五加参冲剂（浸膏粉）毒理学安全性评价试验研究Ⅱ＊

朱爱华 杨钧 张艺芳 秦永刚 周新民 何爱武

陕西中药研究所（咸阳712000）

五加参冲剂是在继承祖国传统养生理论的基础上，结合现代医药学研究成果，选用陕西地产五加—倒卵叶五加茎为主要原料，配以麦冬、五味子研制而成的具有抗疲劳作用的保健功能食品。该产品可明显地延长小鼠游泳时间，降低血清尿素氮、乳酸含量，提高肝糖原含量，消除疲劳状态，具有明显地抗疲劳作用。本研究是在五加参冲剂的经口急性毒性、30d喂养试验毒性、Ames试验、小鼠骨髓细胞微核试验的基础上，采用小鼠精子畸形试验、传统致畸试验的方法，进一步研究五加参冲剂的毒理学安全性。

1 材 料 1.1 样 品 五加参冲剂（浸膏粉）内容物呈棕色细粉状，1g浸膏粉相当于成品3g，由陕西利威尔制药有限公司提供。用蒸馏水配制各剂量浓度。人体推荐成品最大用量14g／人／d。

1.2 试验动物 SD 大鼠和昆明种小鼠由西安交通大学医学院实验动物中心提供，许可证号：SCXK（陕）2007－001。

2 方 法［1］2.1 小鼠精子畸形试验 将雄性小鼠分为5组，每组5 只小鼠。即五加参冲剂（浸膏粉）4.0g／kg、8.0g／kg和16.0g／kg3个剂量组，另设阴性对照组（蒸馏水）和阳性对照组（丝裂霉素C1.5mg／kg）共5组，连续5d分别灌胃给予受试物。按照卫生部保健食品检验与评价技术规范小鼠精子畸形试验试验方法，在末次灌胃后30d，处死小鼠，取其副睾放入生理盐水中剪碎、过滤，然后用滤液涂片、染色、镜检，计数精子畸形数，并计算精子畸形发生率（‰），结果进行统计分析（χ2检验）。

2.2 传统致畸试验 将五加参冲剂（浸膏粉）设计为2.75g／kg、5.50g／kg和11.0g／kg3个剂量组，另设溶剂对照组（蒸馏水），每组15只孕鼠（按查得阴栓计），按照卫生部保健食品检验与评价技术规范致畸试验方法进行试验。于孕第7～16d灌胃给予受试物，每天1次，第20d解剖取胎鼠，进行外观检查后分别进行胎鼠骨骼、内脏前处理，再观察与统计。

3 结 果 3.1小鼠精子畸形试验 各剂量组与溶剂对照组精子畸形率间差异无显著性（P ﹥0.05）；阳性对照组与溶剂对照组精子畸形率间差异有高度显著性（P＜0.01）。本次试验结果显示五加参冲剂（浸膏粉）在4.0g／kg～16.0g／kg剂量范围内对小鼠生殖细胞未见损害作用。

3.2 传统致畸试验（大鼠） 3.2.1对孕鼠体重的影响：

表1 五加参冲剂（浸膏粉）精子畸形试验结果统计（±s）

表1 五加参冲剂（浸膏粉）精子畸形试验结果统计（±s）

注：卡方检验；与溶剂对照组比较△P＜0.05，▲P＜0.01

组 别（g／kg）n精子计数畸形精子数精子畸形率（%）4.0 5 1000×5 18.6±3.85 1.86五加参冲剂8.0 5 1000×5 20.2±6.69 2.02五加参冲剂16.00 5 1000×5 22.4±4.67 2.24阴性对照－5 1000×5 19.0±3.81 1.90丝裂霉素C阳性对照1.5mg 5 1000×5 116.0±20.0▲ 11.60五加参冲剂▲

表2 五加参冲剂（浸膏粉）对孕鼠体重的影响（g）（±s）

表2 五加参冲剂（浸膏粉）对孕鼠体重的影响（g）（±s）

注：组间进行t检验，与溶剂对照组比较△P＜0.05，▲P＜0.01

组 别剂量（g／kg）孕鼠数（n）妊娠天数（d）0 7 12 16 20总增重（g）.82 314±38.51 95.4±34.20五加参冲剂 5.50 13 196±7.37 227±10.52 227±10.52 279±12.03 305±13.00 109.2±16.71五加参冲剂 11.0 12 219±19.99 247±14.86 262±15.42 292±29.63 310±25.23 90.8±28.73溶剂对照－ 12 215±20.66 242±17.20 260±17.55 283±18.54 五加参冲剂 2.75 13 242±25.29 254±34.55 254±34.55 282±36 310±22.21 94.5±19.81

表2中，各实验组孕鼠总增重与对照组孕鼠总增重值比较，经t检验，结果t值均小于2.074，其差异均无显著性（P ﹥0.05）。

3.2.2 对胎鼠的影响：

表3 五加参冲剂（浸膏粉）对大鼠胎鼠的影响（±s）

表3 五加参冲剂（浸膏粉）对大鼠胎鼠的影响（±s）

注：组间进行t检验，与溶剂对照组比较△P＜0.05，▲P＜0.01

组别剂量（g／kg）受精鼠（n）受孕鼠（n）胎鼠数（n）平均胎仔数（n）胎仔平均重（g）吸收胎（n）死胎数（n）2.75 16 13 140 10.8±2.42 4.11±0.475 6 0五加参冲剂5.50 16 13 140 10.8±1.88 4.09±0.375 4 0五加参冲剂11.00 16 13 136 11.3±1.37 4.05±0.527 3 0溶剂对照五加参冲剂－16 13 136 11.4±2.75 4.04±0.472 6 0

表4 五加参冲剂（浸膏粉）对胎鼠骨骼的影响

表5 五加参冲剂（浸膏粉）对胎鼠内脏的影响

从表2～5可见，各剂量组胎鼠一般状况、骨骼及内脏检查与溶剂对照组比较均无明显异常变化。

试验期各剂量组孕鼠均未见中毒表现。

3 讨 论 五加参冲剂是由倒卵叶五加、麦冬、五味子组成的复方制剂，急性毒性试验、大鼠30d喂养试验、小鼠骨髓细胞微核试验及Ames试验均未发现毒性作用［2］，本次小鼠精子畸形试验为阴性结果，大鼠致畸试验未发现致畸作用，说明五加参冲剂对实验动物的各项毒理学指标均未产生毒理作用，根据《食品安全性毒理学评价程序和方法》［3］，五加参冲剂符合食用要求，安全无毒。

［1］ 卫生部卫生法制与监督司.保健食品检验与评价技术规范［S］.北京：中华人民共和国卫生部，2003：177－224.

［2］ 朱爱华，张艺芳，杨 钧，等.五加参冲剂毒理学安全性评价试验研究［J］.陕西中医，2013，34（4）：489.

［3］ 中华人民共和国卫生部.食品安全性毒理学评价程序及评价方法［S］.北京，中国标准出版社，中华人民共和国国家标准GB15193.1－21－2003.