抗SPAG9自身抗体在肿瘤患者外周血中的表达分析

熊孟祥

(湖北省通城县人民医院,湖北 通城 437400)

人类精子抗原的成分非常复杂，有位于精子膜表面的多种糖蛋白抗原，也包括自身结构中的抗原成分，血型抗原组织相容性抗原和精子内部本身所包含的多种酶类抗原等。这些抗原总体上可以按照以下几种方式分类[1]：按照组织特异性分为精子特异性抗原和精子非特异性抗原；按照与生育的关系分为生育相关抗原和生育非相关抗原，按照存在部位分为包被抗原、膜固有抗原、胞浆抗原以及核抗原。精子相关抗原-9(SPAG9)是21世纪初研究新发现的睾丸癌抗原，SPAG9属于JNK相互作用蛋白家族的新成员，是肿瘤睾丸抗原家族一员[2]。肿瘤睾丸抗原属于在睾丸组织正常表达，在肿瘤组织中高度表达，在其他极少数器官中可能有微弱表达的一类肿瘤相关抗原。SPAG9高度表达与多种肿瘤，如子宫内膜癌、肾癌等有关。SPAG9是一个定位于人体染色体上的单拷贝基因，定位区域是各种癌症中的一个与癌基因扩增和表达相关的区域。肿瘤抗原血清学分析显示抗原编码在17号染色体上的一个特定的区域，并在该区域内增强表达间接反映了肿瘤的相关状况。因此，SPAG9在体内的表达水平能够很好地在临床上作为肿瘤检测的分子依据[3]。国内外关于SPAG9的研究近年来均有不少，显示其在活体内有较强的体液免疫反应，研究人员就此推测SPAG9是免疫原性肿瘤抗原，具有成为肿瘤疾病早期诊断依据的潜力。子宫腺肌病为具有生长功能的子宫内膜腺体和间质向子宫肌层行恶性浸润，在其中呈现弥漫性生长。有研究表明，SPAG9在子宫腺肌病中的表达异常，显示出两者之间的相关性[4]。本研究回顾性分析了我院经病理切片以及超声、核磁共振等多种方式检测确诊的肿瘤患者的临床资料。通过对患者血清的采集，试验和数据的分析对参试肿瘤患者外周血血清中SPAG9自身抗体的含量进行检测，旨在更好地将其作为癌症诊断和治疗的参考标准并在临床上加以指导和应用。现将研究结果报道如下。

1 临床资料

1.1一般资料 本研究回顾性分析了我院相关科室2011年3月—2012年3月共80例肿瘤患者的临床资料，均经过病理切片，超声以及核磁共振等多种方式检测确诊。其中男45例，女35例；年龄32～70(51.0±1.5)岁。80肿瘤患者中，肝癌29例，肺癌32例，其他癌症19例。健康对照组30例，其中男15例，女15例，经过检查未发现有异常。2组基本资料比较均无差异(P均>0.05)。

1.2方法 80例癌症患者和健康对照组人员均空腹后进行血液采集，每人采集血液3～5 mL，静止一段时间后3 000 r/min离心10 min，取上清液血清置于-80 ℃冰箱保存。SPAG9的检测采用APAG9重组蛋白作为抗原建立ELISA。每个板孔内加入100 ng抗原，置于4 ℃环境下过夜；取出后洗板5次，每次1 min，加密封液后置于37 ℃环境中稳定1.5 h后加入稀释后的样品100 μL，置于37 ℃环境中稳定1.5 h后洗板5次，每次1 min。将稀释后的酶标记物100 μL加入体系中，37 ℃环境中稳定1 h后洗板5次，每次1 min。加显色液显色，终止液终止后用酶标仪读数，以健康对照组最终吸光度值加二倍标准差作为阳性判断标准，记录并分析所得数据。

1.3统计学处理 用SPSS 13.0软件对数据进行统计学分析，计量资料以均数±标准差表示，组间比较采用卡方检验。计量资料采用均数±标准差表示。2组不同时间点间的比较采用多因素水平重复测量的方差分析。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

