卡介苗素对慢性阻塞性肺疾病患者细胞免疫功能的影响

姜国伟 臧敏 何绿苑 蔡岗丽 陈秀华 朱颖 吴冠仪

卡介苗素对慢性阻塞性肺疾病患者细胞免疫功能的影响

姜国伟 臧敏 何绿苑 蔡岗丽 陈秀华 朱颖 吴冠仪

目的 探讨卡介苗素治疗对慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者细胞免疫功能的调节作用及其意义。 方法 将60例COPD患者随机分为实验组和对照组各30例，对照组接受常规治疗，实验组在常规治疗基础上予卡介苗素0．35mg肌肉注射，隔日1次，共3个月。两组患者均随访6个月，观察COPD复发率及控制感染时间，检测两组患者0、3、6个月时血清中IFN-γ及IL-4水平及0、6个月时肺功能。 结果 0个月时两组患者细胞因子水平及肺功能的差异均无统计学意义（均P＞0．05）。3个月时实验组IFN-γ水平高于对照组，IL-4水平低于对照组，差异均无统计学意义（均P＞0．05），IFN-γ/IL-4比值高于对照组，差异有统计学意义（P＜0．05）。6个月时实验组IFN-γ水平高于对照组，差异无统计学意义（P＞0．05），IL-4水平低于对照组，差异有统计学意义（P＜0．05），IFN-γ/IL-4比值及FEV1占预计值高于对照组，差异均有统计学意义（P＜0．05或0．01）。随访6个月内实验组COPD复发率及控制感染时间均少于对照组，差异均有统计学意义（均P=0．020）。 结论 卡介苗素能增强COPD患者细胞免疫功能，改善其预后。

卡介苗素 慢性阻塞性肺疾病 干扰素-γ 白细胞介素4

慢性阻塞性肺疾病（COPD）是一种通过炎症细胞产生多种细胞因子介导并互相作用的慢性炎症性疾病，其发生、发展及转归与患者机体的免疫功能有密切关系。因此，我们对COPD患者采用卡介苗素治疗，以期提高患者的免疫功能，改善疗效，现将结果报道如下。

1 对象和方法

1.1 对象 选择本科2012-09-01—2013-06-05收治的60例COPD患者作为研究对象，诊断均符合2013年中华医学会呼吸分会制定的COPD诊断标准[1]，除外支气管哮喘、支气管扩张、肺间质纤维化等慢性呼吸系统疾病或并发严重肝肾功能损害、肿瘤及脑血管、肾、血液系统疾病患者。采用随机数字表法分为卡介苗素治疗组（实验组）和常规治疗组（对照组）各30例。实验组男22例，女8例；年龄51～93（72.10±9.84）岁；病程3～26（13.13±6.52）年；COPD严重程度分级轻度9例、中度16例、重度5例。对照组男21例，女9例；年龄48～87（75.07±10.97）岁；病程5～25（13.37±6.58）年；COPD严重程度分级轻度10例、中度17例、重度3例。两组患者性别、年龄、病程及病情严重程度的差异均无统计学意义（均P＞0.05）。

1.2 治疗方法 对照组给予必要的解痉、祛痰等常规治疗。实验组在常规治疗基础上予以卡介苗素针（浙江万马药业生产，批号201209020，0.35mg/支）0.35mg肌肉注射，隔日1次，共3个月。

1.3 研究方法 观察6个月，以注射卡介苗素前（0个月）、停用卡介苗素时（3个月）及观察期结束时（6个月），清晨抽取患者空腹外周静脉血3～5ml，注入试管中以无菌肝素抗凝，离心10～20min，吸取血清保存于-70℃低温以备统一检测。使用杭州艾迪康公司提供的上海西唐生物科技有限公司生产的试剂盒，通过DENLEY DRAGON Wellscan MK 3多功能酶标仪（芬兰Thermo公司），采用双抗体夹心免疫吸附法（ABC-ELISA），检测血清IFN-γ、IL-4的水平。具体操作参照试剂盒说明书进行。

1.4 观察指标 （1）6个月内COPD复发率、COPD复发后控制感染时间。（2）3个时点血清中IFN-γ、IL-4的水平。（3）研究开始和结束时的肺功能。

1.5 统计学处理 采用SPSSl7.0统计软件。计量资料用表示，两组样本均数比较采用t检验。计数资料组间比较采用χ2检验。

2 结果

2.1 两组患者COPD复发率和COPD复发后控制感染时间的比较 6个月内COPD复发率实验组为23.3%（7/30），对照组为53.3%（16/30），两组的差异有统计学意义（χ2=5.71，P＜0.05）；控制感染时间实验组为（12.0± 5.3）d，对照组为（20.0±6.7）d，两组的差异也有统计学意义（t=2.58，P＜0.05）。

2.2 两组患者各时点血清中细胞因子水平及比值的比较 见表1。

由表1可见，0个月时两组患者细胞因子水平的差异均无统计学意义（均P＞0.05）。3个月时实验组IFN-γ水平高于对照组，IL-4水平低于对照组，但差异均无统计学意义（均P＞0.05）；IFN-γ/IL-4比值高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。6个月时实验组IFN-γ水平高于对照组，但差异无统计学意义（P＞0.05），IL-4水平低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；IFN-γ/IL-4比值高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.01）。

表1 两组患者各时点血清中细胞因子水平及比值的比较

2.3 两组患者治疗前后肺功能的比较 见表2。

由表2可见，治疗前两组患者肺功能的差异均无统计学意义（均P＞0.05）；治疗后FEV1占预计值高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。

