大观霉素与其他4种抗生素体外抗淋球菌活性比较*

巫晓华

(韶关市粤北第二人民医院药剂科，广东 韶关 512026)

大观霉素是世界卫生组织推荐治疗淋球菌感染的药物，也是目前我国淋病治疗方案选用药物之一，抗生素对淋球菌抗菌活性监测结果对于淋病治疗的药物选择起着重要作用，可了解现行淋病治疗方案在当地的有效性，为淋病防治策略的制定提供科学依据。为了解大观霉素对淋球菌的抗菌活性情况，我们按WH0西太平洋地区淋球菌耐药监测方法测定了大观霉素和其他4种抗生素对在广州地区2011～2013年问收集493株淋球菌的最小抑菌浓度(MIC)，分析其对淋球菌抑菌活性，现报告如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 493株淋球菌由2011～2013年我中心性病门诊患者的泌尿生殖道分泌物中分离得到，男性标本自尿道口内3～4 cm处，女性由宫颈口内1～2 cm处取材，接种于选择性培养基(TM)，所有菌株经革兰染色，氧化酶和过氧化氢酶试验及糖发酵试验确证后液氮冻存备用。大观霉素、头孢曲松、青霉素、四环素和环丙沙星等5种抗生素由中国性病防治技术指导中心提供。GC基础培养基(OXOID公司)加入10%新鲜羊血。5株淋球菌标准菌株(A，B，C，D，E)由中国性病防治技术指导中心赠送，其中A，B，C，D株为产B—内酰胺酶阴性菌株，E株为产B—内酰胺酶阳性菌株。

1.2方 法

1.2.1菌株对抗生素敏感性测定采用WH0西太区淋球菌耐药监测项目推荐的琼脂稀释法测定MIC。先将各种抗生素用适当的缓冲液溶解，配成溶液，再倍比稀释成多个浓度，分别取1 ml药液与9 ml高压灭菌冷至50 ℃左右含10%羊血Gc培养基混合，倾注平皿，各种抗生素在培养基平皿上的最终浓度分别为：青霉素0．03～128 μg/ml，四环素l～64 μg/ml，头孢曲松0．001～1 μg/mJ，大观霉素2～128 μg/ml，环丙沙星0．03～32 μg/ml。

试验菌株和标准菌株先在无选择性培养基(GC)上传代2次，用16～18 h的新鲜培养物制成107～108 efu/ml的菌悬液，用多头点接种器蘸取菌液接种于各抗生素琼脂平皿，经35 ℃培养24 h观察结果，以能抑制淋球菌生长的最小药物浓度为该药的MIC。每批试验均由标准菌株作质控，按WH0西太区淋球菌耐药监测项目推荐的标准判断药物敏感性．

1.2.2产B—内酰胺酶淋球菌测定采用纸片酸度定量法，即将滤纸片吸足青霉素溶液(以溴甲酚紫为指示剂)取待检菌株在滤纸片上涂一直径为5 mm的涂膜，置37 ℃孵育30 min，涂膜颜色由紫变黄为阳性(产生B—内酰胺酶的菌株能分解青霉素的13—内酰胺环形成青霉素噻唑酸，使指示剂发生颜色变化)，涂膜颜色不变者为阴性。以标准菌株E株作为阳性对照，标准菌株A株为阴性对照。

2 结 果

2.1大观霉素与其他4种抗生素对493株淋球菌抑茵活性比较检测493株淋球菌未发现对大观霉素和头孢曲松耐药株，耐药率为0，而头孢曲松中敏的菌株有164株(33．3%)；环丙沙星的耐药株436株，耐药率88．5%；四环素耐药率为85．6%(422/493)；对青霉素耐药率最高达89．0%(439/493)。见表1。

表1 大观霉素与其他4种抗生素对493株淋球菌抑菌活性比较

2.2大观霉素与其他4种抗生素对产B—内酰胺酶淋球菌抑菌活性比较493株淋球菌共检出产B—内酰胺酶淋球菌l06株。大观霉素对产B—内酰胺酶淋球菌MIC50，和MIC50，均为16 mg/L，比耐药标准低8倍。见表2。

表2 大观霉素与其他4种抗生素对106株产B一内酰胺酶淋球菌抑菌活性比较

3 讨 论

大观霉素，旧称奇放线菌素或壮观霉素，是一族由氨基环醇为主体和氨基糖苷类以苷键结合而成的抗生素，属氨基糖苷类抗生素。大观霉素通过作用于30S核糖体亚基上，抑制细菌蛋白质的合成，对革兰阴性和革兰阳性菌均有抗菌作用。大观霉素是WHO推荐治疗淋球菌感染的药物，也是目前我国淋病治疗方案选用药物之一，该方案推荐用大观霉素治疗淋菌性尿道炎、直肠炎2 g/次肌肉注射，宫颈炎妊娠期淋病4 g/次肌肉注射，以及儿童淋病、淋菌性附睾炎、盆腔炎等的治疗选用药物。

本次研究结果显示大观霉素对淋球菌的抑菌活性最高，敏感性为100%，表明本地区2011～2013年间大观霉素对淋球菌具有强大的抑菌活性，虽然部分地区偶有报道检测出耐大观霉素淋球菌，但其耐药率很低，仅有1%左右，说明大观霉素仍然对淋球菌有很好的抗菌活性。目前头孢曲松也作为WHO和我国推荐治疗淋病的首选药物，本次研究虽未检出淋球菌对头孢曲松耐药株，而其低敏的占33．3%，治疗时应注意剂量和疗效。青霉素、环丙沙星和四环素的耐药率甚高，分别为89．0%、88．5%和85．6%，提示这3种药物对淋球菌的抗菌活性很低。

MIC结果分析显示大观霉素的MIC均为16 μg/ml，与耐药标准(≥128 μg/ml)相差8倍，累计抑菌率为100%(MIC100)时，MIC值才32 μg/ml，提示大观霉素仍有很好的抑菌活性。头孢曲松MIC50和MIC90分别为0．03 μg/ml和0．06 μg/ml，累计抑菌率为100%(MIC100)时，其MIC值为0．25 μg/ml，处在中敏范围。青霉素的MIC50及MIC90分别超过耐药标准的8倍和l28倍。四环素和环丙沙星的MIC50及MIC90也超过了耐药标准。提示青霉素、四环素和环丙沙星已不能作为治疗淋病的主要药物。

大观霉素对产B一内酰胺酶淋球菌也具有强大的抗菌活性，产B—内酰胺酶淋球菌对大观霉素的MIC50和MIC90均为16 μg/ml，比耐药标准低8倍，而青霉素和四环素对产B—内酰胺酶淋球菌抗菌活性更差，青霉素的MIC50和MIC90分别达到为64 μg/ml和>128 μg/ml，超出耐药标准64倍和大于128倍；四环素的MIC50和MIC90分别超出耐药标准4倍和64倍。表明大观霉素无论对产B—内酰胺酶阴性淋球菌还是产B—内酰胺酶阳性淋球菌都有很好的抗菌活性。

[1] 苏晓红，戴秀芹，孙厚华，等．l999—2002年南京地区淋球菌分离株抗生素敏感性监测[J]．中华皮肤科杂志，2008，37 (5)：262-264．

[2] 郑和平，刘仲秋，张木有，等．5种抗生素对淋病奈瑟氏菌的抑菌效果研究[J]．中国抗生素杂志，2011，23(5)：377-379．