手足口病患儿血清免疫球蛋白表达水平与疾病进展相关性分析

杨德华，易冬玲，周晓飞，张亚美

手足口病患儿血清免疫球蛋白表达水平与疾病进展相关性分析

杨德华，易冬玲，周晓飞，张亚美

目的探讨轻症和重症手足口病（hand,footandmouth disease,HFMD）患儿血清免疫球蛋白变化与疾病进展的相关性。方法选择本院2013年6月住院的轻症和重症HFMD患儿369例，其中轻症组259例，重症组（含危重型）110例；以同期30名体检正常的健康儿童为对照组。采用免疫比浊法检测各组血清免疫球蛋白（IgA、IgG、IgM）和补体C3、C4表达水平。比较各组及重症组肠道病毒71型（enterovirus 71,EV71）感染和非EV71感染患儿、柯萨奇病毒A16（coxsackievirus A16,Cox-A16）感染和EV71感染患儿的血清免疫球蛋白表达水平。结果与对照组相比，重症组IgG、IgA和IgM水平显著升高，轻症组IgM水平显著升高；与轻症组相比，重症组IgG和IgA水平显著升高；重症组EV71感染患儿IgM水平显著高于非EV71感染患儿，其IgG和IgM水平显著高于CoxA16感染患儿；各组间补体C3、C4水平比较差异均无统计学意义。结论HFMD患儿血清免疫球蛋白表达水平存在变化，随着病情进展，血清免疫球蛋白表达水平变化更加显著。重症患儿血清免疫球蛋白表达水平显著高于轻症患儿，重症患儿中EV71感染者较CoxA16感染者血清免疫球蛋白表达水平变化更加显著。

手足口病；危重症；肠道病毒属；免疫球蛋白类

手足口病（hand,footandmouth disease,HFMD）是由肠道病毒引起的常见传染病，以柯萨奇病毒A16（coxsackievirus A16,CoxA16）和肠道病毒71型（enterovirus71,EV71）引起多见，常发生于儿童。临床表现轻重不一，大部分患者临床表现较轻，以发热及手部、足部、口腔等部位的皮疹和疱疹为主要症状，个别患儿病情较重，可并发心肌炎、肺水肿、无菌性脑膜脑炎等。重症患儿临床表现较隐匿，主要的神经系统表现为精神差、惊跳和激惹，病情进展快，常易导致死亡[1]。其中EV71感染引起重症病例的比例较高[2]。由于EV71对中枢神经系统有极高的感染性，故较其他肠道病毒感染病程进展快，可迅速发生神经源性肺水肿、肺出血及脑炎而死亡[3]。有研究认为HFMD的转归与儿童机体免疫状况可能存在一定关系[4]，但其关系尚不明确，此外，不同病毒感染导致HFMD患者免疫状况差异的研究也较少。本研究对我院2013年6月收治的369例住院HFMD患儿的血清免疫球蛋白及补体水平进行总结，对EV71感染和非EV71感染、CoxA16感染和EV71感染的重症HFMD患儿的血清免疫球蛋白表达水平进行分析，探讨不同病情程度HFMD患儿血清免疫球蛋白表达水平变化与临床表现之间的关系，为进一步研究提供基础资料。

1 对象与方法

1.1 对象369例HFMD患儿均为本院2013年6月住院的确诊病例，其中男241例，女128例，男女比例为1.88∶1；年龄7月龄～9岁，中位年龄2.26岁，3岁以下255例（69.11%）。369例按病情分为2组：轻症组259例（70.19%），治愈好转258例（99.61%），自动出院1例（0.39%）；重症组（含危重型）110例（29.81%），治愈好转108例（98.18%），死亡2例（1.82%）。以同期30名体检正常的健康儿童为对照组，各组间性别和年龄差异无统计学意义。本研究获得我院伦理委员会批准，并取得患儿家属的知情同意。

