鱼油软胶囊中脂肪酸组成及比率分析

胡勤玲 李 珊 赵 昕 吴永宁 宫智勇

(武汉轻工大学食品科学与工程学院1，武汉 430023) (武昌工学院食品工程学院2，武汉 430065)

海洋鱼油中含有大量不饱和脂肪酸(PUFAs)，尤其是二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)等多不饱和脂肪酸。DHA、EPA具有维护脑和视网膜及延缓脑衰老等作用，同时还具有降低胆固醇，预防动脉粥样硬化和心脑血管疾病等生理功能，因此鱼油制品被广泛应用于医药及保健食品中[1-6]，但高浓度的DHA 、EPA鱼油若服用不当可能会出现头晕、恶心等症状[7]。人类膳食中不饱和脂肪酸结构不当是当前心血管疾病发病率越来越高的重要原因之一，目前世界各国根据科学家的研究结果，对膳食中n-6 与n-3的均衡比例提出了建议。2000年，中国营养学会推荐的n-6/n-3比值为4～6∶1。在我国目前饮食条件下，n-6不饱和脂肪酸一般是过量的，而n-3不饱和脂肪酸严重不足，所以需增加DHA与EPA的摄入来平衡n-6不饱和脂肪酸与n-3不饱和脂肪酸的比率，因此DHA 、EPA主要来源的海洋鱼油产品的质量显得非常重要[8-11]。本研究采用气相色谱法对海洋鱼油软胶囊的脂肪酸组成和比率进行分析，为合理补充DHA、EPA等多不饱和脂肪酸提供理论依据，并为鉴别海洋鱼油质量提供基础数据。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

37种脂肪酸标准品：美国Sigma公司；鱼油软胶囊样品：同仁堂、保和堂等药店；2 mol/L氢氧化钾-甲醇溶液；正己烷、甲醇、氢氧化钠、无水硫酸钠、三氟化硼-甲醇溶液均为分析纯。

1.2 仪器与设备

FA2104N电子天平：奥豪斯仪器有限公司；旋涡混合器：金坛市医疗仪器厂；TGL-205离心机：长沙平凡仪器仪表有限公司；HH-2数显恒温水浴锅：上海维城仪器有限公司；安捷伦7890A气相色谱仪：安捷伦科技有限公司。

1.3 试验方法

1.3.1 色谱条件

色谱柱SP-2560 100 m×0.25 mm×0.2 μm；载气为氮气，流速为5 mL/min，进样口温度为250 ℃，分流比为10∶1；升温程序：100 ℃保持4 min，3 ℃/min保持20 min升至230 ℃，运行到67.333 min，30 ℃/min降至100 ℃，保持0 min，运行到71.667 min。

1.3.2 甲酯化方法

取样品油0.1 g于10 mL容量瓶中，加入2 mL 0.5 mol/L的氢氧化钠-甲醇溶液在65 ℃皂化30 min，后加入2 mL的三氟化硼-甲醇(1∶3)溶液，加热，反应3 min时间后，冷却至室温，加入2 mL正乙烷进行萃取，摇匀后静置分层，取上层有机相，并用无水硫酸钠过滤备用[12]。

2 结果与分析

2.1 精密度试验

对同一种鱼油软胶囊样品进行6次平行检测，其结果见表1，保留时间相对标准偏差RSD小于0.3%，峰面积相对标准偏差RSD小于2.6%，可见本方法具有较好的重复性。

表1 脂肪酸甲酯保留时间和峰面积的重现性(n=6)

2.2 加标回收率试验

向0.1 g样品油中分别精确加入一定量的DHA、EPA标准品，将样品进行前处理后进样检测。DHA和EPA加标回收率平均值分别为102.5%，RSD=5.48%(n=6)；101.7%，RSD=3.62%(n=6)。

2.3 稳定性试验

取新衍生的同一份样品油衍生液，分别在室温放置0、2、4、8、16、24 h时后在同样的条件下进行色谱分析，计算得各时间点下，各脂肪酸衍生物的各峰值保留时间和峰面积百分比对0 h时的标准偏差值均小于2.0%，表明衍生物对于常规色谱分析稳定性良好。样品油经衍生化处理，放置30 d后测定其含量，未见DHA、EPA含量降低，说明样品油在常温状态下短期放置，其脂肪酸未产生分解。

2.4 气相色谱分析结果

对样品油进行处理，得到其脂肪酸组成相对含量及比率。由其脂肪酸组成可以看出，鱼油脂肪酸的碳链较长，其碳原子数在14～22之间。饱和脂肪酸(SFA)主要为C14∶0、C15∶0、C16∶0、C17∶0、C18∶0，其中C15∶0、C17∶0含量较低，C20∶0含量极低，在各种海洋鱼油中几乎未检出。单不饱和脂肪酸(MUFA)主要为C14∶1、C16∶1、C17∶1、C18∶1、C20∶1、C22∶1，其中C18∶1含量最多。多不饱和脂肪酸(PUFAs)主要为C18∶2、C18∶3、C20∶2、C20∶4、C20∶5、C21∶5、C22∶5、C22∶6，其中EPA、DHA含量最多。

