BCRP与P-gp在乳腺癌组织中的表达及其意义

齐彩霞

（山西大同大学医学院，山西大同037009）

乳腺癌由于其发生部位的特殊性，多数患者容易做到早发现、早手术、早治疗，因此在临床常见的九大恶性肿瘤中，乳腺癌的治疗效果以及治愈率一直是比较乐观的。但是一部分乳腺癌患者综合治疗效果欠佳，容易复发转移，主要的原因是癌细胞对于化疗药物产生耐药，减弱其治疗作用的发挥，降低了治愈率。目前关于乳腺癌的多药耐药机制，国内外学者已做了大量的科学研究。研究结果显示多数的肿瘤组织中含有大量的药物转运蛋白，这些蛋白能够阻碍化疗药物进入肿瘤细胞，大幅度削弱化疗疗效，其中关于P-糖蛋白（P-gp）和乳腺癌耐药蛋白（BCRP）的研究较多。P-gp是广泛存在于人体正常组织及癌组织中的一种药物转运蛋白，它在恶性肿瘤的多药耐药机制中研究的较多。乳腺癌耐药蛋白（BCRP）是最近几年来发现的与耐药机制相关的一种新的跨膜转运蛋白,其在肿瘤多药耐药机制中发挥的作用也越来越重要[1]。本研究采用免疫组织化学的方法检测P-gp与BCRP在乳腺癌组织中的表达，并检测其表达在伴有淋巴结转移者与非淋巴结转移者中的不同。

1 材料与方法

1.1 临床标本

收集大同市第五人民医院2009-2012年收治的原发性乳腺癌患者43例，留取新鲜手术切除的肿瘤组织及淋巴结标本，标本经病理诊断均为乳腺癌。病理分期为Ⅰ期6例，ⅡA期10例，ⅡB期9例，ⅢA期14例，ⅢB期4例。淋巴结无转移12例，伴有淋巴结转移者31例。同时收集24例正常乳腺组织的标本。所有标本4%甲醛固定，石蜡包埋，制成厚4μm的组织切片。

1.2 试剂与方法

鼠抗人P-gp单克隆抗体，鼠抗人BCRP-21单克隆抗体，S-P染色及DAB显色试剂盒均购自北京中山公司。标本均采用S-P法进行免疫组化染色，用已知阳性的乳腺癌组织切片作为阳性对照。

1.3 阳性结果判定

根据肿瘤细胞被染色的阳性细胞数量及染色的强弱程度来判定结果。P-gp结果判定：按照阳性细胞数量所占比例为＜15%，染色极浅为阴性（－）；阳性细胞数目所占比例＞15%，染色呈淡黄色以及棕黄色均为阳性表达。BCRP结果判定：按照阳性细胞数量所占比例为＜20%，染色极浅为阴性（－）；阳性细胞数目所占比例＞20%，染色呈淡黄色及棕黄色为阳性表达。

1.4 统计学处理

所有数据均采用SPSS统计软件进行统计学处理：样本阳性率的比较用χ2检验。

2 结果

2.1 BCRP与P-gp在乳腺癌组织及正常乳腺组织中的表达情况

BCRP与P-gp在乳腺癌组织中的表达均明显高于正常乳腺组织，见表1。其中BCRP的正常乳腺组织中的阳性率为58.3%，乳腺癌组织中为90.7%，二者相比χ2=9.761，P=0.001 8；P-gp在正常乳腺组织中的阳性率为41.7%，乳腺癌组织中为83.7%，二者相比χ2=12.659，P=0.000 4。

表1 P-gp与BCRP在乳腺癌组织及正常乳腺组织中的表达

2.2 BCRP与P-gp的阳性表达率与淋巴结转移的关系

在伴有淋巴结转移的乳腺癌组织中BCRP与P-gp的阳性表达率均较不伴有淋巴结转移者为高。其中在不伴有淋巴结转移的乳腺癌组织中BCRP的阳性表达率为75%，在伴有淋巴结转移者中的阳性率为96.8%，二者相比χ2=4.862，P=0.028；在不伴有淋巴结转移的乳腺癌组织中P-gp的阳性表达率为58.3%，在伴有淋巴结转移者中的阳性率为93.5%，二者相比χ2=7.872，P=0.005,见表2。

表2 P-gp与BCRP的表达与淋巴结转移的关系

3 讨论

BCRP在正常人体的脑、肝脏、胎盘、前列腺、小肠等组织中有较高水平的表达[2]。近年来国内外医学专家也进行了大量的实验研究，表明在胃癌、大肠癌、乳腺癌等恶性肿瘤组织中都有BCRP的高度表达。BCRP与P-gp属于同一家族，作用相似，也是依赖ATP的一种跨膜转运蛋白，其作用底物为阿霉素、柔红霉素等乳腺癌患者的常用药物。它可以有效地将上述药物在非常短的时间内从细胞内泵出到细胞外，降低肿瘤细胞内药物分子的聚集数量，使抗肿瘤药物杀伤肿瘤细胞的能力在很大的程度上被减弱，因此出现耐药现象[2]。可以说BCRP在乳腺癌患者的多药耐药机制中发挥着举足轻重的作用。Herman等也曾利用PCR的方法对乳腺癌组织中的BCRP含量进行定量检测，发现BCRP的表达要明显高于其他的耐药相关蛋白[3]。本研究证明BCRP在乳腺癌组织中有过度表达，伴有淋巴结转移的患者BCRP的表达要明显高于没有淋巴结转移的患者，提示BCRP的表达程度的高低与肿瘤细胞的侵袭能力具有一定的相关性。

P-gp是广泛存在于人体组织中的一种跨膜转运蛋白，也是目前研究最全面最深入的耐药相关蛋白。它所作用的底物非常广泛，包括抗生素类药物、心血管类药物、抗精神病药物、以及抗肿瘤药物[4]。P-gp表达水平的高低与相应的恶性肿瘤细胞内药物浓度的高低具有明显的关联，其作用机制可能是在ATP的参与下，把已被扩散入肿瘤细胞内的药物分子主动运输到细胞外，这样就使肿瘤细胞内的药物有效浓度大幅度降低，不能发挥其杀伤肿瘤细胞的作用而发生耐药[5]。本实验研究表明P-gp在乳腺癌组织中有高表达，且在伴有淋巴结转移的患者的癌组织中表达明显高于无淋巴结转移患者，这证实了P-gp不仅参与多药耐药机制，而且与乳腺癌患者的病理分期也有一定的关系。

总之，BCRP与P-gp与在乳腺癌组织中的过度表达，可能与癌细胞对药物的多药耐药机制有关。要想提高乳腺癌患者的治愈率，就要想办法降低它们二者的表达水平，这一课题已经成为医学相关科研工作者的研究热点。

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