1.2 诊断标准HFMD诊断符合《手足口病诊疗指南（2010年版）》[5]的标准。患儿分为轻型组及重型组，重型组含危重型病例。重型的诊断标准为：出现神经系统受累表现，例如，精神差、嗜睡、易惊、谵妄；头痛、呕吐；肢体抖动、肌阵挛、眼球震颤、共济失调和眼球运动障碍；无力或急性弛缓性麻痹；惊厥。体征可见脑膜刺激征，腱反射减弱或消失。危重型的诊断标准为出现下列情况之一：①频繁抽搐、昏迷和脑疝；②呼吸困难、发绀、血性泡沫痰、肺部啰音等；③休克等循环功能不全表现。

1.3 纳入及排除标准纳入标准：①符合HFMD的诊断标准；②病程1～5 d；③患儿家属知情同意。排除标准：①检测前应用激素、血制品或有免疫系统等基础疾病；②长期应用激素或化疗药物。

1.4 检测方法入院时采集患儿外周静脉血2ml，采用免疫比浊法测定血清免疫球蛋白IgA、IgG、IgM和补体C3、C4水平，仪器为HITACHI 7600型（日本）全自动生化分析仪，试剂购于芬兰Orion Diagnostica公司。采集患儿咽拭子进行病毒核酸的提取和分类检测。

1.5 统计学处理采用SPSS 18.0软件进行统计分析，计量资料用x±s表示，组间比较采用t检验或单因素方差分析（One-way ANOVA），对方差分析结果差异有统计学意义者采用q检验进行两两比较。P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组间体液免疫水平比较重症组血清IgG、IgA和IgM水平均高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.01）。采用q检验进行两两比较，重症组血清IgG和IgA水平高于轻症组，差异有统计学意义（P＜0.01）；轻症组IgM水平高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.01）。3组间血清补体C3和C4水平差异无统计学意义。见表1。

表1 重症组、轻症组和对照组体液免疫水平比较（x±s，g/L）Table 1 Comparison of humoral immunity levels among the severe group,the m ild group and the control group (x±s,g/L)

2.2 重症组体液免疫水平变化情况对重症组EV71感染患儿与非EV71感染患儿体液免疫水平进行比较，EV71感染患儿血清IgM水平高于非EV71感染患儿，差异有统计学意义。其他指标比较差异无统计学意义（表2）。

表2 重症组EV71感染患儿与非EV71感染患儿体液免疫水平比较（x±s，g/L）Table 2 Com parison of humoral immunity levels between the severe children w ith EV71 and w ithout EV71 infection (x±s,g/L)

对重症组EV71感染患儿与CoxA16感染患儿体液免疫水平进行比较，EV71感染患儿血清IgG和IgM水平均高于CoxA16感染患儿，差异有统计学意义；EV71感染患儿与CoxA16感染患儿血清IgA和补体C3、C4水平差异无统计学意义（表3）。

表3 重症组EV71感染患儿与CoxA16感染患儿体液免疫水平比较（x±s，g/L）Table 3 Com parison of humoral immunity levels between the severe HFMD children w ith EV71 and CoxA16 infection(x±s,g/L)

3 讨论

研究发现，抗体介导的免疫应答在多种病毒的感染致病过程中发挥着重要作用[6]。体液免疫是B细胞产生抗体达到保护目的的免疫机制，是机体特异性免疫的重要组成部分[7]。IgG在再次体液免疫反应时起主要作用，在机体免疫防御中发挥抗感染、中和毒素等作用。IgA在黏膜局部发挥抗菌、抗病毒和局部免疫作用，可阻止病毒在咽喉部和肠道内的黏附和初步增殖。IgM在初次体液免疫反应时起主要作用，在病毒感染早期出现。

本研究中，轻症HFMD患儿血清IgM水平明显高于对照组，因为急性感染期体内的体液免疫被激活，产生抗体中和病毒，防止疾病的发展[8]。随着病情进展，重症HFMD患儿血清IgG和IgA水平逐渐升高，明显高于轻症组，表明在疾病的重症期可能会出现免疫功能的亢进，患儿体液免疫能力增强。因此，随着病情的进展，免疫球蛋白表达进一步异常可能是HFMD患儿出现重症、危重症甚至死亡的提示因素之一。

