谷赤清肝明目片的提取工艺优选研究

杨 健 李 芳 王卫锋 西安市中医医院（西安710001）

谷赤清肝明目片由西安市中医医院临床常用传统中药汤剂改变剂型制得，处方由谷精草、赤芍、木贼、青葙子、决明子、金银花、防风等药物组成，功能清肝泻火，明目，用于肝火上炎引起的目赤肿痛。该制剂中谷精草、赤芍、木贼、金银花、防风等药材以水提取方式入药。本文将采用正交试验法对该制剂的水提取工艺进行优化，确保谷赤清肝明目片的质量和疗效。

1 仪器与试药

1.1 仪器 Waters高效液相色谱仪（美国）；AS10200A型超声清洗器（昆山超声仪器有限公司）；塞多利斯BP211D 型电子天平（德国Sartorius）。

1.2 试药 芍药苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号：10736－200833），试验所用中药材由西安市中医医院药剂科提供；液相用试剂为色谱纯；水为超纯水；其它试剂为分析纯。

2 方法与结果 2.1 正交试验设计 处方中谷精草、赤芍、木贼、青葙子、决明子、金银花、防风等药材采用水提取处理，以芍药苷和干膏得率为指标对提取次数、提取时间、加水量三个因素进行考察，根据预试验的结果各选择三个水平，采用正交表安排试验。因素水平表见表1。

表1 谷赤清肝明目片提取工艺因素水平表

2.2 正交试验提取液的制备 取水提工艺的药材，按处方比例量平行称取9份，每份105g，按正交实验安排表进行提取，合并提取液。将上述提取液浓缩，定容至一定体积，即得样品溶液。

2.3 干膏得率的测定 精密量取“2.1”项下各正交试验提取液100mL，水浴蒸干，残渣于105℃干燥3h，取出，置于干燥器中放置30min，称重，计算干膏得率。

2.4 芍药苷含量测定［1～3］2.4.1 色谱条件 色谱柱：C18色谱柱（Diamosil 4.6×250mm，5μm）；流动相：乙腈－0.1%磷酸溶液（15∶85）；流速1.0mL·min－1；柱温：室温；检测波长230nm；进样量10μL。

2.4.2 测定方法精密吸取正交试验各提取液2mL，加甲醇定容至10mL，摇匀，滤过，用微孔滤膜（0.45μm）滤过，作为供试品溶液。另精密称取芍药苷对照品1.81mg，加甲醇制成每1mL含0.0724mg的溶液作为对照品溶液。精密吸取对照品溶液及供试品溶液各10μL，按“2.4.1”项下色谱条件测定，计算。

2.5 试验结果及分析 试验结果见表2，方差分析结果见表3。

表2 水提正交试验表及结果

表3 水提方差分析表

由表2、表3可知，影响提取效果因素顺序为提取次数（A）＞加水量（C）＞提取时间（B）；其中提取次数对提取效果有显著影响，提取时间、加水量长短几无影响。综合以上分析，确定最佳水提取工艺为A3B2C3，即药材加12倍量水，提取三次，第一次1.5h，第二、三次各1.0h。

2.6 最佳提取工艺的验证试验 按处方量称取提取药材，共3份，每份105g，按优选的工艺条件提取，测定芍药苷含量和干膏得率。结果见表4。

表4 最佳工艺验证试验

表4 结果表明，优选出的水提取工艺条件稳定、合理、可行。

3 讨 论 3.1 在对水提工艺条件进行优选时，我们同时测定了芍药苷的含量和干膏得率，并给予不同的加权系数对试验结果进行处理，以综合评分进行评价，这比采取单一指标对提取工艺进行优选更加合理和科学。

3.2 正交试验优选的水提取工艺条件经过验证，表明是可行的，可为谷赤清肝明目片的生产和临床应用提供试验依据。

［1］ 国家药典委员会.中国药典［S］.一部.北京：人民卫生出版社，2010：150.

［2］ 于文静，李井涛.HPLC 法测定少腹逐瘀丸中芍药苷的含量［J］.中国药事，2012，26（3）：285－287.

［3］ 陈 昕，高 军，张大军，等.HPLC 法测定消乳癖颗粒中芍药苷的含量［J］.中国药师，2012，15（3）：372－374.