Ki-67 和PCNA 表达与乳腺癌及乳腺癌化疗敏感性的关系

魏 昕 杨举伦 (遵义医药高等专科学校病理教研室，遵义 563000)

乳腺癌是最常见的困扰中老年女性的恶性肿瘤之一，临床流行病学研究表明乳腺癌已成为欧美国家发病率最高的恶性肿瘤。乳腺癌的治疗与预防在于乳腺癌的早期诊断，但是由于其发病隐匿，早期临床症状不明显，易被患者和医生忽视，确诊时多已为晚期甚至伴有远处淋巴转移灶的形成，造成乳腺癌最后保乳手术率低，低治愈率的结局［1］。由于乳腺癌部位的特殊性，临床上乳腺癌治疗的主要方式仍为化疗或是手术结合化疗的综合治疗。乳腺癌化疗方式目前以蒽环类化疗药物为主，但是不同患者对化疗敏感性不同［2］，为此，本研究利用我院病例资源，探讨分析乳腺癌组织中核增殖相关抗原(Ki-67)及增殖细胞核抗原(PCNA)表达变化与乳腺癌的关系及其对乳腺癌化疗敏感性的关系，为临床乳腺癌的有效化疗提供理论依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 研究对象为我院近年来就诊的已经病理确诊的84 例原发性乳腺癌患者。年龄为21～63 岁，平均年龄为(41.2 ±1.4)岁;所有患者均经过临床确诊，且无其他心血管或神经系统等严重疾患，病理诊断及临床分期参考2010 年中国版乳腺癌NCCN 指南［3］。

1.2 化疗方案 所有患者均为首次确诊，且无恶性肿瘤病史。所选患者化疗CEF 方案共48 例:第1、8 天环磷酰胺800 mg/m2，第2、3 天吡柔比星60 mg/m2，第4～7 天5-FU 500 mg/m2;CTF 方案36例:第2、3 天吡柔比星30 mg/m2，或第2 天吡柔比星60 mg/m2，其余时间与CEF 方案一致，所有药物均为静脉注射，化疗时间为2～7 个周期。

1.3 Ki-67 及PCNA 检测方法［4］采用免疫组化SP 法，实验步骤按说明书进行。经抗原修复，DAB显色。Ki-67、PCNA 阳性均为核呈棕黄色，计算阳性细胞占肿瘤细胞的百分比，阳性细胞数＞25%判为阳性。表达阳性以下简称阳性，记为“+”，表达阴性以下简称阴性，记为“-”。整个切片未见阳性细胞为“-”，阳性细胞数1%～25%定为“+”，25%～50%为“++”，50%～75%为“+++”，阳性细胞在75%以上定位“++++”。

1.4 化疗敏感性评定方法 化疗敏感性评定以化疗效果决定，而化疗效果以原发灶的变化来衡量，化疗前后分别测量肿瘤最大直径。根据“实体瘤治疗疗效评价标准(RECIST)”［5］进行评估，乳腺癌原发灶临床缓解分为:临床检测手段未发现肿瘤为完全缓解(CR);肿瘤最长径之和缩小30%或以上为部分缓解(PR);肿瘤非PR 且非进展(PD)则定义为稳定(SD)，PD 为肿瘤最长径之和增加20%，病灶增加前非CR、非PR 且非SD。本研究中以CR+PR 计算肿瘤化疗总有效率。

1.5 统计学处理 研究中所有数据均使用SPSS17.0 统计学软件，计数资料采用χ2检验，计量资料用±s 表示，进行t 检验，P＜0.05 表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 研究患者一般情况 84 例研究患者中浸润性导管癌58 例，浸润性小叶癌8 例，单纯癌8 例，其他类型10 例;TNM 分期:Ⅰ期33 例，Ⅱ期38 例，Ⅲ、Ⅳ期13 例。所有患者均于手术治疗后行化疗治疗。

2.2 Ki-67 及PCNA 表达及其与乳腺癌关系 通过免疫组化方法检测到的Ki-67 及PCNA 表达阳性并结合患者一般临床资料，Ki-67 阳性率与患者淋巴结转移及肿瘤分型分期呈正相关，差异有统计学意义，P＜0.05。而PCNA 阳性率与肿瘤淋巴结转移成正相关，P＜0.05，与肿瘤临床分型分期无关，P ＞0.05。具体数值情况见表1。

