DJ-1蛋白在卵巢癌患者血清中的表达水平及意义

刘 辉王伟明蔡智慧左 群刘 金刘树芳董玉平鲁晓芳

DJ-1蛋白在卵巢癌患者血清中的表达水平及意义

刘 辉1王伟明2蔡智慧2左 群1刘 金2刘树芳1董玉平1鲁晓芳1

目的 研究DJ-1蛋白在卵巢癌患者血清中的表达水平及其意义。方法选取卵巢上皮性肿瘤患者52例为患者组，其中良性卵巢肿瘤9例，交界性卵巢肿瘤5例，卵巢癌38例；非卵巢肿瘤患者20例为对照组，采用双抗体夹心法测定2组患者血清中DJ-1蛋白的水平。结果对照组血清中DJ-1蛋白水平明显低于各种卵巢肿瘤患者（P＜0.05）。卵巢癌患者血清DJ-1蛋白水平高于交界性卵巢肿瘤和良性卵巢肿瘤患者，交界性卵巢肿瘤高于良性卵巢肿瘤患者（P＜0.05）；低分化和中分化卵巢癌患者血清DJ-1水平均高于高分化卵巢癌患者（P＜0.05）；不同手术病理分期和不同组织学分类的卵巢癌患者血清DJ-1水平差别无统计学意义（P＞0.05）。结论DJ-1参与了卵巢癌的发生和发展，可作为卵巢癌诊断及预后预测的血清学指标。

卵巢肿瘤；癌；DJ-1蛋白

卵巢癌为女性生殖器官三大恶性肿瘤之一，起病隐匿且缺少特异性的早期诊断方法，因此多数患者就诊时已属临床晚期，患者5年生存率仍徘徊在20％～30％，死亡率高居妇科生殖系统肿瘤首位[1]，已成为严重威胁妇女健康与生命的主要肿瘤。近年随着基因组学、蛋白质组学和代谢组学等技术的广泛应用，与卵巢癌相关的新的肿瘤标志物不断被发现，为卵巢癌的诊断、治疗提供了更多帮助。许多新的研究表明DJ-I蛋白在多种肿瘤中异常表达，且与肿瘤的发生、发展、转移及预后密切相关[2-4]，但关于其在卵巢癌中的表达及意义鲜见相关报道。本研究拟探讨血清DJ-1水平作为卵巢癌生物学标志物的可能性，以期为卵巢癌的诊断、监测及预后判断提供依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 2013年1月—9月在河北大学附属医院妇科住院的卵巢上皮性肿瘤患者52例为患者组，诊断标准参照文献[5]；其中良性卵巢肿瘤9例，交界性卵巢肿瘤5例，卵巢癌38例；卵巢癌中浆液性腺癌23例，黏液性腺癌10例，子宫内膜样癌2例，透明细胞癌2例，未分化癌1例。患者年龄35～76岁，平均（50.8±6.2）岁；同期住院的非卵巢肿瘤患者20例为对照组，年龄39～75岁，平均（48.6±5.8）岁，2组年龄差别无统计学意义(t=1.372，P＞0.05)。

1.2 标本采集 所有受试对象抽取空腹肘正中静脉血4 mL，留置于室温下30 min，8℃以4 000 r/min离心15 min分离血清，-70℃冰箱保存集中待检。

1.3 指标检测 采用双抗体夹心法测定血清中DJ-1蛋白的表达，DJ-1单克隆抗体购自Santa Cruz生物科技公司，兔抗羊生物化素二抗购自武汉博士德生物工程公司，采用WD-2102A型全自动酶标仪对DJ-1蛋白水平进行检测。

1.4 统计学方法 用SPSS 16.0软件进行统计学处理。计量资料呈正态分布采用±s表示，比较采用t检验；呈偏态分布采用M（Q）表示，组间比较采用非参数秩和检验；以P＜0.05为差别有统计学意义。

2 结果

对照组血清中DJ-1蛋白水平明显低于各种卵巢肿瘤，卵巢癌的DJ-1蛋白水平高于交界性卵巢肿瘤和良性卵巢肿瘤，交界性卵巢肿瘤高于良性卵巢肿瘤（P＜0.05）；低分化和中分化卵巢癌患者血清DJ-1水平均高于高分化卵巢癌患者（P＜0.05）；不同手术病理分期和组织学分类的卵巢癌患者血清DJ-1蛋白水平差别无统计学意义，见表1。

