《金匮》肾气丸合二甲双胍对实验性2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠血糖血脂影响的研究*

陈伟燕 汪丽佩 郑卫军

（浙江中医药大学，浙江 杭州 310053）

《金匮》肾气丸合二甲双胍对实验性2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠血糖血脂影响的研究*

陈伟燕 汪丽佩△郑卫军

（浙江中医药大学，浙江 杭州 310053）

目的观察《金匮》肾气丸对2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠血糖及血脂的影响。方法选用40只SD大鼠，随机分为两组，正常对照组8只和模型组32只。正常对照组大鼠予以普通基础饲料，模型组大鼠予以高脂高糖饲料，30 d后小剂量链脲佐菌素50 mg/kg腹腔注射诱导2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠，造模成功后13 d，模型组大鼠随机分为糖尿病模型组、肾气丸组、二甲双胍组及肾气丸合二甲双胍组。各治疗组大鼠开始分别连续灌胃，正常对照组和糖尿病模型组等体积蒸馏水灌胃。30 d后禁食12 h，尾静脉采血检测血糖、血脂等生化指标。结果与正常对照组比较，糖尿病模型组空腹血糖、BUN、CHOl、TG和LDL-C水平均明显增高（P＜0.001），HDL-C水平则降低（P＜0.001）；肾气丸组、二甲双胍组及肾气丸合二甲双胍组均能降低模型大鼠空腹血糖、BUN、CHOL、TG和LDL-C水平（P＜0.05或P＜0.01）；二甲双胍组则既可降低TG和LDL-C，又可提高血清HDL-C含量（P＜0.05）。结论《金匮》肾气丸合二甲双胍可显著改善2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠的血糖及血脂水平。

2型糖尿病 金匮肾气丸 二甲双胍

糖尿病失治，可并发严重的心脑血管疾病，根据国际糖尿病联盟统计，目前全球有糖尿病患者2.33亿，而我国估计现有糖尿病患者超过4千万，糖尿病已成为严重威胁人类健康的世界性公共卫生问题［1］。目前疗效比较肯定的口服西药有二甲双胍或者肌肉注射胰岛素，但均可造成肝肾功能的影响及低血糖等副作用［2］。相对于西医西药治疗糖尿病，《金匮》肾气丸降糖效果虽不如西药明显，但其对于改变糖尿病及并发症状具有独特疗效［3］。糖尿病治疗总的趋势是中西医联合干预，依据中西医各自的优势，本项目通过比较评价中西医联合干预（《金匮》肾气丸二甲双胍）、单用西药治疗（二甲双胍）和单用中药治疗（肾气丸）3种不同治疗方法的疗效，探索临床中西医结合临床治疗糖尿病实验基础和理论依据。现报告如下。

1 材料和方法

1.1 材料 《金匮》肾气丸由北京同仁堂生产制备，二甲双胍缓释片由成都恒瑞制药有限公司生产，链脲佐菌素购自Sigma公司；健康雄性SD大鼠40只由浙江中医药大学实验动物中心提供；实验所需仪器设备均由浙江中医药大学基础医学院形态研究所提供。

1.2 模型制备 健康雄性SD大鼠40只，随机分为正常对照组8只和造模组32只。正常对照组大鼠予以普通基础饲料，自由摄食、饮水；造模组予以高脂高糖饲料（高脂配方：基础饲料65％、蔗糖5％、蛋黄粉10％、猪油10％、全脂奶粉10％），自由摄食、饮水；到30 d时大鼠禁食12 h，造模组以链脲佐菌素按50 mg/kg体质量一次性左下腹腔内注射，正常对照组注射等量的柠檬酸盐缓冲液。造模后7 d，取大鼠尾静脉血微量，以强生公司One-Touch Ultra血糖仪检测血糖，尿糖试纸检测定性尿糖。血糖＞16.7 mmol/L且尿糖（+++）以上者确定为糖尿病大鼠模型，造模成功后将模型大鼠随机分成糖尿病模型组、二甲双胍组、肾气丸组、肾气丸合二甲双胍组。

