九味羌活制剂中挥发性成分的气相色谱－质谱分析

张幸福，张 炜

（青海省食品药品检验所，青海 西宁 810016）

九味羌活系列制剂系从古方九味羌活汤演变而来，由羌活、防风、苍术、细辛、川芎、白芷、黄芩、甘草、地黄等药材组方，有大蜜丸、小蜜丸、浓缩丸、水丸和九味羌活颗粒等剂型，主要功效为疏风解表、散寒除湿，用于外感风寒所致的感冒。方中羌活、川芎、防风、苍术、细辛含有多种挥发性成分，目前对九味羌活制剂的研究大多限于其中单味药的成分和药理活性研究，而对制剂整方的物质基础和配伍效应的研究则少有报道。为探讨挥发性成分在复方中的作用，寻找九味羌活制剂治疗风寒感冒疾病的物质基础，笔者采用气相色谱－质谱联用(GC－MS)法对九味羌活制剂中挥发性成分进行研究，并模拟相同条件对各单味药材进行了与九味羌活制剂的分析比较，为九味羌活制剂的物质基础与配伍机理研究奠定了基础。

1 仪器与试药

赛默飞世尔Triplus GC－DSQⅡ型气相色谱－质谱检测联用仪；赛默飞世尔 TR －1MS－30M 型毛细管柱（0．25 mm ×0．25 μm）；OHAUS AR5120型电子天平（奥豪斯公司）；HANGPING FA1004型电子天平（上海天平仪器厂）。无水硫酸钠（分析纯，天津市化学试剂厂）；正己烷（分析纯）；羌活、川芎、防风、苍术、细辛购自药材市场，经鉴定均为2010年版《中国药典（一部）》收载品种；九味羌活系列制剂，其中大蜜丸4批，小蜜丸2批，浓缩丸4批，水丸16批，颗粒剂10批。

2 方法与结果

2．1 GC －MS 件[1－2]

程序升温：初始温度为50℃，保持10 min，以 5℃ ／min的速率升温至80℃，以8℃ ／min的速率升温至110℃并保持10 min，以 1．8℃ ／min的速率升温至 160℃，以 2．5℃ ／min的速率升温至200℃，以5℃ ／min的速率升温至240℃并保持7 min。载气为高纯氦气。进样口温度：250℃；传输线温度：250℃；节气模式；真空补偿；恒流模式，流量 1．0 mL ／min；分流进样，Split Flow为 150 mL ／min，Split Ratio为 150，Splitless Time为 1．00 min。 离子源温度：250℃；溶剂延迟时间：3．5 min；电离方式：电子轰击（EI）源；电离能量：70 eV；扫描模式：全扫描 ／Full scan，扫描范围m ／z 20～650。

2．2 溶液提取和制备

取羌活、川芎、防风、苍术、细辛药材，粉碎成细粉。分别称取约50 g（准确至 0．01 g），置 1 000 mL 圆底烧瓶中，加纯化水 500 mL，加沸石少许，上端加挥发油测定器，自上端加满纯化水，用移液器加正己烷4 mL至挥发油测定器上端，与水液分层。调节温度，保持收集馏出液6 h，冷却，收集正己烷液，用无水硫酸钠过滤，即得5种对照药材挥发油。取九味羌活制剂样品，称取约50 g（蜜丸剪碎、浓缩丸和水丸砸碎成颗粒，准确至0．01 g），置1 000 mL圆底烧瓶中，按对照药材挥发油提取方法处理，即得样品挥发油。取提取样品的同批次正己烷，作为空白试剂。

图1 九味羌活制剂中挥发油的总离子流图

2．3 测定法

分别精密吸取空白试剂、5种对照药材挥发油、样品挥发油各1 μL，注入 GC－MC检测仪，测定。代表性总离子流图见图1。可见，空白试剂无明显干扰。

2．4 成分鉴定

将GC－MS所得质谱信息用质谱数据库NIST08．L计算机检索，同时采用人工图谱解析，按各色谱峰的质谱裂解图与库和文献核对，鉴定出了其中35个化合物，并确定了归属，设定了各药材的主要特征峰或峰簇。结果见表1。

表1 16个生产企业5种剂型的九味羌活制剂挥发性成分GC－MS特征峰分析

3 讨论

对制剂中鉴定出的35个成分进行峰检出数判断，蜜丸中检出28～33个，浓缩丸中检出26～31个，水丸中检出0～29个，颗粒剂中检出0～26个。

根据设定的各味药材的特征峰进行了专属性检测，发现九味羌活制剂中存在特征峰缺失的情况。分析5味药材在蜜丸、颗粒剂、浓缩丸和水丸中特征峰的检出比例，羌活分别为100%，10%，50%，29%；川芎分别为100%，40%，100%，94%；苍术分别为100%，50%，100%，94%；细辛分别为100%，30%，25%，47%；防风分别为 100%，0，100%，88%。

颗粒剂中羌活、川芎、防风、苍术、细辛5味药材的入药工艺为，将提取挥发油喷洒在药物表面，然后封袋包装，在储藏和运输过程中可能会造成挥发油的损失，影响药物质量。应考虑从药材质量源头开始，规范使用和生产过程及提高制剂的工艺技术。对于颗粒剂，已有进行工艺改进的报道，如采用环糊精包合技术等[3－7]。

参考文献：

[1]黄华花，吴春敏．维C银翘片挥发性成分GC－MS特征图谱研究[J]．药物分析杂志，2011，31(4)：768 －771．

[2]吴 芳，郭增军，罗定强，等．五苓系列制剂中挥发油的GC指纹图谱研究[J]．药物分析杂志，2013，33(8)：1 355 －1 358．

[3]曲永胜．不同工艺对九味羌活颗粒中欧前胡素及异欧前胡素含量的影响[J]．齐鲁药事，2009，28(11)：692 －694．

[5]刘 新．环糊精衍生物及改性淀粉包合九味羌活挥发油的研究[J]．中国医院药学杂志，2008，28(10):799 －802．

[6]高 燕，赵渤年，丁晓彦．多指标正交实验法研制九味羌活挥发油－ 环糊精包合物[J]．时珍国医国药，2007，18(8)：1 901 －1 902．