高尔基体蛋白73单独及联合甲胎蛋白检测在肝细胞癌诊断中的价值

张进银，胡万发，王健，魏红山

·临床研究·

高尔基体蛋白73单独及联合甲胎蛋白检测在肝细胞癌诊断中的价值

张进银，胡万发，王健，魏红山

目的探讨血清高尔基体蛋白（Golgiprotein,GP）73单独及联合甲胎蛋白（AFP）检测在肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）诊断中的价值。方法选择HCC、肝炎、非HCC的其他肿瘤患者和健康人群，分别以酶联免疫吸附试验检测GP73水平，电化学发光法检测AFP水平。结果HCC组GP73水平为（231.2±92.3）ng/ml，明显高于肝炎组、其他肿瘤组和健康对照组，差异有统计学意义（P＜0.005）。GP73在81.08 ng/m l处获得最大约登指数，此时诊断HCC的灵敏度和特异度分别为86.2%和87.8%，高于AFP诊断的价值。GP73联合AFP诊断HCC，可使诊断灵敏度进一步提高至92.3%。结论GP73作为一种新型HCC血清标记物在HCC诊断中有较高的灵敏度和特异度，且优于AFP。GP73联合AFP检测可进一步提高HCC诊断的灵敏度。

肝肿瘤；高尔基体蛋白73；酶联免疫吸附测定；α-胎蛋白

肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）是我国常见恶性肿瘤之一，每年死亡约11万例，占全世界HCC死亡人数的45%[1]。由于多数HCC患者有肝炎及肝硬化等基础性疾病，发病初期隐匿，临床确诊时多已发展至中晚期，治疗效果差，5年生存期短。为此，在高危人群中建立监测HCC的血清标志物尤为重要。近年来高尔基体蛋白（Golgiprotein,GP）73被认为在HCC诊断中具有较高的价值[2-3]，为此我们选择HCC患者，以血清GP73和甲胎蛋白（AFP）单独或联合检测，并进行对比观察，现报道如下。

1 对象与方法

1.1 对象HCC 65例（HCC组）为我院2012年12月—2013年5月的住院患者，经查住院病历及病理资料均为HCC术前标本。178名（健康对照组）为2013年4月我院的体检人群，均体格检查正常、肝肾功能正常以及影像学检查无异常。慢性乙型肝炎105例（慢乙肝组），为我院2013年4月的住院患者，其中HBe阳性50例，HBe阴性55例。非HCC的其他肿瘤患者49例（其他肿瘤组），为我院2013年4月的住院患者，其中乳腺癌8例，子宫恶性肿瘤6例，直肠癌5例，胃癌5例，胰腺癌5例，鼻咽癌3例，食管癌7例，肺癌5例，结肠癌5例。收集符合要求的血清标本，置-70℃保存。肝炎及HCC诊断符合《病毒性肝炎防治方案》[4]。

1.2 方法对GP73和AFP联合检测进行灵敏度和特异度分析，只要有1项为阳性即判定为联合检测阳性。应用受试者工作特征曲线（receiver-operating characteristic curve,ROC曲线）分析GP73和AFP的诊断效能。

1.3 生化及GP73检测用酶联免疫吸附试验检测血清GP73水平（试剂盒为北京热景生物技术有限公司生产），严格按试剂盒说明书进行操作。AFP用雅培i2000免疫发光分析仪及配套试剂进行检测。所有检测均严格按标准实验室质控方法进行。

1.4 统计学处理用SPSS 15.0进行统计分析。计量资料呈正态分布，用±s表示。多组间指标差异性比较用单因素方差分析（组间方差齐），组内各组与HCC组的多重比较用Dunnett-t检验。GP73和AFP诊断HCC的诊断试验用ROC分析。P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 一般情况HCC组、慢乙肝组、其他肿瘤组和健康对照组的年龄和性别差异无统计学意义（表1）。

表1 各组一般情况Table 1 Basic characteristics of each group

2.2 各组血清GP73和AFP水平比较各组GP73和AFP水平检测结果见表2。HCC组GP73和AFP水平明显高于慢乙肝组、其他肿瘤组及健康对照组（P＜0.01）。

表2 各组GP73和AFP水平比较（±s，ng/m l）Table 2 Comparison of GP73 and AFP levels among the groups（±s,ng/m l）

表2 各组GP73和AFP水平比较（±s，ng/m l）Table 2 Comparison of GP73 and AFP levels among the groups（±s,ng/m l）

注：#.与HCC组GP73水平与其他3组比较，P＜0.01；$.与HCC组比较，P＜0.01

项目HCC组慢乙肝组其他肿瘤组健康对照组F值P值n 65 105 49 178 GP73 231.2±92.3 75.3±11.2#67.9±21.5#32.7±13.7#103.112 0.001 AFP 152.7±126.4 45.8±1.4$18.3±0.6$2.8±0.7$97.342 0.005

2.3 ROC分析以病理结果为“金标准”，以1-特异度为横坐标，以灵敏度为纵坐标绘制ROC曲线。GP73在81.08 ng/ml处获得最大约登指数，此时GP73诊断HCC的灵敏度和特异度分别为86.2%和87.8%，线下面积为0.922。AFP在20.00 ng/ml处获得最大约登指数，此时诊断HCC的灵敏度和特异度分别为61.5%和89.0%，线下面积为0.801（线下面积比较χ2=4.841，P＜0.05）。见图1、表3。