1.3 药物制备及给药 将《金匮》肾气丸和二甲双胍缓释片分别配置成混悬液，在造模成功后13 d，肾气丸组每天灌胃1.25 g/kg体质量肾气丸混悬液；二甲双胍组每日灌胃2.0 g/kg体质量二甲双胍缓释片混悬液；肾气丸合二甲双胍组每日灌胃1.25 g/kg体质量肾气丸和2.0 g/kg体质量二甲双胍；正常对照组和糖尿病模型组用等体积蒸馏水灌胃，治疗各组大鼠分别连续灌胃30 d。

1.4 生化指标检测 各组大鼠灌胃完成后禁食12 h，尾静脉采血检测空腹血糖、血尿素氮（BUN）、总胆固醇（CHOL）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白（LDL-C）和高密度脂蛋白（HDL-C）等指标，

1.5 统计学处理 应用SPSS11.5统计软件。计量资料以（±s）表示，采用t检验方法进行各组的多重比较。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠血糖的比较见表1。治疗30 d后，与糖尿病模型组比较，正常组血糖值明显低于糖尿病模型组和各治疗组（P＜0.01），表明造模成功。各治疗组均可以降低血糖（P＜0.01）。与肾气丸合二甲双胍组相比，肾气丸组无明显差别（P＞0.05），二甲双胍组血糖高于肾气丸合二甲双胍组（P＜ 0.01）。与二甲双胍组相比，肾气丸组、肾气丸合二甲双胍组降低血糖均优于二甲双胍组（P＜0.01）。以上结果示，《金匮》肾气丸及二甲双胍均有显著降血糖效果，且《金匮》肾气丸的效果与《金匮》肾气丸合二甲双胍联用的效果等同，均优于二甲双胍单用的效果。

表1 各组大鼠血糖、BUN的比较（mmol/L，±s）

表1 各组大鼠血糖、BUN的比较（mmol/L，±s）

与糖尿病模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与肾气丸合二甲双胍组为比较，△P＜0.05，△△P＜0.01。下同。

组 别 n 血糖值 BUN糖尿病模型组 8 30.56±2.60△△ 26.36±6.79△△正常组 8 4.88±0.03**△△ 6.41±0.27**△△二甲双胍组 8 26.71±2.43**△△ 26.00±1.56△△肾气丸组 8 15.83±1.29** 16.51±2.19**肾气丸合二甲双胍组 8 16.9±1.85** 17.36±1.57**

2.2 各组2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠BUN的比较见表1。治疗30 d禁食12 h后，与糖尿病模型组比较，正常组血BUN值明显低于糖尿病模型组和各治疗组（P＜0.01）。各治疗组除二甲双胍组外均可以降低血BUN（P＜0.01）。与肾气丸合二甲双胍组相比，肾气丸组无明显差别（P＞0.05），二甲双胍组血BUN高于肾气丸合二甲双胍组（P＜0.01）。与二甲双胍组相比，肾气丸组、肾气丸合二甲双胍组降低血BUN均优于二甲双胍组（P＜0.01）。以上结果示，《金匮》肾气丸与《金匮》肾气丸合二甲双胍联用对于降低2型糖尿病大鼠BUN的效果相同，且不存在统计学差异，而单独使用二甲双胍则无此效果。

2.3 各组对2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠血脂的比较见表2。正常组血CHOL值明显低于糖尿病模型组（P＜0.01），各治疗组除二甲双胍组外均可以降低CHOL（P＜0.01），二甲双胍组与模型组则无明显差别。与糖尿病模型组相比，正常组和各治疗组TG、LDL-C值均明显低于糖尿病模型组（P＜0.001）。与糖尿病模型组相比，正常组HDL-C低于糖尿病模型组，治疗组只有二甲双胍组HDL-C值高于糖尿病模型组（P＜0.01）。

