高尿酸症合并高脂血症患者血小板活化功能的研究

王 辉，董万利，方 琪，倪建强，张 莹，黄惠芳

高脂血症是心脑血管疾病的发病原因之一，近年研究发现，血尿酸作为一项血生化指标，不仅可导致痛风的发生，还常与高血压病、糖尿病、动脉粥样硬化、脑梗死、冠心病等疾病密切相关，而动脉血栓、脑血管疾病、动脉粥样硬化等许多疾病的发生均与血小板的功能改变有关。高脂血症和高尿酸症是否引起血小板的活化，临床研究还不明确。血小板活化后合成和释放的物质血栓烷B2(TXB2)及血小板α 颗粒膜蛋白140(GMP-140)，可以反映血小板不同时相的活化状态，是血小板活化的特异性标志物。本次实验通过对高尿酸症和高脂血症患者血清中TXB2及GMP140 水平的检测，了解血小板活化状况与高尿酸和高血脂的关系，为临床诊断提供依据。

1 材料与方法

1.1 标本来源

1.1.1 单纯高尿酸组(A 组)选取单项尿酸高于正常值标本，即血尿酸＞420 μmol/L(本医院生化室血尿酸参考范围150 μmol/L～420 μmol/L)，共计30 例，其他各项指标均为正常参考值范围内。

1.1.2 单纯高血脂组(B 组)选取单项血脂高于正常值标本，即总胆固醇TC＞5.72 mmol/L、甘油三酯TG＞2.30 mmol/L、低密度脂蛋白LDL＞3.36 mmol/L(本医院生化室血脂参考范围分别为TC:2.90～5.72 mmol/L、TG:0.35～2.30 mmol/L、LDL:2.07～3.36 mmol/L)共计30 例，其他各项指标均为正常参考值范围内。

1.1.3 高尿酸合并高脂血组(C 组)选取尿值标本，即血尿酸＞420 μmol/L，血脂高于正常值标本，即总胆固醇TC＞5.72 mmol/L、甘油三酯TG＞2.30 mmol/L、低密度脂蛋白LDL＞3.36 mmol/L，共计30例，其他各项指标均在正常参考值范围内。

1.1.4 正常对照组(D 组)选取各项指标都在正常参考值范围内的标本，共收集30 例。以上所有标本，共计120 例，均来自于2013 年2 月～2013年5 月在我院的体检人群，排除合并糖尿病、冠心病、继发性高血压、血液病、肝、肾功能不全及影响血脂、尿酸代谢疾病的病例。

1.2 研究方法

1.2.1 标本采集 研究对象均于清晨空腹抽取肘静脉血两管，检测血小板聚集功能的血液用含有枸橼酸钠抗凝剂的真空采血管采集，充分混匀，应用PL-11 血小板分析仪进行进行血小板聚集功能的检测;尿酸、TC、TG、LDL 的血液用促凝管采集。充分混匀，以3000 r/min，离心10 min 后，进行各项指标的检测，并调取患者当天的血常规报告，排除血象异常的标本。

1.2.2 仪器 OLYMPUS AU5400 全自动生化分析仪，奥林巴斯产业株式会社生产;PL-11 血小板分析仪，南京神州英诺华医疗科技有限公司生产;Anthos 2010 酶标仪，Anthos fluido 自动洗板机，奥地利Anthos 仪器公司生产;B.D EDTA-2K 抗凝真空采血管和B.D 柠檬酸钠抗凝真空采血管，美国Becton Dickinson 公司产品。

1.2.3 方法 血小板聚集试验:按照PL-11 血小板分析仪使用说明书操作，记录血小板最大聚集率(PAgT);血小板GMP-140 及TXB2测定:严格按照试剂盒说明书操作，结果以吸光度(OD)表示，所购买于上海逸晗生物科技有限公司。

1.2.4 统计处理 采用SPSS17.0 软件进行数据的统计与分析，数据以±s 表示。数据资料采用t 检验，组间对比采用χ2检验，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

A 组GMP-140(11.7±4.4)ng/ml、B 组GMP-140(11.6±3.8)ng/ml 及C 组GMP-140(12.7±5.3)ng/ml 均高于正常对照D 组(10.3±0.5)ng/ml，差别均有统计学意义(P＜0.05)且C 组与正常对照组的差别有明显统计学意义(P＜0.01)，而C组GMP-140(12.7±5.3)ng/ml 又明显高于A 组GMP-140(11.7±4.4)ng/ml 与B 组GMP-140(11.6±3.8)ng/ml，差别有统计学意义(P＜0.05)。A 组TXB2(195±23)pg/ml 及B 组TXB2(180±17)pg/ml，C 组TXB2(224±33)pg/ml 高于正常对照D 组(80.5±16)pg/ml，差别有统计学意义(P＜0.05)，C组与正常对照组的差别有明显统计学意义(P＜0.01)，而C 组TXB2(224±33)pg/ml 又明显高于A组TXB2(195±23)pg/ml 及B 组TXB2(180±17)pg/ml，差别有统计学意义(P＜0.05)。血小板最大聚集率PAgT，A 组、B 组、C 组均高于对照组D 组，差别有统计学意义(P＜0.05)，而C 组PAgT 又明显高于A 组、B 组，差别有统计学意义(P＜0.05)。

