天麻缓释片的制备

李 菲， 王建筑， 毕研平， 郝吉福， 郭丰广， 张羽璇

(泰山医学院药学院，山东 泰安271016)

天麻是兰科植物天麻Gastrodia elata B1. 的干燥块茎，具有息风止痉，平抑肝阳，祛风通络之功效。天麻的主要有效成分为天麻素，具有镇静、安眠和镇痛等中枢抑制作用，天麻素还有抗炎、抗衰老、改善学习记忆力、抗惊厥等多种生物活性［1-2］。目前，临床上主要用于治疗神经衰弱、血管神经性头痛、神经衰弱综合征和恢复脑功能等［3］。目前的天麻素片每日给药3 次，而对于治疗慢性疾病的药物，适合制成缓释制剂，减少给药次数，提高患者用药的顺应性。同时，天麻素口服吸收和消除速度都较快，体内半衰期约为3 ～4 h［4-5］，所以制成缓释片通过控制药物的释放可以延长药物的作用时间并降低药物在体内浓度的波动性。

本实验采用权重转换方程计算缓释片2、4、10 h释放度的得分，以3 个时间点的得分和为评分指标优化处方，制备了能够持续12 h 释药的天麻缓释片，并对其释药动力学进行了研究。

1 材料与仪器

天麻提取物(GTE)采用乙醇回流提取，大孔树脂纯化制备，含天麻素量为28.93%;天麻素标准品(上海融禾医药科技有限公司，批号110120，纯度＞98%);十八醇(天津市科密欧化学试剂开发中心，批号20040301);乙基纤维素(中国医药集团上海化学试剂公司，批号F000128);聚丙烯酸树脂(Eudragit L30D-55)(德国EVONIK 公司);羟丙基甲基纤维素(HPMCK15M，上海昌为医药辅料技术有限公司)。

岛津LC-10A VP Plus 高效液相色谱仪(日本岛津);ZP10 旋转式压片机(上海信源制药机械有限公司);ZRS-8G 智能溶出实验仪(天津市天大天发科技有限公司);KQ-250DB 型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。

2 方法与结果

2.1 测定方法的建立

2.1.1 色 谱 条 件［6］Diamonsil C18色 谱 柱(250 mm × 4.6 mm，5 μm);流动相为乙腈-水(5 ∶95);检测波长220 nm;体积流量1 mL/min;柱温室温;进样量20 μL。在上述色谱条件下，天麻素和其他组分达到了完全分离，保留时间约为6.7 min，见图1。

图1 空白辅料(A)、对照品(B)和样品(C)的高效液相色谱图Fig.1 HPLC chromatograms of excipients (A)，gastrodin reference substance(B)and gastrodin sample (C)

2.1.2 标准曲线的制备 精密称取天麻素对照品8.0 mg，置50 mL 量瓶中，加乙腈-水(5 ∶95)溶解并稀释至刻度，摇匀，即得160 μg/mL 的对照品溶液。精密量取对照品溶液适量置10 mL 量瓶中，分别用0.1 mol/L 盐酸和pH 6.8 磷酸盐缓冲液稀释至刻度，摇匀，制成质量浓度为2.0、4.0、8.0、16.0、32.0、64.0 μg/mL 的系列标准溶液，进行HPLC 测定。以峰面积(Y)对质量浓度(X)进行回归，得天麻素在0.1 mol/L 盐酸溶液中的标准曲线方程Y =34 919X +38 212，r =0.999 2，在pH 6.8 磷酸盐缓冲液中的标准曲线为Y =34 804X+37 527，r=0.999 0。结果表明，天麻素在2.0 ～64 μg/mL内线性关系良好。

2.2 释放度测定方法 按照《中国药典》2010 版附录XD［7］中有关篮法的规定进行，转速100 r/min，温度37 ℃，在750 mL 0.1 mol/L 盐酸中测定2 h 后，加入0.2 mol/L 磷酸钠溶液250 mL，使介质转变为pH 6.8 磷酸缓冲液，继续测定，分别于1、2、4、6、8、10、12 h 取样5 mL，0.45 μm微孔滤膜过滤，同时补充5mL 介质，取续滤液20 μL进行HPLC 测定，根据标准曲线计算浓度，求出累积释放度。

2.3 缓释片的制备

2.3.1 制备工艺 将天麻提取物过80 目筛，取处方量GTE、HPMCK15M、乳糖、阻滞剂，混合均匀，加适量10%淀粉浆制软材，过14 目筛制粒，60 ℃干燥，14 目筛整粒，加1%硬脂酸镁，混匀，ZP10 旋转式压片机压片，制成片重300 mg 缓释片，每片含天麻素20 mg，硬度75 N。

2.3.2 处方优化标准 采用综合评分法为评价指标。设定2、4、10 h 释放度范围、释放度理想值及权重转换方程见表1［8］(释放度超出上述范围的分值定为0 分)，3 个时间点的得分之和越接近100的处方越理想。处方组成和得分见表2。初定处方1 制备的缓释片2 h 后释药偏慢，可能是由于随着时间延长，缓释片周围形成的凝胶层变厚，药物扩散时间延长。根据权重转换方程计算该处方得分53.3，说明处方不理想。在此基础上，将HPMC用量调整为45%，考虑加入阻滞剂调整缓释片的释药速度。