由80例肿瘤患者采集的血清分析知道，其中SPAG9免疫反应的总体阳性率为31%，29例肝癌患者的阳性率为40%，32例肺癌患者的阳性率20%，其他19例癌症患者的阳性率为43%；健康对照组的阳性率仅为6%，与癌症患者比较有显著性差异(P<0.05)。研究结果还显示，肝癌组和其他癌症组的OD值均比较分散，出现有较强的免疫反应患者；相反，肺癌组患者的OD值显示较为集中且无强免疫反应患者出现。

3 讨 论

癌症又被称为恶性肿瘤，是控制细胞生长增殖机制的失控而引起的一类疾病。癌细胞除了自身失去控制不断增殖外，还会局部侵入周围正常的组织并经体内循环系统或淋巴系统在全身转移。导致癌症发生的原因非常复杂：当机体处于化学污染，电离辐射以及代谢毒素，内分泌功能紊乱等各种复杂环境时，机体正常细胞就可能因为这些致癌因素的影响而出现癌变，出现机体局部组织细胞异常增生以及局部肿块。因此，癌症是机体正常细胞在多种复杂因素，多个不同阶段以及基因出现多次突变引起的一类疾病[5]。癌症的致死率多年来一直占据疾病死亡的首位，而癌症的治疗主要是基于早期的诊断和预防，在癌症早期诊断过程中，肿瘤标志物是一个重点，对其的研究近年来也逐渐成为热门。研究人员希望开发出抗肿瘤抗原的自身抗体，从而取代使用血清抗原作为标记。肿瘤相关抗原大多数为自身蛋白质，其免疫原性较弱[6]。近年来，研究人员发现SPAG9，SPAG9属于JNK相互作用蛋白家族的新成员，是肿瘤睾丸抗原家族一员。在肿瘤组织中表达的阳性率很高且SPAG9抗原免疫原性也较强，能使患者出现较强的体液免疫反应并产生相应的抗体。有研究报道抗SPAG9抗体在癌症患者血清中的阳性检出率达到70%，在活体内多种组织类型的早期阶段均表现出较高的抗SPAG9免疫活性，相反，健康人的血清中则没有[7]。

本研究结果显示，健康人外周血中抗SPAG9自身抗体的表达远低于肿瘤患者外周血中抗SPAG9自身抗体的表达。肝癌患者的体液免疫反应性较肺癌和其他癌症强，可能与组织器官自身的特点相关。马延磊等[8]对SPAG9在肺癌中的表达做过详细的研究，结果显示：SPAG9在肺癌的早中期表达比在晚期中表达强，同样显示出SPAG9跟肿瘤的发生和发展关系密切，可以作为一种肿瘤发生发展甚至转移的一个生物学指标。因其在肺癌中高度表达，因此尤其可以作为肺癌发生发展的一个标志物。SPAG9的免疫原性已经得到证实，其自身抗体在各种肿瘤患者外周血中均有表达，但是表达的程度略有不同。从结果上来看，SPAG9自身抗体的阳性率还是不高，可能是由于实验条件还有待于继续优化，标本的处理过程对结果有些许的影响；也可能因为部分患者非癌症的初次诊断患者，前期的治疗因素对本试验的结果有影响；此外，参与研究的癌症患者人数，健康对照组人数和组别的级别分类等都可能会影响试验结果，理论上扩大研究样本数在进行检测效果会更好[9]。

总之，SPAG9在人体多种常见肿瘤疾病中均有显著地表达，其表达的程度与肿瘤的发生和发展有密切的关系，其较高的免疫原性使得其在肿瘤的早期诊断和治疗中都起到了积极的作用。相信SPAG9的相关研究会是医学领域未来研究的重点，SPAG9的具体作用机理和与其相关的分子水平的研究也将会有越来越多的成果问世。

[参考文献]

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