3 讨论

COPD是通过炎症细胞产生多种细胞因子介导并互相作用的一种慢性炎症，其发生、发展及转归与患者机体的免疫功能有密切关系。由于缺血、缺氧等多种因素，COPD患者细胞免疫功能低于正常人，且随着病情发展，细胞免疫功能呈下降的趋势[2]。免疫增强剂能提高人体的免疫力，新近研究表明免疫增强剂能降低COPD急性发作频率和减少糖皮质激素的使用[3]，并减少COPD急性加重的发生[4]。在70年代死卡介菌接种就被临床用于预防呼吸道疾病，但因为其严重的不良反应而在80年代停用[5]。卡介菌素是一种免疫增强剂，是卡介菌体的热酚乙醇提取物，其主要作用是通过增强细胞免疫、调节体液免疫、激活巨噬细胞、改变T细胞亚群来提高人体的免疫力；另一方面通过稳定肥大细胞，减少其它颗粒细胞释放的活性物质来达到抗过敏作用。

表2 两组患者治疗前后肺功能的比较

COPD的病理基础是气道炎症，肺泡巨噬细胞和中性粒细胞介导的组织损伤在COPD的发病中起主要作用，多种细胞炎性因子参与了这一过程[6]。Th细胞是一群细胞表面表达有CD4+分子的T淋巴细胞，目前认为，Th细胞是免疫应答的中心细胞，它不但是机体免疫应答的启动细胞，而且其活性对整个免疫应答具有调节作用，如果没有Th的活化，机体就会处于无能状态[7]。Th细胞活化后可释放细胞因子，调节T细胞、B细胞、单核细胞和其他免疫细胞活性。根据产生细胞因子的不同，Th细胞分为Th0、Th1、Th23种亚型，对免疫应答发挥调节作用的主要是Th1和Th2细胞。IFN-γ主要由活化的Th1细胞产生，其主要功能有抗病毒、抗致病细菌、抗细胞增殖及激活巨噬细胞并促进其功能，促进Th1细胞的增生活化，并抑制Th2细胞增殖[8]。IL-4主要由活化的Th2细胞产生，并通过自分泌方式促进Th2细胞分化，抑制Th1细胞增生及活化。Th2细胞分化增生后，产生IL-4的能力增强，IL-4激活肥大细胞使之分泌IL-4，使IL-4进一步增多[9]。过度的Th2细胞应答，可能削弱机体对感染因子的保护性防御机制，并常可能在遗传易感的患者引发过敏性特应症[10]。IFN-γ/IL-4的比值代表Th1/Th2细胞优势状态。本研究发现，3个月时实验组IFN-γ水平高于对照组，IL-4水平低于对照组，但差异均无统计学意义，实验组IFN-γγ/IL-4比值高于对照组，差异有统计学意义；6个月时实验组IFN-γ水平高于对照组，但差异无统计学意义，IL-4水平低于对照组，IFN-γ/IL-4比值及FEV1占预计值高于对照组，差异均有统计学意义；随访6个月内实验组COPD复发率及控制感染时间均少于对照组，差异有统计学意义；说明卡介苗素能增强COPD患者细胞免疫功能，停用卡介苗素后能减缓IFN-γ/IL-4比值下降，通过调节机体的免疫应答，提高机体免疫力，减缓肺功能下降，减少COPD急性加重的发生，对COPD患者有预防保护作用，达到改善COPD疗效的目的。

卡介苗素可抑制Th2型细胞因子分泌，促进Th1型细胞因子的分泌，从而调节Th1/Th2平衡[11]。本研究结果中两组患者3个月及6个月时IFN-γ水平的差异无统计学意义，是否与样本数少有关还有待进一步证实。Th1细胞功能增强是否是卡介苗素对COPD的免疫调节作用的位点，尚需进一步扩大样本，延长疗程来进行更加深入的研究。

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Effect of BCG-PSN on cellular immune function in patients with chronic obstructive pulmonary disease

Objective To investigate the immunoregulatory activity of BCG-PSN in patients with chronic obstructive pulmonary disease(COPD)．Methods Sixty COPD patients were randomly assigned to BCG group and control group with 30 in each．Conventional treatment was given to both groups,patients in BCG group also received BCG-PSN 0．35mg i．m,q．o．d for 3 months．Both groups were followed up for 6 months．The recurrence rate of COPD,the time of infection control were observed in two groups．Serum levels of IFN-γ,IL-4 at 0,3,6 months after treatment were measured and lung function at 0,6 months after treatment was examined．Results There were no differences in cytokines levels and lung function before treatment between two groups（P＞0．05）．There was also no difference in serum IFN-γ and IL-4 levels 3 months after treatment（P＞0．05）,but the IFN-γ/IL-4 ratio in BCG group was higher than that in control group（P＜0．05）．On 6 months after treatment,serum IL-4 levels were lower in BCG group（P＜0．05）,there was no difference in IFN-γ levels between two groups（P＞0．05）;however, the IFN-γ/IL-4 ratio in BCG group was higher than that in control group（P＜0．05）,and percentage of FEV1/predicted was higher（P＜0．01）．The recurrence rate of COPD was lower and the time of infection control was shorter in BCG group than those in control group（P＜0．05）．Conclusion BCG-PSN can enhance cellular immune function and improve the prognosis of patients with COPD．

BCG-PSN Chronic obstructive pulmonary disease Interferon-γ Interleukin 4

2014-02-20）

（本文编辑：沈叔洪）

浙江省中医药科学研究基金资助项目（2012ZB165）作者单位：321017 金华市中医医院呼吸内科

姜国伟，E-mail：13757983263@163.com