2.4.1 海洋鱼油软胶囊脂肪酸组成及比率

表2为海洋鱼油软胶囊脂肪酸组成相对含量及比率，由表2可以看出海洋鱼油软胶囊中n-3不饱和脂肪酸质量分数约为22.5%～34.9%，除鱼油软胶囊1外，其他鱼油软胶囊中n-6不饱和脂肪酸与n-3不饱和脂肪酸的比率均很小，约为0～0.2，EPA与DHA的比率约为0.8～1.6。

表2 海洋鱼油软胶囊脂肪酸组成质量分数(%)及比率

表2(续)

2.4.2 深海鱼油软胶囊脂肪酸组成及比率

表3为深海鱼油软胶囊脂肪酸组成相对含量及比率，由表3可以看出深海鱼油软胶囊中除深海鱼油软胶囊3中检测到的DHA质量分数仅为1.5%外，其他深海鱼油软胶囊中n-3不饱和脂肪酸质量分数较高，约为35.6%～55.7%， n-6不饱和脂肪酸与n-3不饱和脂肪酸的比率约为0.1～0.2， EPA与DHA的比率约为1.3～1.9。

2.4.3 鱼肝油软胶囊和藻油DHA软胶囊脂肪酸组成及比率

用同样检测方法对6种鱼肝油软胶囊和藻油DHA软胶囊进行检测，表4、表5分别为鱼肝油、藻油DHA软胶囊脂肪酸组成质量分数及比率。由表4可以看出，除鱼肝油软胶囊4中检测到的EPA、DHA含量均很低外，其他鱼肝油软胶囊中n-3不饱和脂肪酸质量分数均较高，约为21.2%～24.7%，但此含量比鱼油软胶囊和深海鱼油软胶囊中的含量低。由表5可以看出藻油DHA软胶囊中脂肪酸组成种类不及鱼油软胶囊、深海鱼油软胶囊和鱼肝油软胶囊多，其主要n-3不饱和脂肪酸为DHA，EPA含量极少。

表3 深海鱼油软胶囊脂肪酸组成质量分数(%)及比率

表4 鱼肝油软胶囊脂肪酸组成质量分数(%)及比率

表5 藻油DHA软胶囊脂肪酸组成质量分数(%)及比率

3 讨论与结论

鱼油软胶囊和深海鱼油软胶囊中n-3不饱和脂肪酸含量高，适合降血脂、防治动脉粥样硬化等心血管疾病的群体服用[13]；特别是深海鱼油软胶囊中n-3不饱和脂肪酸含量最为丰富，适合需大量补充DHA、EPA的人群服用。鱼肝油软胶囊中含有n-3不饱和脂肪酸虽不是十分丰富，但它还含有丰富维生素A和维生素D[14]，可以促进钙的吸收，适合需要改善视力，促进视网膜和大脑发育，帮助钙吸收的群体服用[15]。藻油DHA软胶囊中DHA含量很高，几乎不含EPA，适合以健脑、增强记忆力和提高视力为目的的婴幼儿、青少年、孕妇等群体服用[16]。世界卫生组织(WHO)对孕期及哺乳期妇女建议EPA与DHA平均总摄入量不低于300 mg/d，其中DHA平均摄入量应为200 mg/d；对婴幼儿建议EPA与DHA的适宜摄入量为100～150 mg/d；对健康人EPA与DHA可接受的摄入量范围为0.25～2 g/d[17]。同时应注意摄入量，摄入过多人体可能会产生不良反应[18-20]。

采用本研究的气相色谱检测方法能够准确检测出海洋鱼油软胶囊中的脂肪酸组成及比率，且重现性和稳定性都良好。本研究结果表明，海洋鱼油软胶囊中n-3不饱和脂肪酸质量分数为22.5%～34.9%，n-6与n-3 PUFAs比率约为0～0.2，EPA与DHA的比率约为0.8～1.6；深海鱼油软胶囊中n-3不饱和脂肪酸质量分数较高，为35.6%～55.7%，n-6与n-3 PUFAs的比率约为0.1～0.2，EPA与DHA的比率约为1.3～1.9；鱼肝油软胶囊中n-3不饱和脂肪酸含量比鱼油软胶囊和深海鱼油软胶囊中的质量分数低，约为21.2%～24.7%；藻油DHA软胶囊中脂肪酸组成种类较少，n-3不饱和脂肪酸质量分数为34.6%～45.3%，主要为DHA，EPA含量极少。由此可以发现，鱼油软胶囊1、深海鱼油软胶囊3、鱼肝油软胶囊4这3个样品不符合各自鱼油的脂肪酸组成，可能掺假或是劣质鱼油。

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