3 讨论

肿瘤生成和发展是极为复杂的过程，受许多种因素调控，而肿瘤标志物是肿瘤组织本身生成的化学类物质，其存在或量变可反映肿瘤的存在及性质[6]。DJ-1基因是Nagakubo等[7]发现的一种新的丝裂原依赖性癌基因，可与Ras等癌基因起协同作用。DJ-1基因位于1p36，含有8个外显子，长度24 kb，其含有570 bp的开放阅读框架（ORF），编码1个含189个氨基酸的蛋白[8]。人类的DJ-1蛋白又称R，与鼠的DJ-1蛋白的氨基酸序列同源性为90％。目前较公认的研究发现DJ-1基因的突变可导致早发性帕金森病的发生[9]。Vasseur等[10]发现DJ-1基因对蛋白激酶介导细胞形成肿瘤有促进作用。Zong 等[11]在对胆管癌的研究中发现DJ-1蛋白高表达，且可能是胆管癌的独立预后因素。乳腺癌患者中DJ-1蛋白及其抗体较非癌者明显增多，乳腺癌带瘤者外周血中可检测出DJ-1抗体，DJ-1蛋白被认为是一种潜在肿瘤抗原与标志物，乳腺癌中DJ-1蛋白明显增高且可作为预后指标[12]。

本研究发现各种卵巢肿瘤患者血清DJ-1蛋白水平均高于对照组，且卵巢癌患者血清DJ-1蛋白水平高于交界性卵巢肿瘤和良性卵巢肿瘤患者，交界性卵巢肿瘤高于良性卵巢肿瘤患者。Pardo等[13]研究发现眼葡萄膜恶性黑色素瘤能分泌和表达DJ-1蛋白，且可在眼葡萄膜恶性黑色素瘤患者的血清中检测出DJ-1蛋白，提示DJ-1蛋白可能成为一种诊断卵巢癌的潜在血清标志物。本研究还发现不同组织学分类的卵巢癌患者血清DJ-1蛋白水平差别无统计学意义，而低分化和中分化的卵巢癌患者血清DJ-1蛋白水平均高于高分化的卵巢癌患者，提示DJ-1在卵巢癌中不仅参与各种卵巢肿瘤的发生，还可作为疗效监测和预后预测的指标。

Tab.1 The expression of serum DJ-1 protein in different groups of patients表1 各组患者血清DJ-1的水平 [μg/L，M（Q）]

不同手术病理分期的卵巢癌患者血清DJ-1蛋白水平差别无统计学意义，其原因可能为本研究样本量较小，下一步工作将扩大样本量，借助更加精确的分子生物学技术和体内外实验来研究DJ-1基因对卵巢组织细胞的增殖和调控；同时还可以借助对DJ-1基因进行前瞻性研究来探索其对卵巢癌复发和预后的预测价值。

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[11]Zong M,Jia L,Li L.Expression of novel tumor markers of pancreatic adenocarcinomas in intrahepatic cholangiocarcinomas[J].Onco Targets Ther,2013,6:19-23.doi:10.2147/OTT.S39646.

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[13]Pardo M,Garcia A,Thomas B,et al.The characterization of the invasion phenotype of uveal melanoma tumour cells shows the presence of MUC18 and HMG-1 metastasis markers and leads to the identification of DJ-1 as a potential serum biomarker[J].Int J Cancer, 2006,119(5):1014-1022.

（2014-03-14收稿 2014-04-05修回）

（本文编辑 闫娟）

Expression and Clinic Significance of Serum DJ-1 in Ovarian Cancer

LIU Hui1,WANG Weiming2,CAI Zhihui2，ZUO Qun1，LIU Jin2，LIU Shufang1，DONG Yuping1，LU Xiaofang1
1 College of Public Health of Hebei University，Baoding 071000，China;2 Department of Obstetrics and Gynecology, Affiliated Hospital of Hebei University

ObjectiveTo investigate serum DJ-1 expression and its significance in ovarian cancer.MethodsThe expression levels of DJ-1 protein were detected by double antibody sandwich method in 52 cases of ovarian tumors(9 cases of benign ovarian tumors,5 cases of borderline ovarian tumors and 38 cases of ovarian cancer,ovarian tumor group and 20 non-ovarian tumors(control group).ResultsThe expression of DJ-1 protein was lower in the control group than that in ovarian tumor group(P＜0.05).The expression of serum DJ-1 protein was higher in ovarian cancer than that in borderline ovarian tumors and in benign ovarian tumors.The expression of serum DJ-1 protein was higher in borderline ovarian tumors than that in benign ovarian tumors(P＜0.05).The expression of serum DJ-1 protein was higher in poorly differentiated and moderately differentiated ovarian cancer than that in high-grade differentiated ovarian cancer(P＜0.05).No significant difference was found in the expression serum of DJ-1 protein between different pathological and different histological types of ovarian cancer(P＞0.05).ConclusionDJ-1 might be used as a serum marker in the diagnosis of ovarian cancer.It might be involved in the pathogenesis of ovarian cancer，and could predit the development and prognosis of ovarian cancer.

ovarian neoplasms；carcinoma；DJ-1

R737.31

A

10.3969/j.issn.0253-9896.2014.09.019

河北省科技支撑计划项目（132777163）；河北省计生委2013年计划项目（2013-B05）

1河北大学公共卫生学院（邮编071000）；2河北大学附属医院