补肾活髓颗粒对慢性再生障碍性贫血患者骨髓血清中FGF-1的影响*

苏迎洁 王晓宝 王树庆△

（1．潍坊医学院，山东 潍坊 261042；2．潍坊医学院附属医院，山东 潍坊 261031）

慢性再生障碍性贫血（CAA）是一组由多种病因引起的骨髓造血功能衰竭，并以造血干细胞损伤、外周血全血细胞减少为特征的病证，可由某些急性中毒及各种电离辐射引起。中医学认为本病属“虚劳”、“髓劳”范畴，而肾虚血瘀是CAA发病中的主要病机。笔者采取以补肾填精、通络活髓为法组方而成的补肾活髓颗粒治疗CAA患者，观察其临床疗效及对骨髓血清中酸性成纤维细胞生长因子（FGF-1）的影响。报告如下。

1 材料与方法

1．1 病例选择 西医诊断标准参照第3版《血液病诊断及治疗标准》［1］制定。中医证候诊断标准参照《当代中西医结合血液病学》［2］和《中药新药临床研究指导原则（试行版）》［3］。 纳入标准：符合以上中、西医诊断标准，年龄为18～65周岁，坚持治疗者并签署知情同意书。 排除标准：由阵发性睡眠性血红蛋白尿症、骨髓增生异常综合征中的难治性贫血、急性造血停滞、骨髓纤维化、急性白血病、恶性组织细胞病等引起的全血细胞减少性疾病，对实验药品过敏者，合并严重心脑血管、肝、肾、造血系统及免疫系统疾病、精神病患者，妊娠或哺乳期妇女，不愿合作者。

1．2 病例资料 确诊的66例CAA均为来源于潍坊医学院附属医院2010年9月至2012年6月的住院及门诊患者。采用随机数字表法分为两组。实验组和对照组各33例，另设正常对照组20名，均为志愿者或患者健康的家属。其中实验组男性15例，女性18例；年龄18～65 岁，平均（39．33±8．74）岁；病程 0．8～156 个月，平均（40．06±24．32）个月。 对照组男性 16 例，女性 17例；年龄 18～65 岁，平均（37．72±10．67）岁；病程 0．5～221 个月，平均（36．57±24．60）个月。 正常对照组男性12 名，女性 8 名；年龄 18～45 岁，平均（30．24±9．28）岁。两组资料经统计学分析，差异无统计学意义 （P＞0．05）。

1．3 治疗方法 实验组采用补肾活髓颗粒（中药配方颗粒，四川绿色药业科技发展股份有限公司）加减：生地黄30 g，熟地黄30 g，菟丝子20 g，枸杞子 20 g，鸡血藤 30g，女贞子 15g，墨旱莲 15g，当归 10g，穿山甲 10g，地龙10 g。对照组采用西药常规治疗，予口服康力龙，每次 2～4mg，每日 3 次；环孢素 A 每次 50～100mg，每日3次。两组患者在用药期间合并感染者予经验性抗感染治疗；HGB低于60 g/L者输注滤白悬浮红细胞；出血倾向明显 PLT＜30×109/L，或 PLT＜20×109/L 者输注单采少白血小板。两组均以6个月为1个疗程，治疗前及疗程结束后均常规行骨髓穿刺及外周血检查。正常对照组不作任何处理。

1．4 观察指标 （1）对患者进行一般项目检查，血、尿常规检查，心（心电图）、肝、肾功能检查，观察患者症状体征、外周血象变化及不良反应；并分别于疗前、疗后取骨髓液3mL，分离血清后，采用ELISA法检测骨髓血清中FGF-1含量，实验操作严格按照说明书进行，试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司。（2）对患者症状进行评分，以下症状分4级评分，其中心悸气短、头晕、乏力、面色苍白，无计0分，轻度计2分，中度计4分，重度计6分；尿黄、形寒肢冷、食少、潮热盗汗、手足心热、口渴欲饮、便溏，无计0分，轻度计1分，中度计2分，重度计3分。

1．5 疗效评价 西医疗效评价标准参照《血液病诊断及疗效标准》［1］。基本治愈：贫血和出血症状消失，Hgb达 120 g/L（男性）或 110 g/L（女性），WBC 达 4．0×109/L，PLT达100×109/L，随访1年以上未复发）。缓解：贫血和出血症状消失，Hgb男性达120 g/L，女性达100 g/L），WBC 达 3．5×109/L 左右，PLT 也有一定程度增加，随访3个月病情稳定或继续进步。明显进步：贫血和出血症状明显好转，不输血，Hgb较治疗前1个月内常见值增长30 g/L以上，并能维持3个月。判定以上标准，均应3个月内不输血。无效：经充分治疗后，症状、血象未达明显进步。中医疗效判定标准参照《中药新药临床研究指导原则（试行）》［3］。 临床痊愈：中医临床症状、体征消失或基本消失，证候积分减少≥95%。显效：中医临床症状、体征明显改善，证候积分减少≥70%，＜95%。有效：中医临床症状，体征均有好转，证候积分减少≥30%，＜70%。无效：中医临床症状、体征均无明显改善，甚或加重，症状积分减少不足30%。根据积分法判定中医证候总疗效。症状积分计算公式（尼莫地平法）为：（治疗前积分-治疗后积分）/治疗前积分×100%。

