膜突蛋白抗体与GRACE评分在急性冠脉综合征中的初步研究1）

杜 峰，毛 华，张 琦，鲁玉明，熊宗华，李 羚，唐 艳，朱晋坤，刘廷筑，文 美

膜突蛋白（moesin）是细胞骨架与细胞膜间的连接蛋白之一，Moesin不仅在细胞的表面结构形成、细胞形状维持、生长、有丝分裂、膜运输等方面发挥重要作用，而且参与调节细胞的多种生物学功能。我们前期研究发现，moesin抗体在急性冠脉综合征（ACS）、高血压、糖尿病、血脂异常等血管内皮损伤相关疾病组中有较高的阳性检出率，其中在ACS中呈现高表达状态，推测moesin抗体可能是一种新的血管内皮损伤标志物［1］，目前尚未见报道。本研究通过ELISA 法检测ACS 病人外周血中moesin抗体的表达情况，将反映抗体浓度的OD 检测值、全球急性冠脉综合征注册（GRACE）评分与冠状动脉病变程度进行相关性研究，探讨moesin抗体、GRACE评分与ACS的发生、发展及冠状动脉血管病变程度的关系。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择贵阳市第一人民医院2012年5月—2013年3月收治的ACS病人126例，根据冠状动脉造影（CAG）结果分成3组。单支病变组42例，男23例，女19例；双支病变组44例，男23例，女21例；三支及左主干病变组40例，男22例，女18例。同期选择不明原因或不典型的胸痛、胸闷，心电图无明显心肌缺血性改变（包括24h动态心电图），CAG 显示冠脉正常或是狭窄程度＜50%，并排除冠心病的病人41例为对照组。所有入选者均排除慢性心功能不全，风湿免疫性疾病、痛风，合并有恶性肿瘤，严重的感染性疾病，严重的肝、肾疾病，创伤性疾病，血液系统疾病、神经系统疾病及甲状腺疾病等。

1.2 冠状动脉造影结果评价 所有病人均行冠脉造影检查，CAG 采用标准Judldns法：根据冠状动脉主要分支（左主干、前降支、回旋支或右冠状动脉）狭窄＞50%的病变支数分为单支病变组、双支病变组和三支及左主干病变组［2］。

1.3 GRACE 危险评分 GRACE［3－5］危险积分低于85分为低危组，积分85分～133分为中危组，积分高于133分为高危组。

1.4 临床标本检测 全部入选者的血清标本于入院时即刻抽血保留。按照试验最优条件进行抗膜突蛋白抗体（由上海科新生物技术股份有限公司免疫诊断研究中心提供）的间接ELISA法检测。以重组moesin作为抗原检测126 例ACS 病人和41例冠脉造影阴性者外周血中的抗膜突蛋白抗体。测定光吸收值（OD）：主波长为450nm，参考波长为620nm～650nm，优选630nm。测定各孔OD 值。结果判定以阳性判断值OD≥0.25为阳性。

1.5 统计学处理 应用SPSS 19.0软件包进行统计处理，计量资料用均数±标准差表示，计数资料以频数和百分率表示，两因素之间的相关性采用直线相关分析，以双侧P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 临床资料比较（见表1）

表1 ACS组和对照组一般资料比较

2.2 ACS 组 与 对 照 组moesin 抗 体 阳 性 率 比 较 ACS 组 的moesin蛋白抗体的阳性检出率达42%，显著高于对照组的10%（P＜0.01）。详见表2。

表2 ACS组与对照组Moesin蛋白抗体阳性率比较

2.3 moesin抗体阳性率及OD 值与冠状动脉病变程度的关系（见表3） 单支病变组的moesin抗体阳性检出率达33%，双支病变组抗体阳性检出率达41%，三支病变及左主干病变组抗体阳性检出率达52%，均明显高于对照组的10%（P＜0.05或P＜0.01）；其中三支病变及左主干病变组moesin抗体阳性检出率与单支病变组相比差异有统计学意义（P＜0.05），双支病变组与单支病变组相比、三支病变及左主干病变组与双支病变组相比差异无统计学意义。4组间ln（OD）值比较显示，随着病变程度的加重，ln（OD）值逐渐升高。

表3 不同冠脉病变支数与moesin抗体阳性率及OD值

2.4 GRACE危险评分与冠状动脉病变支数的关系（见表4）

表4 GRACE评分与冠状动脉病变支数 例（%）

2.5 moesin抗体与GRACE危险评分的关系 低危组moesin蛋白抗体OD 值为0.132±0.031，中危组为0.247±0.048，高危组为0.352±0.041。高危组与低危组、中危组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。将moesin抗体OD 值与所有ACS病人的GRACE评分作直线相关性分析，结果显示，膜突蛋白抗体OD值与GRACE危险评分呈正相关（r＝0.452，P＜0.05）。

