两种商品化降钙素原定量检测试剂盒方法学比对

杨 琴 张学东 张文星 (胜利油田中心医院检验科，山东 东营 257000)

降钙素原(Procalcitonin，PCT)由位于11 号染色体(11p15.4)上的Calc-I 基因编码，通过选择性剪接(编码1～4 外显子)生成Calc-ImRNA，转录后在甲状腺滤泡旁细胞粗面内质网翻译成降钙素原前体。裂解生成的PCT 由116 个氨基酸组成，相对分子质量为13 000［1，2］。它在细菌或真菌感染合并严重全身系统反应或器官低灌注时显著升高，而在病毒或局灶感染时水平正常或轻度升高。这个特性使得PCT 用来鉴别系统感染和非感染性炎症或局灶感染，是具有高灵敏度、特异性的新指标。此外，PCT 还可用来判断治疗的有效性、疾病的严重程度和预后［3］。

目前临床上降钙素原的试剂大多为进口试剂盒，试剂和耗材价格昂贵，仪器维护成本高，随着国内全自动磁微粒化学发光技术的发展及国产试剂盒质量的提高，有必要对国内一些厂家的试剂性能进行评估，本文选用临床比对的方法对国产试剂盒质量进行评价，探讨其临床应用价值。

1 材料与方法

1.1 材料 取材来自随机选择2014 年1～3 月间本院门诊、急诊和住院患者，检验申请单目的为降钙素原检测，在进口全自动检测系统和国产全自动化学检测系统平行检测静脉血采集的血清样本。其中临床比对样本300 例，采用双盲法。进口仪器为罗氏e601，试剂为进口配套化学发光试剂;国产全自动为郑州安图生物AutoLumo A2000，配套化学发光试剂为郑州安图生物(Autobio)生产提供。

1.2 方法 ①严格按照试剂盒说明书操作和判定结果。②进口全自动化学发光系统和国产全自动化学发光系统平行检测所选样本的降钙素原，并对两种检测结果结合临床诊断进行统计、分析、比对。③质控均采用厂家提供的配套质控品，采用L-J 法质控方法判断。④PCT 试剂盒对照和考核试剂盒检测原理及结果解释详见表1。

1.3 统计学处理 采用SPSS18.0 统计分析软件进行数据处理和统计分析［10］，阴阳性结果分析进行χ2检验分析，检验水准P ＞0.05，量值相关性统计分析采用线性回归模式分析。

表1 两种商品化试剂盒简介Tab.1 Instruction of two commercial diagnostic kits

2 结果

两种检测系统检测结果的总符合率为97.67%(详见表2)，χ2=1.29，P=0.26，两者差异不显著(P ＞0.05);相关系数r=0.950 05(详见图1)，量值相关性分析有相关性。

不符样本分析，以0.5 ng/ml 作为参考值分析，不符样本7 例，其中6 例样本为灰区样本，无统计学意义，1 例样本为第三方进口试剂和国产试剂检测结果均大于0.5 ng/ml，而进口试剂检测检测结果小于0.5 ng/ml，结合这份样本其他检测结果如肺炎支原体为阳性，C 反应蛋白(CRP)为78.4 mg/ml，D-二聚体阳性，尿胆原阳性，需要多次抽血动态监测标志物浓度的动态变化，并结合临床症状和体征等综合分析。

表2 两试剂盒检测结果比对表Tab.2 Result comparison between two kits

图1 两试剂盒检测结果量值相关性分析图Fig.1 Result correlation between two kits

3 讨论

临床上细菌感染性疾病极为常见，而病原学诊断耗时长，在微生物培养结果出来之前临床上已盲目地使用抗菌药物，造成了抗菌药物的滥用，也加重了患者经济负担。尽快找到快捷、有效的实验方法对细菌感染性疾病进行诊断及鉴别诊断，并准确评价细菌感染性疾病的发生、发展，有着非常重要的临床应用价值。降钙素原(PCT)是近年来发现的一种新的细菌感染诊断与鉴别诊断的指标，研究发现PCT 可用于疾病的早期诊断、细菌感染与非细菌感染的鉴别诊断，还可用于感染病情的监测，反映炎症活动情况及疾病严重程度，比传统的炎性指标有更高的敏感性和特异性［4］。

据调查，目前国内三级甲等以上医院的临床实验室已经普及了自动化仪器［5］，其中进口设备以及试剂所占比例超过95%，基本上处于垄断地位，国产全自动免疫系统处于发展期［6］。目前国内综合性医院临床实验室降钙素原定量检测大多为进口仪器及配套进口试剂，价格昂贵，检验及仪器维护成本过高，依赖性强，增加病人经济及精神负担。我们用国产磁微粒化学发光全自动降钙素原定量检测系统，与用进口免疫检测系统平行检测300 例降钙素原(PCT)样本，并对两种试剂检测结果进行比对分析，结果显示国产磁微粒化学发光降钙素原(PCT)定量检测系统与罗氏降钙素原定量检测系统整体对比结果良好，且试剂及仪器维护成本降低，在一定程度上既满足了临床定量检测的需求，同时在较大程度上降低了检验费用，减轻了患者经济负担，有较大的临床应用价值。

本研究采用双盲法，平行检测了300 例PCT 样本，比对结果显示，其中7 例不符样本，6 例样本结果为0.5 ng/ml 上下偏差20%的样本，1 例样本为第三方进口试剂和国产试剂检测结果均大于0.5 ng/ml，而进口试剂检测检测结果为＞0.5 ng/ml，结合这份样本其他检测结果如肺炎支原体为阳性，C反应蛋白(CRP)为78.4 mg/ml，D-二聚体阳性，尿胆原阳性，因此笔者认为对于该例标本及类似样本，需要多次抽血动态监测标志物浓度的动态变化，并结合临床症状和体征等综合分析。

［1］Russwurm S，Wiederhold M，Oberhoffer M.Molecular aspects and natural source of procalcitonin［J］.Clin Chem Lab Med，1999，37(8):789-797.

［2］胡如雪.降钙素原(PCT)的临床应用价值［J］.江西医学检验，2005，23(3):244，259.

［3］吴 熙，于学忠.降钙素原［J］.中国医学科学院学报，2008，30(2):231-235.

［4］吴修宇，邓 梦，黎杨杨，等.降钙素原在感染性疾病中的临床意义［J］.检验医学与临床，2014，11(1):75-77.

［5］黄建荣，薛一峰，蒋华振.FT3、FT4 化学发光免疫分析的方法学指标及评价［J］.标记免疫分析与临床，2009，16(1):55-56.

［6］李耀华.国内外免疫自动化发展趋势现状与分析［J］.医药论坛杂志，2011，32(14):197-200.