表1 单纯性高尿酸组、高血脂组及高尿酸合并高血脂组与正常对照组GMP-140、TXB2、PAgT 比较(±s)

表1 单纯性高尿酸组、高血脂组及高尿酸合并高血脂组与正常对照组GMP-140、TXB2、PAgT 比较(±s)

* 与正常对照组比较P＜0.05;＊＊与正常对照组P＜0.01;＆与高血脂组和高尿酸组比较P＜0.05

3 讨论

GMP-140 是一种高糖基化的单链跨膜糖蛋白，其介导参与的血小板/内皮细胞黏附及血管壁炎症状态，是导致动静脉血栓形成的新的发病机制［1］。血栓素A2(TXA2)主要由血小板微粒合成和释放，有收缩血管、激活血小板和促进血小板聚集的作用。当血管内皮损伤时，循环血液中的血小板在损伤部位黏附，黏附后的血小板合成TXA2增加，前列环素(PGI2)合成减少，从而导致PGI2/TXA2平衡失调、冠状动脉收缩、血小板聚集、血栓形成并诱发和加重心肌缺血，TXA2还能促使致密管系统中的Ca2+的游离，引起致密管收缩，并释放出二磷酸腺苷(ADP)和5-羟色胺(5-HT)，使附近的血小板发生聚集。TXB2是TXA2最终稳定代谢产物，因此可以用TXB2来反映血浆中TXA2的水平［2］。血小板聚集功能是指血小板与血小板之间相互黏附而产生聚集的能力，可以反应血小板的功能，临床上可以用来判断病症并发症的风险和治疗效果［3］。

本次研究通过对采集的标本GMP140 和TXB2水平以及血小板最大聚集率的测定，发现高尿酸、高血脂患者体内的血清GMP-140、TXB2水平与正常者相比，存在明显的升高现象，且与血小板功能关系改变密切，在高血脂合并高尿酸的人群中这种血小板活化现象更为明显严重。

高尿酸除可引起关节炎、痛风石、尿酸结石等临床症状外，现在多数流行病学和临床研究倾向于高尿酸血症作为血栓形成一个独立危险因素，是引起心血管疾病的一个重要原因。NHANEIII 等［4］研究结果显示，血尿酸水平＞416.5 μmol/L 是脑卒中的一个独立危险因素。血尿酸与心脑血管疾病关系逐渐成为研究热点，在心脑血管疾病的发病及预后中起着至关重要的作用［5］。在高脂血症的患者中，血脂会危害冠状动脉，形成粥样硬化。大量脂类物质，在血浆中沉积移动，降低血液流速，通过氧化作用沉积在动脉血管内，并长期黏附在血管壁上，损害动脉血管内皮，形成血管硬化。当人体由于长期高脂血症形成动脉粥样硬化后，使冠状动脉内血流量变小、血管腔内变窄，心肌注血量减少，造成心肌缺血，导致心绞痛，形成冠心病及血栓等［6］。因此对高尿酸和高血脂引发的疾病预防极为重要。

高尿酸和高脂血症患者血清中血小板过度活化，促进了血栓的发生和发展。而其中的TXB2和GMP140 不仅是血小板活化的标志，本身亦是血小板活化的刺激因子，因此阻断和抑制上述介质可能会在一定程度上抑制血小板的活化以及由此带来的一系列不良的连锁反应，从而为心脑血管疾病，动静脉血栓的形成治疗提供新的方向和途径。加强对高血脂和尿酸患者血小板的活性监测，对引发的并发症预防起到一定的作用。

［1］Myers DD，Hawley AE，Farris DM，et al.P-selectin and leukocyte microparticles are associated with venous thrombogenesis［J］.Journal of Vascular Surgery，2003，38(5):1075-1089.

［2］Gibbins JM.Platelet adhesion signalling and the regulation of thrombus formation［J］.Journal of Cell Science，2004，117(16):3415-3425.

［3］张远梅.高血压伴高脂血症患者血小板聚集功能变化分析［J］.吉林医学，2012，33(9):1815-1815.

［4］Waddington C.Elevated uric acid can raise risk for CHD［J］.Cardiol Today，1999，2(1):15.

［5］Vázquez-Mellado J，Alvarez Hernández E，Burgos-Vargas R.Primary prevention in rheumatology:the importance of hyperuricemia［J］.Best Practice ＆ Research Clinical Rheumatology，2004，18(2):111-124.

［6］Talayero BG，Sacks FM.The role of triglycerides in atherosclerosis［J］.Current cardiology reports，2011，13(6):544-552.