抗突变型瓜氨酸波形蛋白抗体在类风湿关节炎中的诊断价值

张文兰 王永福 白 力 尹芳蕊 赵剑波 (包头医学院风湿免疫研究所，包头 014010)

类风湿性关节炎(Rheumatoid arthritis，RA)是一种常见的、严重的致畸性自身免疫疾病。越来越多的研究发现，越早对RA 进行治疗干预，就能越有效地控制该病的进一步恶化，并有较好的预后。因此，早期诊断和治疗对阻止该疾病对关节的破坏非常必要。最早应用于RA 临床诊断的血清学指标为类风湿因子(Rheumatoid factor，RF)，虽然其敏感性较高，但特异性较差，在其他风湿疾病、感染性疾病及1%～5%的正常人群中均可呈阳性。后来，又陆续出现了抗核周因子(APF)、抗角蛋白抗体(AKA)等。近年来，抗环瓜氨酸多肽(anti-cyclic citrullin-ated peptide，anti-CCP)抗体被广泛用于RA 的早期诊断，具有灵敏度高、特异性好的特点，是早期诊断RA 的血清学标志性抗体。最近，有研究表明，抗突变型瓜氨酸波形蛋白(anti-mutated citrullinated vimentin，anti-MCV)抗体是另外一种诊断RA 的敏感性和特异性都较好的实验诊断指标［1-5］。

Anti-MCV 是1994 年由Despres 等发现的一种自身抗体，靶抗原波形蛋白是一种重要的细胞骨架蛋白，主要在中胚层起源的细胞中表达，它在凋亡的巨噬细胞内的肽酰精氨酸亚氨酶的作用下瓜氨酸化，这一过程改变了蛋白结构并增加了潜在的抗原决定簇(与RA 相关的靶抗原瓜氨酸)［6，7］。本文通过对RA患者血清中anti-MCV、anti-CCP 及RF-IgM 进行检测，探讨anti-MCV 抗体在RA 诊断中的应用价值。

1 对象与方法

1.1 研究对象 487 例各种风湿性疾病患者均为2013 年3 月至2014 年3 月我院风湿科门诊及住院病例，其中男性138 例，女性349 例，年龄14～76岁，平均(49±18)岁。

1.1.1 RA 患者组 共359 例，其中男性87 例，女性272 例，年龄24～77(48±18)岁。均符合2009年ACR 和欧洲抗风湿病联盟(EULAR)提出的新的RA 分类标准和评分系统［8］。

1.1.2 疾病对照组 共128 例，包括系统性红斑狼疮(SLE)34 例，男性10 例，女性24 例，年龄14～72(46±18)岁;原发性干燥综合征(pSS)22 例，男性9 例，女性13 例，年龄16～74(47±17)岁;混合性结缔组织病(MCTD)28 例，男性10 例，女性18 例，年龄18～70 岁，平均(48±18)岁;骨关节炎16 例，男性7 例，女性9 例，年龄17～76 岁，平均(50±20)岁;强直性脊柱炎15 例，男性9 例，女性6 例，年龄14～68 岁，平均(44±13)岁;痛风13 例，男性6 例，女性7 例，年龄20～69 岁，平均(45±17)岁。

1.1.3 正常对照组 共90 例，其中男性28 例，女性62 例，年龄23～70 岁，平均(46±17)岁。均为我院体检健康者。

1.2 研究方法 采用酶联免疫吸附试验法定量检测anti-MCV 和anti-CCP，检测试剂盒分别由德国ORGENTEC 公司和上海科新生物技术股份有限公司生产。anti-MCV ＞20 U/ml 为阳性，anti-CCP ＞25 U/ml 为阳性。采用动态免疫散射比浊法检测RFIgM，＞15 U/ml 为阳性，仪器和试剂均由西门子股份有限公司提供。

1.3 统计学处理 应用SPSS 17.0 进行统计学分析。采用四格表计算抗体的灵敏度和特异性，两个样本的比较用t 检验和χ2检验。

表1 anti-MCV、anti-CCP 及RF-IgM 在各种疾病中的阳性例数及阳性率Tab.1 Positive cases and positive rates of anti-MCV，anti-CCP and RF-IgM