血清补体C3和C4参与机体的免疫应答，具有自稳功能，可引起机体的免疫损伤。本研究中HFMD患儿血清补体C3和C4水平相对稳定，表明血清补体在疾病发展过程中未起主导作用，可能与机体无法产生足够抗体，无法协同激活补体有关。

研究发现，在细胞免疫发育尚不成熟的HFMD患儿中，如果自身细胞免疫低于体液免疫，EV71感染后有进展为重症HFMD的倾向[9]。在本研究的重症HFMD患儿中，EV71感染者血清IgM表达水平较非EV71感染者明显升高，也较CoxA16感染者血清IgG和IgM表达水平明显升高，差异均有统计学意义，表明EV71感染后免疫系统反应明显增强，尤其较CoxA16感染后体液免疫反应增强，这可能与EV71具有显著嗜神经性相关。其机制可能是中枢神经系统受到侵犯导致神经内分泌肽分泌紊乱[10-11]，部分神经内分泌肽通过神经-内分泌-免疫系统调节通路，对体液免疫产生了调节作用[12]。EV71感染是否与重症HFMD的发病率和病死率升高有关，还须进一步深入研究。

本研究结果显示，随着HFMD病情进展，体液免疫水平变化显著，免疫损伤可能参与了HFMD的发病机制，HFMD患儿体液免疫功能激活与疾病进展程度有一定相关性，尤其是EV71感染的重症患儿表现更为明显。因此，应加强对HFMD患儿的病原学检测及体液免疫水平监测，这对于判断及改善患儿疾病转归和预后有一定的意义。

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[5]中华人民共和国卫生部.手足口病诊疗指南（2010年版）［EB/OL］.［2014-02-10］.http://www.moh.gov.cn/publicfiles/business/htm lfiles/mohyzs/s3586/201004/46884/htm.

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（2014-03-18收稿2014-05-05修回）

（责任编委王永怡本文编辑王姝）

Relationship between serum immunoglobulin levels and disease progression in children w ith hand,foot and mouth disease

YANG De-hua*,YIDong-ling,ZHOU Xiao-fei,ZHANG Ya-mei
Public Health Clinical Center of Chengdu,Chengdu,Sichuan 610066,China
*Corresponding author,E-mail:phccydh@sina.cn

Objective To investigate the relationship between serum immunoglobulin levels and disease progression in mild and severe children with hand,foot and mouth disease(HFMD).M ethods A total of 369 HFMD children,admitted to our hospital during Jun.2013,were divided into amild group(n=259)and a severe group(n=110).Thirty healthy children receiving physical examination were selected as controls.Immune turbidimetry assay was used to detect the levels of serum IgA,IgG,IgM,C3 and C4. Serum immunoglobulin levels were compared among themild group,the severe group and the control group,and between the severe children with enterovirus 71(EV71)and without EV71 infection,and between the severe children with coxsackievirus A16(CoxA16) and EV71 infection.Results As compared with the control group,the levels of IgG,IgA and IgM of the severe group and the level of IgM of the mild group increased significantly.As compared with the mild HFMD group,the levels of IgG and IgA of severe HFMD group increased significantly.The level of IgM of the severe children with EV71 infection was significantly higher than that of the severe children without EV71 infection,and the levels of IgG and IgA of the severe children with EV71 infection were significantly higher than those of the severe children with CoxA16 infection.The levels of C3 and C4 were not significantly different among the groups.Conclusion Serum immunoglobulin levels of HFMD children change,and they change significantly with disease progression.The levels of the severe HFMD children are significantly higher than those of the mild HFMD children.The levels of the severe children with EV71 infection changemore significantly than those of the severe children with CoxA16 infection.

hand,foot and mouth disease;critical illness;enterovirus;immunoglobulins

R512.57

A

1007-8134(2014)03-0167-03

成都市科技局科技惠民计划项目（成科计[2013]44号）

610066，成都市公共卫生临床医疗中心（杨德华、易冬玲、周晓飞、张亚美）

杨德华，E-mail:phccydh@sina.cn