表1 权重转换方程［3］Tab.1 Equations for calculating transformation

表2 各处方组成和评分结果Tab.2 Components and scores of each formulation

2.3.3 阻滞剂种类的筛选 初定处方1 制备的缓释片2 h 后释药偏慢，在此基础上，将HPMC 用量调整为45%，考虑加入适量的阻滞剂调整缓释片的释药速度。选择肠溶性聚丙烯酸树脂Eudragit L30D-55、乙基纤维素、十八醇3 种阻滞剂，按照“2.3.1”项制备缓释片。处方组成和得分见表2，分别为处方2、处方3 和处方4。将释放度和时间用Ritger-Peppas 方程拟合，结果见表3。

表3 不同种类阻滞剂缓释片的Ritger-Peppas 方程拟合结果Tab.3 Ritger-Peppas equation fitting of tablets containing different types of retardants

表3 结果表明，加入阻滞剂的缓释片Peppas方程中的释药形态参数n 值减小，其中以十八醇为阻滞剂的缓释片n 值最小，说明药物的扩散速度增加，从而达到了适当提高释药速度的目的。

各处方缓释片的释药曲线见图2，得分见表2。由表2 可知处方4 得分最高，说明阻滞剂使用十八醇较其他两种缓释效果较好，所以选择十八醇作为天麻缓释片的阻滞剂。

2.3.4 阻滞剂用量的筛选 采用十八醇作为阻滞剂，用量分别为6.6%、10%、13.4%，按照“2.3.1”项制备缓释片，考察阻滞剂用量对缓释片体外释放的影响。处方组成和得分见表2，分别为处方5、处方4 和处方6，释药曲线见图3。结果表明，缓释片的释药速度随十八醇用量的增加而降低。由表2 可知，处方4 得分最高，即十八醇用量为10% 时缓释效果恰当，所以选择十八醇用量10%。

图2 不同种类阻滞剂对缓释片药物释放的影响(n=3)Fig.2 Effect of different types of retardants on drug release (n=3)

图3 阻滞剂用量对缓释片药物释放的影响(n=3)Fig.3 Effect of different concentrations of retardant (octadecanol)on drug release (n=3)

将处方1、4、5、6 缓释片的释放度和时间用释药模型进行拟合，结果见表4。处方1 制备的缓释片释药动力学符合一级动力学方程，处方4、5、6 制备的缓释片释药动力学符合Higuchi 方程。随着十八醇用量的增加，Peppas 方程中的释药形态参数n 值增加，说明药物的扩散速度减小。十八醇的加入起到了阻滞天麻素在骨架结构中扩散出来的作用，也改变了缓释片的释药动力学。

表4 不同处方的缓释片释药模型的拟合结果Tab.4 Release model fitting of sustained-release tablets of different formulations

2.4 验证实验 由表2 可知，处方4 得分最高，即优化处方为:GTE67.5 mg，HPMCK15M 135 mg，十八醇30 mg，乳糖64.5 mg，10%淀粉浆适量，硬脂酸镁1%，按照“2.3.1”项制3 批缓释片，按照“2.2”项测定缓释片的释放度，结果见表5。

表5 天麻缓释片体外释放度(n=5)Tab.5 Accumulative dissolution ratio of Gastrodia Rhizoma Extract Sustained-release Tablets in vitro. (n=5)

采用相似因子法f2判断缓释片体外释放行为的相似程度，公式如下:

式中:n 为取样次数，Rt为t 时间参比样品释放百分率，Tt为t 时间受检样品的释放百分率，Wi为权重因子。通常认为，50≤f2≤100 则表示两条释放曲线是相似的，3 个批次120530 (a)、120601(b)、120603 (c)间f2值分别为ab =91.7、bc =86.2、ac=96.5，表明该处方与制备工艺重现性良好。在2 h、4 h、10 h 的释放度与理想释放度值30%、50%、85%接近，经权重转换方程计算总分为80。

将释放度和时间用释药模型进行拟合，结果见表6。

表6 天麻缓释片释药模型的拟合Tab.6 Release model fitting of Gastrodia Rhizoma Extract sustained-release Tablets

由表6 可见，Peppas 方程拟合后，释药形态参数n =0.526 (0.45 ＜n ＜0.89)，说明药物的释放机制为药物扩散和骨架溶蚀的协同作用［9］。Higuchi 方程拟合的相关系数最大，说明制备的天麻缓释片的释药动力学更符合Higuchi 方程，释药机制以药物的扩散为主。

3 讨论

持续12 h 释药的缓释片的释放度应当满足以下基本要求，即2 h 释药约30%，没有突释;6 h释药约50%，释药平稳;12 h 释药大于80%，释药基本完全。但是，以50%HPMC 为骨架材料制备的天麻亲水凝胶骨架片处方得分较低，说明释药速度不够理想。在此基础上，将HPMC 用量调整为45%，考虑加入适量的阻滞剂进行调整。结果表明，经Peppas 方程拟合后，调整处方后的缓释片释药形态参数n 减小，说明药物的扩散速度增加，从而达到了适当提高释药速度的目的。因此，对于水溶性药物的亲水凝胶骨架片而言，释药机制主要是药物扩散通过水化的凝胶层，如果药物分子扩散速度较快，那么考虑加入适当的阻滞剂延缓药物的扩散，从而获得适当的释药速度是可行的。选择肠溶性聚丙烯酸树脂、乙基纤维素、十八醇3 种阻滞剂，其中十八醇延缓天麻素释放的阻滞能力最强，这与文献［10］得出的结论十八醇对水溶性药物的阻滞作用最强是一致的。在筛选处方的过程中，本文采用了文献［8］的综合评分法，认为每个指标的权重系数与其值有关，即当指标不等于理想值时，其权重系数应该降低，因此应使用权重转换方程计算各指标的得分，然后以各指标总分为评分标准更合理。

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