2 结果

2.1 anti-MCV、anti-CCP 及RF-IgM 在各种疾病中的阳性例数及阳性率 从表1 中可以看出，anti-MCV、anti-CCP 及RF-IgM 在RA 患者组中的阳性率均明显高于疾病对照组和正常对照组(P ＜0.05)。anti-MCV、anti-CCP 及RF-IgM 在疾病对照组中也有一定的阳性率。anti-MCV 在正常对照组中仅一例阳性，定量测定值为26 U/ml，为低滴度的阳性。RF-IgM 在正常对照组中有8 例阳性，阳性率为8.9%。对这8 例进行进一步分析得知，它们的定量测定值范围是(18.9～31.2)U/ml，年龄分布范围为53～62 岁，其中男性3 例，女性5 例。而anti-CCP在正常对照组中无一例阳性。

2.2 anti-MCV、anti-CCP 及RF-IgM 在RA 中的诊断意义见表2 从表2 中可以看出，单一指标中，anti-MCV 具有最高的灵敏度，其次是RF-IgM，最后是anti-CCP;但是在特异性上，anti-CCP 具有最高的特异性，其次是anti-MCV，最后是RF-IgM;所以综合来看，anti-MCV 是一个灵敏度和特异性都还不错的指标。联合检测anti-MCV 和anti-CCP，灵敏度降低到70.2%;但特异性增加到98.7%。如同时检测anti-MCV 和anti-CCP，并以二者中任何一种指标为阳性标准，那么，对RA 的灵敏度和特异性分别为89.5%和97.6%。

表2 anti-MCV、anti-CCP 及RF-IgM 在RA 中的诊断意义Tab.2 Diagnostic significance of anti-MCV，anti-CCP and RF-IgM in RA

3 讨论

RA 是一种累及周围关节为主的多系统性炎症性自身免疫疾病。靶器官主要是关节滑膜，出现经久不愈的炎症、增厚、血管翳形成、软骨及软骨下骨质破坏，最终导致关节畸形及强直而致残。近年的研究认为，早期诊断、早期积极地给予病情缓解药物能及时控制病情，减少骨关节的破坏并改善预后［9］。最早应用于RA 临床诊断的血清学指标为RF，临床主要检测IgM 型。RF-IgM 虽然敏感性较高，但其特异性较差，限制了它的诊断作用。在RA患者血清中还可以检测到几种自身抗体，如抗核周因子抗体、抗角蛋白抗体及抗Sa 抗体等，其表位都含瓜氨酸，提示瓜氨酸是风湿疾病自身抗体靶抗原的决定簇。而anti-MCV 与anti-CCP 有共同的抗原表位即瓜氨酸，有可能作为特异性抗体用于RA 的早期诊断。因此，针对瓜氨酸波形蛋白的特异性抗体——anti-MCV 逐渐成了新的研究热点。

本文研究结果显示:anti-MCV、anti-CCP 和RFIgM 单独作为RA 的检测指标时，其敏感度均比较高，分别为85.1%、76.7%和82.7%，特异性分别为93.2%、95.1%和80.1%，并且三个实验室指标在RA 患者组中的阳性率均明显高于疾病对照组和正常对照组。anti-MCV 诊断RA 的灵敏度最高，而anti-CCP 的特异性最好;两者联合检测灵敏度降低，但特异性最高。进一步分析RA 患者anti-MCV 与anti-CCP、RF-IgM 的关系，结果显示，anti-MCV 与anti-CCP 有较好的关联性，这可能与anti-MCV 和anti-CCP 有共同的抗原表位有关。虽然anti-MCV 与RF-IgM 也有关，但关系不大。anti-MCV、anti-CCP和RF-IgM 三个检测指标两两组合检测时发现，以anti-MCV 或anti-CCP 为RA 诊断标准时，检测的敏感度和特异性均达到了理想的水平，分别为89.5%和97.6%。由于RF-IgM 的特异性方面的缺陷，同时进行anti-MCV、anti-CCP 的检测对临床诊断显得非常重要。

综上所述，作者认为，anti-MCV 对RA 有较高的诊断价值，对于筛查和辅助诊断RA 具有重要意义。

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