HPLC测定苍术中的3种成分研究
2020-12-12张如春
张如春
(湖南省常德市桃源县中医医院,山西 赣州 415700)
前言
在祖国医学大力发展的今天,对中药的认识逐渐提升。其中,苍术作为上品中药,其在机体消化系统、心血管系统、泌尿生殖系统、神经系统以及其他系统中均发挥着一定的作用。如在消化系统中,苍术起到促进胃、肠运动的作用,并具有抗溃疡的作用。在心血管系统中,苍术则可起到保护心肌缺血再灌注损伤及其引发的心律失常等功效。在泌尿生殖系统中,苍术中的有效成分β-桉叶醇,其可通过抑制Na+等的活性,并抑制其在肾脏的重吸收而产生利尿作用。在神经系统中,苍术中的苍术醇的镇痛效果与阿司匹林功效相当。除此之外,苍术还具有保肝、抑菌、抗肿瘤等功效。可见,对苍术这一中医临床中的常用药,其具有较大的需求,因而对其中的3种主要成分进行测定时,选取适宜的方法是非常关键且重要的。因此,本文主要从高效液相色谱法(HPLC)测定苍术中3种成分的研究进展角度展开了研究,旨在为苍术的合理开发和利用奠定基础。
1 苍术及HPLC法相关理论概述
1.1 苍术
苍术,菊科植物,又有南苍术、北苍术等之称。其中,分布在湖北、江苏等地的称为南苍术,而分布在内蒙古、吉林及河北等地的则成为北苍术。可见,苍术具有较广的分布范围。然而,受到产地和地理环境的影响,苍术中各个成分的含量也是有明显的差异的。这也在一定程度上影响了药材质量的控制。在鉴别苍术这一中药材质量时,仅通过外观形态的观察是难以鉴别优劣的,这也是导致目前市场上苍术药材混杂现象普遍的重要原因之一。
苍术以挥发油为主要化学成分,其约为5%至9%。而挥发油的主要成分则包括苍术素和苍术醇等。β-桉叶醇是苍术醇中的混合物之一,其含量占比约为6%。在2015版的《中国药典》中,其将苍术素规定为苍术的指标性成分,并对其含量给予了明确的规定,即不低于0.30%。由此可见,在对苍术这一中药材进行质量控制的过程中,应对其3种主要成分的含量进行测定。
1.2HPLC法
高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC),又有高速液相色谱、高压液相色谱、近代柱色谱等支撑,其属于色谱法。HPLC法下的流动相是液体,系统采用的是高压输液系统,主要是通过将不同比例的混合溶剂,或不同极的单一溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相色谱柱中,并经成分分离后,在检测器下进行检测的一种测定方法。HPLC具有以下几个特点:第一,具有较好的分离效能。第二,具有较高的灵敏度。第三,具有较高的压力。第四,具有较快的载液流速和分析速度。最后,具有较广的应用范围。除此之外,HPLC还具有易回收、不会破坏样本以及色谱柱反复使用等优势。总之,正是由于HPLC具有上述特点和优势,因而目前在医学、化学、工业及农业等诸多领域获得广泛的应用。
2 HPLC法测定苍术中3种成分的研究进展
2.1 苍术素
苍术素的分子式、分子量及相对密度分别为C13H10O、182.2179、1.056g/cm3。苍术素是不溶于水、微溶于甲醇,溶于乙酸乙酯和丙酮的无色结晶药品。在室温环境下,苍术素具有较好的稳定性。在对苍术素进行检测时,其检测的方法主要包括HPLC、TLC法等。瞿领航在研究中也采用HPLC法对南北苍术的含量进行检测,并认为这一方法可以有效区别南北苍术[1-3]。高丽在研究中采用HPLC法对不同产地的苍术中的苍术素含量进行了分析,并指出在不同的产地下,苍术中苍术素的含量是有较大的差异的,其中苍术素含量最高的产地是河南的方城县与嵩县。另外,也有相关文献显示,经人工栽培的苍术,采用HPLC对其含量进行测定,显示苍术素的含量为0.84%,其与我国的相关法定标准相符[4]。另外,也有学者采用HPLC法对北苍术中的成分展开定性与定量分析,并确定了13种成分,即苍术素、苍术醇等,但对于β-桉叶醇却并未确认。然而,也有学者运用同样的鉴定法,对南苍术中的主要成分进行了测定,并认为在HPLC法下,其确认了苍术素、β-桉叶醇,但对于苍术醇却并尚未确认。也就是说,在对苍术中主要成分进行分类区别的过程中,可采用HPLC法的测定结果作为依据和参考。然而,目前关于HPLC法测定的成分种类研究结果还尚不一致。由此可见,关于HPLC测定苍术中各个成分的研究还有待深化。
