微苦、甘香，主产我国新疆山区，是新疆特色地产药材[1]。据国家卫生部药品标准(维吾尔药分册)记载具有补益神经、止痛消肿、发汗通便、利尿通经的功效。用于机体异常腐败体液，头痛久治不愈，大便秘结，汗出不畅，小便不利，月经不通等病症[2]。

目前，国内对洋甘菊化学成分的含量测定研究甚少，本文用乙醇提取，水饱和正丁醇萃取提取纯化洋甘菊中的总皂苷，高氯酸显色，紫外分光光度法测定总皂苷的含量，为洋甘菊的成分含量研究奠定基础。

1 仪器与试药

1.1仪器UV-2550 紫外光谱仪(岛津公司)。

1.2试药洋甘菊药材2012年5月采自新疆昆仑山北麓和田地区策勒县博斯坦乡，样品由策勒县人民政府提供，经新疆医科大学中医学院中药资源教研室李永和主任中药师鉴定为德国洋甘菊(Matricariachamomilia)的头状花序。

人参皂苷Rb1对照品(中国药品生物制品检定所)；其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1洋甘菊供试品溶液的制备取洋甘菊药材粉末约5.0 g，精密称定，置索氏提取器内，加甲醇50 mL，80℃，提取1 h;回收溶剂至干，加蒸馏水10 mL超声分散，用等量水饱和的正丁醇萃取4次；合并萃取液，再用正丁醇饱和水溶液洗涤3次，每次10 mL，水浴蒸干；加入10 mL丙酮分散，过滤，残渣用甲醇溶液定容至 50 mL，制得样品溶液[3]。

2.2标准曲线绘制参考测定药材中人参皂苷Rb1的相关文献，以人参皂苷Rb1对照品溶液的浓度为横坐标,吸光值为纵坐标,绘制人参皂苷Rb1对照品溶液标准曲线，得回归方程为：A=0.065 3C-0.0125，r=0.999 8，表明样品质量浓度在4.0～12.0 μg/mL范围内与吸光度线性关系良好。系列浓度人参皂苷 Rb1对照品溶液的吸光度见表1。

2.3精密度实验对照品溶液0.5 mL，测定6次吸光度，分别为0.316、0.327、0.319、0.307、0.311、0.301，计算RSD 为2.94%。

2.4重复性实验取洋甘菊样品6份，测定供试品溶液的吸光度，分别为0.515、0.507、0.520、0.501、0.497、0.527，RSD为2.86%。

表1 系列浓度人参皂苷 Rb1对照品溶液的吸光度

2.5显色稳定性实验分别在0、0.5、1.0、1.5、2、2.5 h测定对照品溶液吸光度，分别为0.317、0.336、0.325、0.310、0.298、0.035，结果表明在2.5 h内测定结果较稳定，RSD为4.35%。

2.6加样回收率实验精密称取洋甘菊粉末0.2、0.3、0.5 mg ，各2份，分别精密加入人参皂苷Rb1溶液 0.3 mL，按照供试品处理方法依法配置溶液，测定吸光度，计算回收率。经计算，平均回收率为100.4%，RSD为2.09%,结果见表2。

表2 加样回收率实验

2.7样品含量测定测定样品吸光度，参照标准曲线，计算结果，通过用乙醇提取、水饱和正丁醇萃取提取纯化洋甘菊中的总皂苷；高氯酸显色,紫外分光光度法测定总皂苷的含量。测得洋甘菊总皂苷的含量为8.02%,见表3。

表3 洋甘菊总皂苷的含量测定

3 讨论

皂苷(saponins) 是一类比较复杂的化合物, 广泛存在于植物界。皂苷主要有免疫调节作用、护脑、护心及延缓衰老作用、抗肿瘤作用、扩张心脑血管作用、降压的作用和镇静、安神作用[4]。

本实验中采用高氯酸法，最大波长明显，反应相对稳定。本实验经过方法学考察后所采用高氯酸显色测定德国洋甘菊总皂苷含量的方法稳定，重复性好，可作为洋甘菊中总皂苷的含量测定方法，为德国洋甘菊药材的质量控制提供参考依据。

参考文献：

[1] 新疆卫生厅.维吾尔药标准(上册)[S].乌鲁木齐:新疆科技卫生出版社，1993:255.

[2] 中华人民共和国卫生部药典委员会编.中华人民共和国卫生部药品标准维吾尔药分册[S].乌鲁木齐:新疆科技卫生出版社，1999:76.

[3] 张彦丽,韩艳春,阿依吐伦·斯马义.分光光度法测定维吾尔药昆仑雪菊中总皂苷的含量[J].西北药学杂志,2011,26(2):87-88.

[4] 樊永蓉,廖庆文.中草药中皂苷类有效成分药理作用研究现状[J].湖南中医药导报,2003,9(11):52-53.