芍药苷微囊的测定及制备研究

王 昭

(武汉市中医医院，湖北 武汉 430040)



芍药苷微囊的测定及制备研究

王 昭

(武汉市中医医院，湖北 武汉 430040)

目的：研究芍药苷微囊的测定及制备工艺。方法：通过采用HPLC 色谱峰面积归一化法进行计算而得的自制芍药苷，并进行微囊制备。结果：在24.5～490.0μg/mL范围内芍药苷溶液具有较好的线性关系；45～55℃的成囊温度、3%～5%的胶液浓度所具有的影响不明显； pH对成囊的影响不大，过高和过低的影响都不明显，其值在3.5～4.5时最优。结论：微囊对于药效的吸收和释放有着重要作用，在pH为 6.8的溶液中，微囊释药的速度比较缓慢，在人体环境下微囊的药效是缓释的。

芍药苷微囊；测定；药物制备

芍药苷是中药芍药中一种非常普通的药效成分，是一种典型的单萜类糖苷化合物。有关芍药苷的药理作用，国内外的医学者对其进行了大量的研究。在自由基损伤抵抗、细胞钙超载抑制等方面，芍药苷的作用非常显著。体内试验结果显示，芍药苷还可以有效改善血液循环、降低血液黏度等，其具有非常小的毒副作用。在近几年的医学发展中，微囊化是一种新型制剂，能够大大提高难溶药物的利用度，通过微囊化后，药物能够进行高度分散，增大表面积，提高药物的吸收效率，从而提高生物利用度。

1 仪器与材料

BP2110电子天平：德国赛多利斯公司；S-3000N 扫描电子显微镜：日本日立公司；SPD-20A 液相色谱仪：日本岛津；DF-101S 恒温加热磁力搅拌器：巩义市英屿予华仪器厂；D-800LS 药物智能溶出仪：天津大学无线电厂。

主要材料：通过采用HPLC 色谱峰面积归一化法进行计算而得的自制芍药苷；中国食品药品检定研究院所生产的芍药苷对照品，明胶、阿拉伯胶、乙腈、戊二醛、重蒸水和其他分析类纯剂。

2 方法与结果

2.1 HPLC 法测定芍药苷

2.1.1 色谱条件 Agilent C18色谱柱(250mm×4.6 mm，5μm)；流动相：乙腈-水(16∶84)；体积容量：1.0 mL/min；柱温：30℃。按照芍药苷峰计算理论塔板数，其值为大于2 000。

2.1.2 对照品溶液配制 精密称取芍药苷对照品9.8mg，置于10mL量杯中，加入甲醇溶液进行稀释，摇匀，即得。

2.1.3 供试品溶液配制 将一定量的芍药苷微囊进行研磨，然后在其中加入25mL甲醇，超声20min后，将其放置冷却，再次进行质量称取。通过甲醇补齐缺失的质量。对液体进行过滤，弃初滤液，将续滤液再次用0.45μm 微孔滤膜进行过滤，由此得空白溶液。

2.1.4 专属性考察 对于空白溶液、供试品溶液和对照品溶液进行色谱条件的实验，研究结果显示所得出的方法较好，并且每个溶液和成分之间不存在干扰。具体见图1。

图1 空白样品(A)、芍药苷对照品(B)和样品溶液(C)的HPLC色谱

2.1.5 线性关系考察 精密量取对照品，将其配置成24.5、49.0、147.0、245.0、343.0、490.0μg/mL的溶液，按照色谱条件对峰面积进行测定。实验结果显示，芍药苷溶液在24.5～490.0μg/mL范围内具有较好的线性关系。

2.2 载药量和包封率测定

精密称取经过真空干燥过的芍药苷，按“2.1.3”方法配置溶液，测定峰面积，测算出具体的质量和浓度，然后根据相关公式对微囊所含的芍药苷进行测量，计算出具体的载药量和包封率。相关计算公式如下：

