泰山盘石散对米非司酮诱导小鼠流产的保胎效果

耿梅英，苑方重，钟秀会

（河北农业大学中兽医学院，河北 保定071001）

正常的妊娠期间母体和胎儿的共同作用包含了复杂的免疫机制。自然条件下，胚胎着床失败是由于母体免疫反应引起的早期胚胎丢失，以及反复自然流产（recurrent spontaneous abortion，RSA）等引起的妊娠终止在所有的妊娠失败中占据很大的比例。

中医称流产为胎漏、胎动不安和滑胎，针对这种症状的治疗原则是保胎。自《神农本草经》首载桑寄生、阿胶、白胶、黑雌鸡为安胎药［1］，后经不断发展，中医对安胎药物的使用已经较为成熟。此外，中医在治疗胎动不安时还从不同的脏腑论治，认为流产多因脾肾亏损、冲任不固、气血两虚所致。根据这种理论，不少研究者认为对流产治疗应采取补脾肾、固冲任、调气血，从而有利于保胎［2－3］，并分别提出补肾保胎、升阳举陷，补脾安胎、清肝固元等治疗措施，并取得了较好的效果。

《中华人民共和国兽药典》二部收载了有气血双补作用的方剂－泰山盘石散。泰山盘石散方中包含党参 、黄芪、当归等多味中药。该方剂在临床多年应用，具有很好的保胎效果。但是，如何从现代医学角度认识该方剂的保胎作用，研究资料尚属少见。

本试验选择泰山盘石散预处理试验小鼠，观察泰山盘石散对米非司酮诱导流产作用的抑制效果，探讨试验中选用中药方剂的保胎作用及可能的作用机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物 清洁级昆明种9周龄未经产仔母鼠和10周龄公鼠，雌鼠体重23～30g，雄鼠体重30～35g。购自河北省实验动物中心。常规饲养，自由采食和饮水。

1.2 试验药品与试剂 米非司酮（RU486），由美国Sigma公司生产。泰山盘石散由党参30g，黄芪30 g，当归30g，续断30g，黄芩30g，川芎15g，白芍30g，熟地黄45g，白术30g，砂仁15g，甘草（炙）12 g组成。

1.3 动物分组 将怀孕小鼠随机分为3组（见表1）。

表1 试验动物分组和处理

1.4 胚胎吸收率（死亡率）和流产率计算 孕鼠均于孕8d颈椎脱臼处死小鼠，打开腹腔，暴露子宫，观察子宫生长情况，记录胚胎着床数及流产数。取一侧子宫用Bouin氏液固定作石蜡切片用。

按下列公式计算试验各组的胚胎吸收率、流产率：

胚胎吸收率＝被吸收的胚胎数/（被吸收的胚胎数＋正常胚胎数）×100%；

流产率＝发生流产的母鼠数/试验组母鼠总数×100%。

2 结果

2.1 泰山盘石散的保胎作用 A组10只孕鼠在孕8d剖杀，有2只流产，自然流产率为20%，剖检看见，胚胎正常或基本正常，仅有部分胚胎死亡、吸收变小。B组10只孕鼠在孕8d剖杀，有4只死胎全部排出，子宫内已无胎儿，其余6只母鼠子宫内胎儿已全部死亡，大部分胚胎已吸收，呈紫黑色，胚胎间或有血凝块，子宫宫腔膨大，壁明显增厚，子宫长度明显缩短，流产率为100%。C组10只孕鼠在孕8 d剖杀。有5只发生流产，流产率为50%。发生流产的各组动物在剖检时可见，子宫系膜充血严重，胚胎基本正常，子宫腔偶然看见血凝块。

试验结果表明，中药方剂泰山盘石散（C组）能有效对抗RU486诱导的小鼠流产尽管保胎效果还没有达到正常水平（A组，自然流产率20%），与正常对照组比较，差异极显著（P＜0.01），而胚胎吸收率也相对较高，但与单纯使用米非司酮处理的对照（B组）相比较，试验动物的流产率从100%下降到50%，胚胎吸收率也出现显著下降，见表2。

