榆林市某养兔场华誉黑兔球虫病的调查与种类鉴定

冯 平，贺文强，屈 雷＊

（1.榆林学院生命科学学院，陕西榆林719000；2榆林学院／陕西省陕北白绒山羊工程技术研究中心，陕西榆林719000）

榆林市位于陕西省北部，位于东经107°28′～111°15′，北纬36°57′～39°34′之间，地域东西长385 km，南北宽约263km，总面积43 578km2。地貌大体以长城为界，北部为风沙草滩区，占总面积的42%，南部为黄土丘陵沟壑区，占总面积的58%。平均海拔1 000～1 500m。养兔业是榆林市传统的特种养殖行业。榆林市养兔业由养殖皮兔和肉兔两部分组成，近几年发展较快的是肉兔产业［1］。华誉黑兔是以基地加公司发展起来的肉兔养殖，其全身呈黑色，颈部粗短、背毛浓厚。其肉具有高蛋白质、高磷脂、高消化率，低胆固醇、低食用脂肪、低尿胺等特点。兔球虫病是家兔中常见而危害严重的一种原虫病，对养兔业危害极大，特别幼兔的感染率高，患病幼兔死亡率也较高，是影响家兔养殖的重要疾病。临床特征为腹泻、体重减轻、食欲减退等［2］。为了进一步了解榆林市华誉黑兔球虫感染情况，为华誉黑兔球虫病的防控工作提供依据，笔者于2011年3月至5月对榆林市某养兔场华誉黑兔球虫病的发病情况进行了调查。

1 材料与方法

1.1 试验试剂

饱和食盐水溶液，2.5%的重铬酸钾溶液，生理盐水。

1.2 样品采集

采集某养兔场不同月龄健康状态的华誉黑兔的粪便样品，其中2月龄兔子粪便样品10份，3月龄兔子粪便样品11份，5月龄兔子粪便样品3份，每份约15g～20g，分别装于一次性塑料袋中，编号并记录，置于4 ℃冰箱保存待检。

1.3 测定方法

1.3.2 粪便阳性检查 将粪便样品置干净的烧杯内，加适量清水充分搅匀，研碎，经过60目筛，滤液3 000r／min离心10min取沉淀，加饱和盐水漂浮，2 000r／min离心10min，取上清液加4倍体积的清水，3 000r／min离心10min，沉淀即是收集的兔球虫，置显微镜下观察。

1.3.3 卵囊的培养 将从阳性粪样中收集的球虫卵囊混合放入大培养皿中，加入2.5%的重铬酸钾溶液，使其均匀混合。置于29℃恒温培养箱中培养（随时添加2.5%重铬酸钾溶液，以防干涸），每5～6 h摇动平皿1次，每隔5～6h吸出少许进行镜检，确定卵囊的发育进程。直到80%以上的球虫卵囊孢子化。

1.3.4 卵囊的鉴定 根据有关资料［2－8］所描述的卵囊特征结合相关图谱进行种类鉴定。对孢子化的球虫卵囊进行观察和测量，观测的内容包括卵囊的大小、形态、颜色、内部构造、卵膜孔的宽度及有无、有无内外残体、孢子囊的形态、斯氏体、极粒、形状指数等，记录各种卵囊的最早孢子化时间。

1.3.5 各种类兔球虫感染比例 检查各种类兔球虫数量时，在卵囊孢子化后任意观察孢子化的卵囊，记录各种卵囊数量并计算各种卵囊在所检出卵囊中所占的百分比。

2 结果与分析

2.1 各类球虫形态特征

本次调查共检获8 种Eimeria 球虫，各种球虫卵囊的主要形态（图1）描述如下。

2.1.1 斯氏艾美耳球虫，卵囊椭圆形，淡黄色，大小为33.8～35.4×20.4～21.7μm，平均34.6×21.1 μm，卵形指数1.640，有卵膜孔，无外残体，有内残体，有斯氏体，孢子囊呈卵圆形。孢子化时间72h。

2.1.2 兔艾美耳球虫（E.oryctolagi），卵囊呈卵圆形，无色透明，大小为32.4～35.0×21.4～22.5 km，平均33.7×22.1km，卵形指数1.525，无卵膜孔，有外残体，有内残体，有斯氏体，孢子囊呈卵圆形。孢子化时间50h。

2.1.3 大型艾美耳球虫（EimeriamagnaPerard，1925），卵囊呈卵圆形，黄褐色，大小为33.1～37.8×21.5～24.6km，平均35.2×23.1km，卵形指数1.524，有卵膜孔，有外残体，有内残体，无斯氏体，孢子囊为卵圆形。孢子化时间48～72h。

2.1.4 中型艾美耳球虫（EimeriamediaKessel，1929），卵囊呈椭球形，橙黄色，大小为23.3～26.5×15.3～17.0μm，平均25.0×16.0μm，卵形指数1.563，有卵膜孔，有外残体，有内残体，有斯氏体，孢子囊呈卵圆形。孢子化时间45～68h。