与肾气丸合二甲双胍组比较，二甲双胍组和糖尿病模型组CHOL均高于肾气丸合二甲双胍组（P＜0.01），正常组、肾气丸组与二甲双胍组则无明显差别（P＞0.05）。与肾气丸合二甲双胍组比较，二甲双胍组和糖尿病模型组TG高于肾气丸合二甲双胍组（P＜0.01或P＜0.05）；正常组TG低于肾气丸合二甲双胍组（P＞0.05）；肾气丸组则无明显差别（P＞0.05）。与肾气丸合二甲双胍组比较，二甲双胍组和糖尿病模型组LDL-C值高于肾气丸合二甲双胍组（P＜0.01或P＜0.05）；正常组LDL-C值低于肾气丸合二甲双胍组（P＞0.05）；肾气丸组则无明显差别（P＞0.05）。与肾气丸合二甲双胍组比较，二甲双胍组血HDL-C值高于肾气丸合二甲双胍组（P＜0.01）；正常组血HDL-C值与肾气丸组、肾气丸合二甲双胍组无明显差别（P＞0.05）。结果示肾气丸与肾气丸合二甲双胍联用组均可明显降低2型糖尿病大鼠CHOL、TG和LDL-C等血脂相关有害因子，而二甲双胍组则既可降低TG和LDL-C，又可提高HDL-C指标水平。

表2 各组大鼠血脂比较（mmol/L，±s）

表2 各组大鼠血脂比较（mmol/L，±s）

组 别 n糖尿病模型组 8正常组 8二甲双胍组 8肾气丸组 8肾气丸合二甲双胍组 8 CHOL HDL-C 2.86±0.66△△ 1.24±0.09 1.48±0.27** 0.60±0.05*2.57±0.41△△ 3.02±0.73**△△TG LDL-C 4.46±1.18△△ 0.93±0.06△△0.39±0.10**△△0.21±0.03**△△2.64±0.28**△ 0.69±0.13**△△1.40±0.30**1.71±0.30** 0.41±0.08**1.41±0.19** 1.64±0.25** 0.44±0.14** 0.82±0.36 0.89±0.14

3 讨论

糖尿病属于中医学“消渴病”范畴，其基本病理变化为：初期阴虚为本，燥热为标，中期是气阴两虚为本，湿痰淤血为标，后期阴阳两虚是发展趋势，气血阴阳失衡，变证百出，益气养阴则是本病的最基本治法［4］。西医认为糖尿病是不同病因与发病机制引起体内胰岛素绝对或相对不足，以致糖、蛋白质和脂肪代谢障碍，而以慢性高血糖为主要临床表现的全身性疾病。糖尿病可由不同途径损害肾脏，肾功能检查对了解有无肾脏疾病、疾病的程度、选择治疗、预后及对肾脏的研究均有重要意义，常规用于评价肾功能的实验室检查指标为BUN［5］。研究证实，血糖控制不佳与脂类代谢紊乱密切相关，由于机体代谢出现障碍，细胞不能充分利用葡萄糖，造成体内脂类代谢紊乱，而脂代谢紊乱会带来动脉粥样硬化等相关并发症。临床发现糖尿病患者血浆CHOL、TG和LDL-C等血脂水平均显著高于正常人，而HDL-C是一个具有抗动脉粥样硬化作用的脂蛋白，它能促进胆固醇的排泄，加速极低密度脂蛋白的代谢，防止动脉壁脂质的沉积。因此，HDL-C是防止动脉粥样硬化和冠状动脉粥样硬化心脏病的保护因子［7］。

目前，西医治疗糖尿病疗效比较肯定的口服药物有双胍类如二甲双胍，其既可抑制肝葡萄糖输出，又可改善外周组织对胰岛素的敏感性，增加对葡萄糖的摄取和利用。但双胍类的副作用亦不可忽视［2］，对肝肾功能的影响、低血糖等，并且有些患者血糖控制较好，但症状改善不理想或并发症仍可出现。相对于西医西药治疗糖尿病，《金匮》肾气丸能温肾阳，亦能滋肾阴，取阴中求阳之法。其配伍原则、意义，明·张景岳有精辟的论述，“善补阳者，必于阴中求阳，则阳得阴助而生化无穷，善补阴者，必于阳中求阴，则阴得阳助而泉源不竭”。纵观全方，以小剂温阳药置于十倍之滋阴剂之中，恰似坎卦一阳爻藏于两阴爻之中，取象于火涵水中，藏而不露。其以山药厚其土以藏之，山茱萸肉敛其气以秘之，泽泻、牡丹皮、茯苓引亢火以归之。如此则肾复其封蛰之职，水中之火，不亢不衰，缓缓蒸腾，温养五脏六腑，四肢百骸，成水火既济之象。临床上运用该方治疗糖尿病，能较好地改善患者的临床症状［7］。

