桂枝茯苓软胶囊质量标准研究

张 明 张 涛 吕 卓 王 莉 西安大唐制药集团有限公司（西安710075）

桂枝茯苓软胶囊由桂枝、茯苓等5味中药饮片组成，处方出自汉代医圣张仲景《金匮要略》，具有活血化瘀，缓消癥块的功效。它是在桂枝茯苓丸基础上开发的中药新剂型，在保证丸剂疗效的基础上，克服了丸剂有效成分易挥发、不稳定、吸收慢等缺点。本试验对其多味饮片进行定性、定量，并结合剂型特点全面的对其进行质量标准研究。研究过程如下。

1 仪器与材料 1．1 仪 器 SSI高效液相色谱仪（美国SSI公司）；BP211D电子天平（德国Satorius）。

1．2 试 药 桂枝茯苓软胶囊（西安大唐制药集团有限公司生产 批号130501、130502、130503）；桂皮醛、桃仁对照药材、芍药苷、丹皮酚、肉桂酸均购自中国生物制品检定院；乙腈为色谱纯，水为重蒸水，其它试剂均为分析纯。

2 方法与结果 2．1 薄层色谱鉴别研究［1-3］

2．1．1 桂枝的薄层鉴别：取本品10粒，倾出内容物，加乙醚50mL，低温加热回流1小时，滤过，药渣备用，滤液低温挥去乙醚，残渣加乙醇1mL使溶解，作为供试品溶液。另取桂皮醛对照品，加乙醇制成每1mL含1μg的溶液，作为对照品溶液。吸取供试品溶液及对照品溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（60～90℃）—醋酸乙酯（17∶3）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以二硝基苯肼乙醇试液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性样品无干扰。

2．1．2 桃仁的薄层鉴别：取桃仁对照药材1g，加乙醚20mL，回流1h，低温蒸干，加乙醇1mL溶解，作为对照药材溶液。吸取鉴别2．1．1项下的供试品溶液及上述对照药材溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚-醋酸乙酯（18∶2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性样品无干扰。

2．1．3 白芍的薄层鉴别：取鉴别2．1．1项下的药渣，加乙醇20mL，超声15min，滤过，滤液蒸干，残渣加水15mL使溶解，用以水饱和的正丁醇振摇提取2次。每次20mL，合并正丁醇液，用水洗涤2次，每次10mL，弃去水洗液，将正丁醇液至水浴上蒸干，残渣加乙醇1mL使溶解，作为供试品溶液。另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液。吸取供试品溶液及对照品溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-醋酸乙酯-甲醇-甲酸（40∶5∶10∶0．2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%的香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝紫色斑点，阴性样品无干扰。

2．2 含量测定［1，4］2．2．1 色谱条件及系统适应性 试 验：色 谱 柱：Ultimate XB-C18 （4．6mm×250mm，5μm，）；流动相：乙腈-水-冰醋酸（30∶70∶0．5）；流速：1．0mL·min-1；柱温：室温；检测波长：274nm。

理论塔板数按丹皮酚峰计算应不低于2500。

2．2．2 对照品溶液的制备：精密称取肉桂酸、丹皮酚对照品各适量，加甲醇使溶解制成每1mL含肉桂酸2μg、丹皮酚30μg的溶液，即得。

2．2．3 供试品溶液的制备：取本品内容物约0．4g，精密称定，置具塞三角瓶中，精密加入甲醇50mL，密塞，称定重量。超声提取10min，放冷，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，即得。

2．2．4 专属性：2．2．4．1 根据工艺分别制备缺桂枝的阴性样品，结果在肉桂酸峰处无色谱峰出现，说明阴性不干扰肉桂酸的测定。

2．2．4 ．2 根据工艺分别制备缺牡丹皮的阴性样品，结果表明阴性样品在丹皮酚峰处有一小峰。根据文献资料白芍中也含有少量丹皮酚［4］，其含量在0．003%～0．0055%之间，而《中国药典》2010年版一部规定牡丹皮中丹皮酚含量应不低于1．2%，再结合实验结果，丹皮酚干扰峰面积占制剂中丹皮酚峰面积的比例远远小于1%，故此干扰峰可忽略。

2．2．5 线性：分别取肉桂酸、丹皮酚对照品适量，用甲醇分别配制成不同浓度的5份对照品溶液，按上述方法测定，以峰面积A和进样量进行线性回归，结果见表1。

表1 2种成分的线性方程和相关系数

2．2．6 精密度：采用重复性进行试验，取同一批号样品内容物适量，按上述方法制备5份样品测定，以外标法分别计算肉桂酸、丹皮酚的含量，RSD分别为1．66%、2．23%。

2．2．7 溶液稳定性：采用同一份供试品，于0、2、4、6、8h进样，分别以肉桂酸、丹皮酚峰面积计算，RSD分别为1．2%、1．5%。

2．2．8 准确度：采用3个不同浓度的9份样品测定加样回收率，结果平均加样回收率分别为98．6%、97．3%；RSD为分别1．2%、1．4%。

表2 桂枝茯苓软胶囊2种成分测定结果

2．2．9 样品测定：按上述含量测定方法，取3批桂枝茯苓软胶囊进行测定，结果见表2。

3 讨 论 3．1 桂枝茯苓软胶囊是中药复方制剂，成分多，影响鉴别的因素多，通过参考文献和进行试验，对制剂中的桂枝、白芍、桃仁进行薄层色谱定性鉴别，得到了理想的鉴别条件。

3．2 本实验在含量测定中考察了流动相的选择，在最后选用条件下，样品中肉桂酸与丹皮酚可以同时检出，并且其它组分色谱峰可达到基线分离，肉桂酸和丹皮酚与其相邻色谱峰的分离度均大于1．5。这种方法既达到了同时控制本品的多项含量，同时又节约了时间和溶媒。

3．3 根据三批中试样品测定结果，考虑到药材来源以及制剂生产、贮藏等因素，暂定本品每粒含肉桂酸（C9H8O2）不得少于0．1mg，丹皮酚（C9H10O3）不得少于1．8mg。

3．4 结果显示所建立的定性定量方法科学、简单、快速、全面、精确度高，可作为桂枝茯苓软胶囊的质量控制。

［1］ 国家药典委员会．中华人民共和国药典［S］．北京：中国医药科技出版社，2010．

［2］ 徐胜龙，王 晋，李 静，等．红芪胶囊的质量标准研究［J］．陕西中医，2013，34（8）：1065-1062．

［3］ 张 星，陆兔林，毛春芹，等．补阳还五汤质量标准研究［J］．中成药，2013，35（3）：529-533．

［4］ 胡世林，刘 岱，杨立新，等．不同产地白芍中芍药甙和丹皮酚的含量测定及比较［J］．中国中药杂志，1994，19（6）：328-330．