表1 Ki-67 及PCNA 表达及其与乳腺癌的关系Tab.1 Ki-67 and PCNA and its relationship with breast cancer

表2 Ki-67 及PCNA 单项及联合检测与乳腺癌化疗敏感性关系Tab.2 Ki-67 and PCNA individual and joint detection and breast cancer chemosensitivity relations

2.3 Ki-67 及PCNA 单项及联合检测与乳腺癌化疗敏感性关系 单项检测时，Ki-67+总有效率为80.8%明显高于Ki-67-的56.2%，P＜0.05。PCNA-有效率为72.7%明显高于PCNA+45.2%，P＜0.05。提示，Ki-67+、PCNA-可为乳腺癌化疗敏感性的判定指标。联合检测时，与Ki-67+/PCNA-组相比，Ki-67+/PCNA+有效率无差异，P ＞0.05，而Ki-67-/PCNA+和Ki-67-/PCNA-有效率明显降低，P＜0.05。见表2。

3 讨论

乳腺癌是女性恶性疾病中最常见的一种恶性肿瘤，其好发年龄为40～60 岁，但随着流行病学的深入，目前其发病年龄越来越年轻化，发病率也呈增长趋势，其原因仍未完全明了，可能与某些基因的缺失或过表达有关［6］。乳腺癌由于其发病部位的特殊性，成为很多女性十分担忧的原因。一旦发病，最根本的解决办法是进行乳房切除及淋巴结清扫这种根治性手术，很多患者为追求形体的完美，选择化疗治疗。因此，寻找一种有效的化疗方式，找到能预测化疗敏感性的指标成为临床工作的重难点。

Ki-67 是在细胞增殖过程中表达产生的一种核抗原，其产生量与细胞有丝分裂有关。Ki-67 在多种肿瘤细胞中高表达，与多种肿瘤的发展、转移、预后有关［7］。本研究中共调查84 例乳腺癌患者，其Ki-67 检出阳性例数为52 例，阳性率为61.9%，并且提示其表达与肿瘤淋巴结转移及肿瘤临床分期有密切正相关关系，在肿瘤分期越严重的患者中，其阳性表达可能性越大。在肿瘤化疗敏感性的实验中，Ki-67+患者的化疗总有效率为80.8%，明显高于Ki-67-患者的56.2%，差异有统计学意义，P＜0.05。

增殖细胞核抗原PCNA 是细胞核内的一种酸性蛋白，是真核细胞DNA 合成所必需的辅酶。PCNA代表着细胞的增殖活性，活性越高其细胞间的张力越大，黏附性越低，越容易脱离原发灶，使肿瘤细胞向远处转移及扩散，被很多专家及学者认为是细胞增殖状态的理想预后标志物［8］。本研究中显示，乳腺癌中PCNA 表达阳性例数为62 例，阳性率为73.8%，研究中还提示PCNA 的表达与肿瘤临床分型分期无明显相关性，P ＞0.05。但是PCNA 表达与淋巴转移情况呈正相关，即淋巴结转移阳性的患者中PCNA 表达多为阳性，这与PCNA 促进肿瘤细胞向远处转移及扩散的特性是一致的。近年来国内外一些研究表明，PCNA 与多种肿瘤的预后关系密切，有关PCNA 与乳腺癌预后的关系研究也有大量的报道［9］，认为PCNA 的表达与乳腺癌淋巴结转移、复发及预后有关。

在乳腺癌化疗敏感性研究中，Ki-67+总有效率为80.8% 明显高于Ki-67-的56.2%，P＜0.05。PCNA-有效率为72.7%明显高于PCNA+45.2%，P＜0.05。提示，Ki-67+、PCNA-可为乳腺癌化疗敏感性的判定指标。联合检测时，与Ki-67+/PCNA-组相比，Ki-67+/PCNA+有效率无差异，P ＞0.05，而Ki-67-/PCNA+和Ki-67-/PCNA-有效率明显降低，P＜0.05。这表明Ki-67+及PCNA-可以作为预测乳腺癌患者化疗敏感性的指标。

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