载药量=微囊中芍药苷的质量 / 微囊的质量

包封率=微囊中芍药苷的质量 / 投入芍药苷的总量

2.3 设计微囊制备工艺

2.3.1 制备微囊 称取2g明胶和阿拉伯胶，加入50mL水进行相溶，配置成浓度为4%的溶液。精密称取芍药苷0.4g，称取的药粉是经过100目筛的，然后在其中加入阿拉伯胶进行研磨，制成混悬液。在其中加入相同量的阿拉伯胶和明胶，将其制成50mL，混匀，50℃的水温中搅拌，转速为300r/min。在溶液中加入5%醋酸溶液，将pH值调节至4左右，再次搅拌约15min。加入 2倍量蒸馏水(50℃温水)，待体系自然冷却至30℃以下后，冰浴迅速冷却至10℃以下，用 4%戊二醛溶液约25mL固化15min，静置使其充分沉降，倾去上清液，微囊滤过，然后用水进行清洗，直到无甲醛味为止，进行真空干燥，随即得到芍药苷微囊。在进行试验的整个过程中，避光操作。

2.3.2 预试验及其结果 对于芍药苷微囊制备工艺的相关优化，在参考相关文献的基础之上，本文对其进行了因素分析。共选取5个因素，分别是囊材和囊心的比例、pH 值、胶液浓度、成囊温度、搅拌速率，通过对这些因素进行考察，结果显示，成囊温度为45～55℃、胶液浓度为3%～5%所具有的影响是不明显的，因此将胶液的浓度设定为4%，成囊温度设定为50℃。当囊材和囊心的比例小于1时，芍药苷无法实现全部包裹，包封率在20%以下；当囊材和囊心的比例大于5时，芍药苷能够实现较好的高峰，但是承载药量却在10%以下，因此确定囊材和囊心的比例为1～5之间，这样所得的载药量和包封率都相对较好。搅拌速率太高，囊泡容易破，包封率明显不高；搅拌速率太低则囊泡容易出现粘连，出现较为严重的结块现象，因此确定搅拌速率为100～400 r/min。pH 值对成囊的影响不大，过高和过低的影响都不明显，其值在3.5～4.5之间最优。

2.4 实验检验

通过对5个影响因素进行相应的调节，得出囊材和囊心的比例为4.3，pH 值为 4.0，搅拌速率为305 r/min。遵循优化后的工艺条件对芍药苷微囊进行测定，所得到的结果如表1所示，此时载药量和包封率都较高，质量也较稳定。

表1 最佳工艺验证

3 讨论

中药芍药的主要成分为芍药苷，芍药所具有的生物化学反应已经过多项研究得到证实。然而对于发生的生物学效应，具体是芍药苷还是其产生的代谢物在发生作用，还不太明确。通过对芍药苷的代谢进行研究，发现口服芍药苷不能很好地被利用，即使是静脉注射液其利用率也不高，代谢很快。

在神经保护方面，芍药苷已经广泛应用于细胞方面，能够抑制细胞凋亡，阻断钠通道，从而实现减轻钙损伤，抑制钠内流，保护细胞的作用。在进行检测时，由于所采取的手段具有一定的局限性，因此在神经细胞保护方面的具体作用还不是很明确。在今后的研究中，应注重对芍药苷和其代谢物药理作用的研究，明确药物的具体药理作用，从而有效指导药物的配药规律。

对于微囊的制备，主要选取具有相反电荷的两种材料进行交联、凝聚，因此对于微囊的性质，温度、pH值所具有的影响是不可忽视的。在本实验中，明胶和阿拉伯胶作为囊材凝聚成囊，两者的质量分数宜在3%～5%，且比例为 1∶1，研究中首先考察了囊材的质量浓度，质量浓度过高，微囊不规则、易粘连；质量浓度过低则包封率低，影响产能。在对微囊进行制备时，经过搅拌之后，用2倍的水对溶液进行稀释和搅拌，可以有效防止粘连。研究结果显示，在pH为 6.8的溶液中，微囊释药的速度比较缓慢，由此可以得出在人体环境下微囊的药效是缓释的。

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(责任编辑：魏 晓)

2014-05-13

王昭(1987-)，湖北省武汉市中医医院中药师，研究方向为中药学。

R283.6

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1673-2197(2014)17-0041-02