2.1.5 小型艾美耳球虫（EimeriaexiguaYakimoff，1934），卵囊呈亚球形，无色透明，大小为14.2～18.7×11.9～16.9μm，平均16.8×13.1μm，卵形指数1.282，无卵膜孔，无外残体，无内残体，无斯氏体，孢子囊呈卵圆形。孢子化时间为28h。

2.1.6 穿孔艾美耳球虫（E.perfoansLeuckart，1978），卵囊呈卵圆形，黄褐色，大小为23.8～30.0×14.4～17.4μm，平均26.6×16.0μm，卵形指数1.663，无卵膜孔，有外残体，有内残体，有斯氏体，孢子囊呈卵圆形。孢子化时间48h。

2.1.7 那格浦耳艾美耳球虫（E.nagpurensisGill andRay，1961），卵囊呈筒形，淡蓝色，大小为17.2～26.7×10.9～15.4μm，平均21.2×13.2μm，卵形指数1.606，无卵膜孔，无外残体，有内残体，有斯氏体。孢子化时间48h。

2.1.8 野兔艾美耳球虫（EimerialeporisNieschulz，1923），卵囊呈长卵圆形，无色透明，大小为30.4～35.0×22.0～22.8μm，平均33.2×22.3 μm，卵形指数1.489，无卵膜孔，有外残体，有内残体，有斯氏体，孢子囊呈椭圆形。孢子化时间44h。

2.2 华誉黑兔球虫病感染情况

在调查的24只黑兔中有17只检查到了球虫的卵囊，球虫总感染率为70.8%，各年龄段华誉黑兔兔球虫感染具体情况见表1。从表1可以看出，2月龄的华誉黑兔球虫感染率最高，5月龄的华誉黑兔未检到球虫卵囊，随着年龄的增长，球虫的感染率呈明显下降趋势。

表1 不同月龄的华誉黑兔兔球虫感染率Table 1 Mouth age Coccidian infection rate in Huayu black rabbits at different months age

2.3 各种类兔球虫感染统计

鉴定感染球虫种类8种，主要为那格浦尔艾美耳球虫、大型艾美耳球虫、微小艾美耳球虫、穿孔艾美耳球虫，所占比例分别为58.0%、14.7%、11.2%和7.0%（表2）。

3 讨论

兔球虫是属于顶复亚门、孢子虫纲、真球虫目中的艾美耳科和隐孢科，均系细胞内寄生的原虫［2］。据文献报道，目前公认的感染兔艾美耳球虫有16种［8］。本次调查共发现8种兔艾美耳球虫，卵囊的大小与有关文献［2，7，9］所描述的基本一致。与文献［3，10－11］相比，黑兔感染球虫的种类较少，感染率较低，到5月龄时甚至在粪样中未检测到球虫卵囊。且感染的球虫的致病性较低，感染的致病性较强的球虫不是优势种。在黑兔粪样的采集过程中，笔者了解到在黑兔的饲养管理过程中，养殖场主应用球虫疫苗对兔场的球虫病进行了预防，养殖场的养殖环境也较干燥，这可能是该兔场球虫的感染率较低的原因。除此以外，会不会是该黑兔种类本身对球虫具有较强的抵抗力，有待进一步证实。

表2 各种类兔球虫感染情况Table 2 Infection status of each rabbit coccidia species

图1 榆林市黑兔球虫种类（孢子化卵囊）1.斯氏艾美耳球虫；2.兔艾美耳球虫；3.大型艾美耳球虫；4.中型艾美耳球虫；5.微小艾美耳球虫；6.穿孔艾美耳球虫；7.那格浦尔艾美耳球虫；8.野兔艾美耳球虫Fig.1 Species of black rabbit coccidiosis in Yulin（sporulated oocysts）1.Eimeria stiedai；2.E.oryctolagi；3.Eimeria magna Perard ；4.Eimeria mediaKessel；5.Eimeria exiguaYakimoff；6.E.perfoans Leuckart；7.E.nagpurensis；8.Eimeria leporisNieschulz

在家兔球虫的种类中，致病性较强的球虫主要有斯氏艾美耳球虫、肠艾美耳球虫、松林艾美耳球虫和中型艾美耳球虫，尤以斯氏艾美耳球虫的致病性最强，其他种类的兔球虫致病性较弱。本次调查中华誉黑兔兔球虫优势种为那格浦尔艾美耳球虫、大型艾美耳球虫、微小艾美耳球虫和穿孔艾美耳球虫，均为致病性较弱的种类。其他四种球虫的感染量仅为9.1%，其中致病性强的斯氏艾美耳球虫为1.4%。说明该兔场兔球虫病的危害性较小。

为控制兔子球虫病的发生，应做好以下几点工作：①改善饲养管理条件，以提高兔子的非特异性抵抗力。②在夏秋两季可在饮水中按时按量投服抗球虫药物，如氯苯胍、地克珠利、磺胺二甲基嘧啶等，注意抗球虫药的轮换使用。③在药物预防的同时，可应用兔球虫疫苗，对养兔场的球虫病进行预防。

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