1．6 统计学处理 应用SPSS15．0统计软件。计量资料以（±s）表示，采用 t检验、χ2检验。 P＜0．05 为差异有统计学意义。

2 结 果

2．1 两组临床疗效比较 见表1。实验组与对照组疗效相当（P＞0．05）。

表1 两组临床疗效比较（n）

2．2 两组中医证候疗效比较 见表2。实验组中医证候疗效明显优于对照组（P＜0．05）。

表2 两组中医证候疗效比较（n）

2．3 两组治疗前后临床症状积分比较 见表3。两组疗后症状积分均低于治疗前（P＜0．01），且组间症状积分有明显差异，实验组积分低于对照组（P＜0．05）。

表3 两组治疗前后临床症状积分比较（分，±s）

表3 两组治疗前后临床症状积分比较（分，±s）

与本组治疗前比较，*P＜0．01；与对照组治疗后比较，△P＜0．05。 下同。

组 别 n 治疗前 治疗后实验组 33 24．30±8．06 15．24±5．38*△对照组 33 23．60±8．26 20．81±5．97*

2．4 两组治疗前后外周血象比较 见表4。两组患者疗后 WBC、HGB、及 PLT 均得到明显提升（P＜0．01），实验组 HGB、PLT 改善优于对照组（P＜0．05）。

表4 两组治疗前后外周血常规比较（±s）

表4 两组治疗前后外周血常规比较（±s）

组 别HGB（g/L） WBC（×109/L）PLT（×109/L）实验组 治疗前 37．90±10．33（n=33） 治疗后 65．22±20．67*△对照组 治疗前 36．8±12．52 51．88±11．68 2．44±0．51 101．4±16．59*△ 3．51±0．73*56．24±12．88 2．62±0．48（n=33） 治疗后 58．38±29．41*88．69±26．52* 3．55±0．84*

2.5 两组治疗前后骨髓血清中FGF-1水平比较 实验组治疗前 FGF-1水平为（35.21±6.54）ng/L，治疗后为（70.46±8.95） ng/L；对照组治疗前为（38.96±7.84）ng/L， 治疗后为 （55.81±10.39）ng/L； 正常对照组为（102.33±20.57）ng/L。结果示治疗前两组间比较，无明显差异 （P＞0.05），但表达水平低于正常对照组 （P＜0.01），治疗后实验组和对照组两组均较治疗前明显增高（P＜0.01），实验组表达较对照组高（P＜0.05），与正常对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。

2.6 不良反应 两组患者治疗中均存在不良反应，经对症处理后不良症状消失或缓解，不影响疗效。其中实验组手足震颤1例，肝功损害2例。对照组齿龈增生1例，肝功损害4例，痤疮、多毛3例，不良反应发生率高于实验组（P＜0.05）。

3 讨 论

FGFs家族与造血调节有关，微环境平衡的维持和血细胞生成过程都有赖于FGFs的参与。FGF-1作为FGFs家族中的一员，研究表明其有明确的胚胎发育、血管生成、损伤修复、营养神经、骨骼生长作用［4］；其与造血功能的调节方面研究尚少，但其已发现的生物学功能都表明FGF-1与造血功能联系密切。在成纤维细胞、血管内皮细胞、和成骨细胞等细胞表皮均有FGF-1的受体，作为一种多功能的细胞生长因子，FGF-1与这些细胞表面的受体结合后，启动信号转导通路［5-6］，发挥其促进骨组织、血细胞等的有丝分裂，影响多序列的造血细胞的扩增，并协同粒-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）增加非定向造血干/祖细胞集落的形成，从而促进粒细胞和巨核细胞生成和成熟。

本研究通过补肾活髓颗粒治疗CAA，观察治疗前后症状积分、外周血象变化，以及骨髓血清中FGF-1的表达情况，来研究补肾活髓中药在治疗CAA中的作用及其对FGF-1的影响。补肾活血中药可促进骨髓成纤维细胞的的生成，形态、功能的修复，从而改善造血微环境［7］。本研究提示，以补肾活髓颗粒治疗CAA疗效确切，且骨髓血清中FGF-1，治疗后水平均有所提升，提示FGF-1参与再生障碍性贫血贫血的发生与疾病进展，补肾活血颗粒对FGF-1有调节作用，从而改善造血微环境，使骨髓指标及血常规发生变化。

目前对于FGF-1的研究基于其改善造血微环境角度的报道尚少，如果从微观上进一步研究补肾活髓颗粒治疗CAA的作用机理，进一步探究CAA的发病机制，从而为防治CAA提供更多策略。

［1］ 张之南，沈悌.血液病诊断及疗效标准［M］.3版.北京：北京科技出版社，2007：20-21.

［2］ 邓成珊，周蔼祥.当代中西医结合血液病学［M］.北京：中国医药科技出版社，1997：68.

［3］ 中华人民共和国卫生部.中药新药临床研究指导原则 （试行版）［M］.北京：中国医药科技出版社，2002：178-180.

［4］ 谭亚清，刘德虎.人酸性成纤维细胞生长因子的研究进展［J］.生物技术通报，2013，29（5）：22-27.

［5］ 劳兴珍，高向东.酸性成纤维细胞生长因子与肝素结合的结构与功能研究进展［J］.药物生物技术，2010，17（4）：372-376.

［6］ 吴雷.补髓生血颗粒对慢性再障患者骨髓单个核细胞MEK表达的影响［J］.中医药信息，2011，28（3）：67-69.

［7］ 于志峰，戴锡孟.补肾活血法改善免疫介导型再障小鼠骨髓造血微环境的实验研究［J］.中国中医药科技，2001，8（5）：332.