2.2 苍术醇
苍术醇的分子量分别为222.37。有学者探究了不同居群苍术中苍术醇的含量,其采用的方法是HPLC法,并认为这一方法是一种简便且准确的药材质量评价法,并认为大别山区苍术中的苍术醇含量是较高的,其含量约为江苏茅苍术的4倍至6倍。相比于传统分离方法,采用HPLC法,苍术醇的含量会有由于温度过高而受到破坏,是一种理想的测定方法。另外,也有学者采用HPLC法分析了南北苍术、关苍术中苍术素和苍术醇中的含量展开了测定,其在进行含量测定的过程中,采用的色谱柱为Promosil C18,流动相为乙腈一磷酸水,270nm为检测波长,25℃为柱温,指出苍术醇的质量浓度范围为0.001-0.218mg/mL,而苍术醇发热质量浓度范围为0.0004-0.0119mg/mL。与此同时,南北苍术和关苍术三个不同的产地,其在特征图谱方面的差异较大,因而在苍术醇和苍术素的含量方面也存在较大的差异。而采用HPLC法,其可以快速将三种不同的苍术进行鉴别。在进行测定的过程中,将含量测定与特征图谱进行结合,其不仅具有操作简便的优势,而且在测定结果方面也更为准确。不仅如此,还具有较好的重复性。也就是说,在对苍术这一中药材的质量进行评价时,HPLC法是一种可靠且全面的分析方法,值得在苍术中成分测定中广泛应用。
2.3β-桉叶醇
β-桉叶醇作为一种化学物质,其分子式、分子量分别为C15H260、222.37。β-桉叶醇的外观是白色结晶,其在2℃至8℃温度下避光保存。据相关文献显示,采用HPLC对南苍术和北苍术的β-桉叶醇和苍术素的含量进行测定时,南苍术中的β-桉叶醇和苍术素含量范围分别为17.14-32.15/2.23-3.76,而北苍术对应的含量范围则分别为0.30-7.03、0.43-7.06[5-8]。对于不同产地苍术中的β-桉叶醇含量,β-桉叶醇与苍术素含量最高的产地是湖北,苍术素与苍术内酯Ⅱ含量最高的产地在江苏茅山。在HPLC下,基于色差原理分析不同生长年限北苍术药材粉末,显示苍术素与β-桉叶醇的分离度在1.50以上,对应的线性范围分别为3.30-33.00、4.40-44.00,其精密度和重复性均在2%以内,各成分含量随着生长年限的增加而升高。也就是说,苍术的生长年限越长,其β-桉叶醇和苍术素的含量就越高。对于北苍术而言,其β-桉叶醇和苍术素与黄蓝色度和红绿色度之间的关系真是正相关关系,而与色差值、颜色亮度之间的关系是负相关关系。
3 结语
伴随祖国医学的快速发展,当下研究的重点逐渐转向中药的开发与利用。然而,在中药开发与利用中,对其中药成分进行测定不仅是重中之重,而且是确保药材质量的关键。通过上述分析显示,采用HPLC测定法对苍术中3种成分进行测定时,对苍术素、苍术醇以及β-桉叶醇3种成分同时测定的研究极少。现阶段,既有研究成果主要是对苍术中单一成分的测定,如苍术素的测定。对于多种苍术成分共同测定的研究,其则主要是对β-桉叶醇和苍术素的测定,对于苍术素与苍术醇、β-桉叶醇与苍术醇,以及上述3种成分含量的测定研究是比较少的。除此之外,既有相关文献在应用HPLC进行苍术成分测定时,其主要选取的是不同产地苍术成分含量的测定,且主要以南苍术和北苍术作为主要研究领域。因此,未来采用HPLC测定法对苍术中3种成分进行测定时,应注重同时对上述3种成分进行测定。