表2 不同处理组的妊娠

2.2 试验小鼠子宫组织学变化 H.E.染色后组织学观察，正常妊娠小鼠子宫组织切片可见子宫内膜蜕膜化，间质蜕膜化，内膜增厚，黏膜上皮完整，腺体发达，可见大片蜕膜组织，蜕膜细胞散在排列，形态不规则，蜕膜细胞核仁明显，局部有充血，有少量淋巴细胞聚集，间质疏松，有散在的不规则排列的胶原纤维，但无出血、坏死、脱落等（见中插彩版图1）。

RU486诱导流产小鼠子宫内膜发育与对照组相比有较大变化，主要表现为子宫内膜发育不良，部分子宫内膜可见腺体与间质发育不同步，间质细胞部分蜕膜样变，可见炎性细胞浸润，蜕膜组织呈小灶性变性、坏死，少数细胞核固缩、破碎，细胞质不均匀及空泡变性，但正常组织细胞结构仍存在，腺体小，数目少，分泌不足，呈单层立方上皮，腺腔轻度扩张，间质紧密，间质内血窦少，血管扩张不明显（见中插彩版图2）。泰山盘石散组，子宫组织完整程度介于正常对照组和RU486组之间，受损子宫内膜结构得到不同程度的修复（见中插彩版图3）。

3 讨论

本试验中，利用RU486复制流产模型，用以检测中药方剂的保胎效果。试验中，在孕7d各颈部注射RU486 0.1mL/只（0.025μg）以后，试验模型组小鼠的流产率达到了100%，而同期对照组的小鼠的自然流产率仅为20%，两者之间存在着显著的差异，同时也证明使用RU486复制小鼠的流产模型是成功的。

相关资料报道，哺乳动物着床后的胚胎很容易发生死亡，大约有40%～60%不能发育到正常分娩，其中早期胚胎丢失约占67%，这在人和家畜均如此［4］，甚至同一母体出现2次或2次以上的反复自然流产（RSA）［5］，是一种非常常见的现象，它可以引起怀孕早期的胚胎丢失。中医称流产为胎漏、胎动不安和滑胎，针对这种症状的治疗原则是保胎。

在使用RU486成功复制出小鼠的流产模型后，本试验使用中药方剂泰山盘石散，拮抗RU486的流产作用，探讨常用保胎中药方剂的临床作用，并探明其可能的保胎机制。

本试验结果显示，中药方剂泰山盘石散能有效对抗RU486诱导的小鼠流产。在应用中药后，试验动物模型的流产率从100%下降到50%，与单纯使用米非司酮处理的流产模型（B组）差异极显著（P＜0.01），胚胎吸收率也出现显著下降，由B组的48.57%下降到5.08%，与B组比较，差异极显著（P＜0.01）；但应用药物预处理组的中药保胎效果还没有达到正常的妊娠成功率水平（A组，自然流产率20%），与正常对照组比较，差异极显著（P＜0.01），而胚胎吸收率也相对较高，与A组对比，差异极显著 （C组，P＜0.01）。

结果证实，泰山盘石散有显著的保胎效果，可以有效提高怀孕小鼠的妊娠成功率，对使用流产药物引起的小鼠流产也有一定的抑制和拮抗作用。

［1］ 张承烈.安胎中药研究进展［J］.浙江中医学院学报，2001，25（4）：67－68.

［2］ 王汉章.石菖蒲性味功效及主治今昔考［J］.江西中医学院学报，1997，9（2）：12.

［3］ 钟秀会，周占祥，孙秉贵，等.黄芩白术对LPS诱导流产小鼠的保胎作用及子宫内TNF－α含量的影响［J］.畜牧兽医学报，2000，31（5）：430－435.

［4］ López－Gatius F，Almería S，Donofrio G，etal.Protection against abortion linked to gamma interferon production in pregnant dairy cows naturally infected with Neospora caninum ［J］.Theriogenology，2007（68）：1067－1073.

［5］ Dowdell K C，Cua D J，Kirkman E，etal.NK cells regulate CD4responses prior to antigen encounter［J］.J Immunology，2003，171（1）：234－239.