本实验证实《金匮》肾气丸除可明显逆转高血糖症状外，还可改善肾功能，防止肾损伤的发生。《金匮》肾气丸既可下调糖尿病鼠血浆CHOL、TG和LDL-C等与动脉粥样硬化正相关的血脂水平，亦可上调抗动脉粥样硬化脂蛋白HDL-C的表达水平。糖尿病治疗总的趋势是中西医联合干预，依据中西医各自的优势，本项目通过观察比较中西医联合干预（肾气丸合二甲双胍组）、单用西药治疗（二甲双胍组）和单用中药治疗（肾气丸组）3种不同治疗方法的疗效，证实了《金匮》肾气丸及《金匮》肾气丸合二甲双胍对于2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠血糖、BUN及血脂相关有害因子均有较好疗效，且效果均优于二甲双胍组，为临床中西医结合治疗糖尿病奠定实验基础和理论依据。

［1］中国糖尿病防治指南编写组.中国糖尿病防治指南（2007年）［M］.北京：北京大学医学出版社，2007：6.

［2］张建钢，韩建勤，赵通洲.罗格列酮与二甲双胍治疗糖尿病疗效比较［J］.宁夏医学杂志，2006，28（8）：609-610.

［3］陈伟燕，郑小伟.金匮肾气丸对糖尿病大鼠胃功能影响的实验研究［J］.浙江中医杂志，43（10）：577-578.

［4］潘力弢，高林林，曹田梅.2型糖尿病合并冠心病中医证型与血浆HCY、hs-CRP相关性的研究［J］.中国中医急症，2013，22（7）：1144-1146.

［5］沈岚，俞立强，熊佩华.六味地黄汤合黄连解毒汤对糖尿病肾病大鼠的肾脏保护作用及相关机制［J］.南京中医药大学学报，2013，29（6）：553-557.

［6］苏晓燕，黄昭穗，郭琦.TG/HDL-C比值预测2型糖尿病下肢动脉硬化的价值［J］.临床军医杂志，2011，39（5）：881-883.

［7］田锦鹰，魏东，马祖，等.糖尿病发病与中医体质的相关性研究［J］.中国中医急症，2013，22（10）：1693-1694.

Study on the Effect of Combined Use of Jinkuishenqi Pill and Metformin on Blood Glucose and Lipid of Insulin Resistance of TypeⅡDiabetes Mellitus Rats

CHEN Weiyan，WANG Lipei，ZHENG Weijun.Zhejiang University of TCM，Zhejiang，Hangzhou 310053，China

Objective：To discuss the effect of combined use of Jinkuishenqi pill and metformin on blood glucose and lipid of insulin resistance of typeⅡdiabetes mellitus rats.Methods：40 SD rats were randomly divided into two groups：8 in normal control group and 32 in model group.The rats of normal control group were fed with ordinary diet，while the rats of model group were fed with high fat and sugar diet.After 30 days，the model group rats were treated with 50mg/kg streptozotocin by intraperitoneal injection to induce typeⅡ diabetic rats with insulin resistance.After 13 days，the model rats were randomly divided into four groups including diabetic model group，shenqi pill group，metformin group，and shenqi pill combined with metformin group.Each group was fasted 12 hours after 30 days'gavage and their blood glucose and lipids were detected.Results：Compared with normal control group，fasting glucose，BUN，CHOl，TG and LDL-C of model group rats significantly increased（P＜0.01）while the HDL-C reduced（P＜0.01）.Rats in shenqi pill group，metformin group，and shenqi pill combined with metformin group had lower fasting blood glucose，BUN，CHOl，TG and LDL-C levels（P＜0.05），but higher serum HDL-C levels（P＜0.05）.Shenqi pill combined with metformin group had the most obvious change of above indicators.Conclusion：The effect of combined use of Jinkuishenqi pill and metformin can significantly improve blood glucose and lipid of insulin resistance of typeⅡdiabetes mellitus rats.

TypeⅡdiabetes；Jinkuishenqi pill；Metformin

R259.872

A

1004-745X（2014）08-1422-03

10.3969/j.issn.1004-745X.2014.08.011

2014-04-27）

浙江省科技厅项目（2011C33003）；浙江中医药大学校级科研基金项目（2013ZZ01）

△通信作者