3 讨 论

在ACS的发病机制中，粥样斑块的稳定性及内皮细胞损伤起到了重要作用。moesin作为内皮细胞骨架中的连接细胞，不仅可维持细胞正常形态，调节细胞的迁移和黏附，而且还通过细胞信号转导通路，介导血小板快速聚集等机制对血管内皮损伤起到了重要作用。对moesin单克隆抗体（MmAb）的研究发现，其可使体外培养的肺微血管内皮细胞周边的F－actin断裂、细胞间隙增大、细胞凋亡，moesin抗体也可通过破坏再生障碍性贫血病人的免疫耐受而参与发病［1，6，7］。对120 例血管内皮损伤相关性疾病病人的研究发现，在ACS病人外周血中moesin抗体阳性率高达70%，明显高于单纯的高血压、糖尿病、血脂异常等疾病组（P＜0.05），推测moesin抗体可能是诊断血管内皮损伤又一新的标志物［8］。本研究结果显示，ACS组moesin抗体阳性检出率显著高于对照组（P＜0.01）；随着冠脉病变支数的增加，moesin抗体的阳性率及OD 值随之升高（P＜0.05）。推测其可能原因：①ACS病人冠脉血管内皮细胞损伤，其正常结构被破坏，moesin暴露于血液中，引起moesin磷酸化而被激活，激活的moesin长期持续沉积于病变部位，导致冠状动脉粥样硬化形成及促使ACS的发生；②ACS中多支病变的病人，往往合并有高血压、糖尿病、血脂异常等多种内皮损伤的危险因素，在多重危险因子的协同作用下，引起血管内皮损伤加重并进一步发生斑块的不稳定及斑块破裂。故推测moesin抗体作为一种加重免疫炎性损伤的自身抗体参与了血管内皮损伤，这种血管内皮损伤不仅是斑块破裂的促发因素，亦是斑块破裂后的继发性改变。

GRACE危险评分方法涉及年龄、心率、收缩压水平、血浆肌酐浓度、Killip分级、心脏骤停、心电图ST 段改变及心肌标志物升高共8个方面的内容［3］。不同于TIMI评分简单的危险积分，GRACE评分把危险因素分级量化，能更好地发挥危险因子对事件发生风险的预测价值［9］。有临床研究证实GRACE 评分能够很好地预测病人短期及长期心脏病事件发生的风险，随着GRACE评分增加，越容易发生心血管事件，为临床医师选择合适的治疗策略提供了可靠的依据［4.5］。本研究结果提示，GRACE 评分在低危组中，以单支、双支病变居多，三支病变较少，随着评分分值升高，高危组中以三支及左主干病变居多，冠状动脉病变程度呈加重趋势。从而进一步验证，GRACE 评分对ACS病人的冠状动脉血管病变程度有一定的预测价值。

本研究采用的GRACE评分系统是在GRACE 研究的基础上演变而来，包含了大量的临床循证医学研究，对ACS的早期危险分层、干预治疗及预后判断都有重要的指导意义。但该评分系统仍有一定的不完善性，如缺乏直观的反映ACS病人冠状动脉血管内皮损伤的分子生物学指标。冠状动脉粥样硬化是长时间病理生理改变的过程，内皮功能损伤是病变的起始因素。有研究结果显示［10］，moesin作为血管内皮细胞膜的分子结构，在血管内皮损伤较重的ACS组中moesin抗体阳性检出率高，但与急性损伤的炎性因子表达无相关性，提示moesin抗体在动脉粥样硬化至ACS的发生、发展过程中是一种慢性持续损伤标志物，炎性因子是一种急性损伤标志物，它们均可以作为预测血管内皮损伤及ACS的指标。本研究显示，随着GRACE 危险评分的逐渐升高，moesin抗体的OD 值随之升高，ACS病人的冠脉病变支数及程度逐步加重。在低危组、中危组及高危组间的moesin抗体的OD 值差异有统计学意义（P＜0.05），同时moesin抗体的OD 值与GRACE危险评分呈正相关（r＝0.452，P＜0.05）。moesin作为血管内皮细胞膜的分子结构，在ACS病人中，病变持续时间较长的UA 组抗体阳性检出率及OD 检测值显著高于AMI组［11］，故推测moesin抗体在慢性血管内皮损伤中起到关键作用，可能是一种新的血管内皮持续损伤的标志物。moesin抗体可能是判断及评估ACS风险程度的指标之一，对冠状动脉血管病变程度有一定的预测价值。

［1］ 李梦涛，尹雷，王迁，等.膜突蛋白及其抗体对人肺微血管内皮细胞损伤机制的研究［J］.中华风湿病学杂志，2010，14（4）：232－235.

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