图1 GP73和AFP水平诊断HCC的ROC曲线Figure 1 ROC curves of GP73 and AFP levels for the diagnosis of HCC

表3 GP73和AFP诊断HCC情况Table 3 Authentic assessment of GP73 and AFP levels in the diagnosis of HCC

2.4 GP73联合AFP诊断HCC HCC组中GP73阳性48例，AFP阳性35例。GP73和AFP联合检测灵敏度提高到92.3%，而特异性保持在较高的水平，为83.1%（表4）。

表4 GP73单独及联合AFP诊断HCC情况Table 4 Com parison of GP73 level alone and in combination w ith AFP level in the diagnosis of HCC

3 讨论

HCC是我国常见的恶性肿瘤，年病死率约20.37/10万，居恶性肿瘤死亡率的第2位，是亟待解决的公共卫生难题[5]。AFP是目前全球应用最为广泛的HCC标志物，具有较高的特异度和灵敏度[6-8]。但近年来发现，部分HCC患者虽有较典型的临床表现和影像学资料，但AFP水平却低于诊断标准，提示以AFP水平辅助诊断HCC仍有一定局限性。GP73是定位于高尔基体的一种Ⅱ型跨膜蛋白，主要由胆管上皮细胞表达[9]，在肝细胞表达很少甚至不表达。

本研究提示HCC组血清GP73水平为（231.2± 92.3）ng/ml，较慢乙肝组、其他肿瘤组和健康对照组均明显升高，进一步分析30例AFP阴性患者，发现有18例（60%）GP73呈阳性，提示GP73用于HCC诊断具有较好的灵敏度和特异度，有助于AFP阴性HCC的诊断，与Bröker等[10]报道类似。

约登指数亦称正确指数，是评价诊断性试验研究真实性的有效方法[11]，其数值越大，检测试验真实性越高。本研究发现GP73用于HCC诊断的约登指数为0.740，其线下面积大于AFP线下面积，差异有统计学意义，提示GP73诊断HCC的效能优于AFP。针对AFP＜20.00 ng/ml的患者，采用GP73诊断，其约登指数亦可达0.505，其线下面积亦大于AFP线下面积，差异有统计学意义，提示GP73用于HCC诊断的约登指数较高，诊断的真实性好[12]。

AFP是目前临床应用最广的辅助诊断HCC的传统方法，本研究对入选标本检测发现其灵敏度和特异度分别为53.8%和84.6%，仍有一定局限性。GP73是近年来用于HCC诊断的新方法，本组同份标本采用GP73检测，结果显示灵敏度和特异度分别为73.8%和88.6%，虽然较AFP检测有一定提高，但仍有部分患者低于检测水平，提示单纯以GP73检测亦有一定局限性。采用GP73联合AFP检测，灵敏度和特异度分别达92.3%和83.1%，均明显优于上述单一检测方法，提示GP73联合AFP检测可进一步提高HCC诊断的灵敏度和特异度，此结果与之前报道类似[13-15]。

综上所述，GP73是诊断HCC的一种新型血清学指标，具有良好的灵敏度和特异度，检测结果真实性高，是辅助诊断HCC的有效方法。GP73联合AFP检测可进一步提高HCC诊断的灵敏度和特异度[16]，有效克服因单一实验室诊断所致的局限性，具有良好的临床应用价值。

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（2014-08-05收稿 2014-09-05修回）

（责任编委 王永怡 本文编辑 陈玉琪）

Diagnostic value of Golgi protein 73 alone and in combination w ith alpha fetoprotein in hepatocellular carcinoma

ZHANG Jin-yin,HUWan-fa,WANG Jian,WEIHong-shan*
Department of Laboratory,Chaoyang Hospital of Huainan,Huainan,Anhui232001,China
*Corresponding author,E-mail:drliver@163.com

Objective To investigate the value of serum Golgiprotein 73(GP73)alone and in combination with alpha fetoprotein(AFP)in detecting hepatocellular carcinoma(HCC).Methods The levels of GP73 and AFP in the peripheral blood of patients with HCC,hepatitis,other tumors without HCC and controls were detected by ELISA and electrochemiluminescence immunoassay (ECLIA),respectively.Results The average level of GP73 in HCC patients was 231.2±92.3 ng/ml,markedly higher than the levels of hepatitis group,non-HCC tumor group and the control group,respectively,and the differences between the levelswere significant (P＜0.005).Themaximal Youden’s index was obtained when GP73 was 81.08 ng/m l,and the corresponding sensitivity and specificity of GP73 level in the diagnosis of HCC were 86.2%and 87.8%,higher than those of AFP level.The combined detection of GP73 and AFP levels in the diagnosis of HCC made the sensitivity further increase to 92.3%.Conclusions GP73,as a novel serum marker,has a higher sensitivity and specificity in the diagnosis of HCC,and is superior to AFP.Combined detection of GP73 and AFP can further improve the sensitivity in the diagnosis of HCC.

liver neoplasms;Golgiapparatus;enzyme-linked immunosorbent assay;alpha-fetoprotein

R735.7；R329.24

A

1007-8134(2014)05-0296-03

232001，淮南朝阳医院检验科（张进银）；232001，淮南东方肿瘤医院检验科（胡万发）；232001淮南，安徽理工大学病源微生物教研组（王健）；100011，首都医科大学淮南附属北京地坛医院传染病研究所（魏红山）

魏红山，E-mail:drliver@163.com