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银丹心脑通软胶囊对动脉硬化大鼠斑块及高敏C反应蛋白的影响

2013-11-22张荣品李玉芝张敬雅高翠华张敬朋

中西医结合心脑血管病杂志 2013年1期
关键词:银丹心脑软胶囊

张荣品,李玉芝,张敬雅,高翠华,冯 谨,张敬朋

观察银丹心脑通软胶囊对动脉硬化(AS)大鼠斑块面积及高敏C反应蛋白含量的影响,探讨其抗动脉硬化的作用机制,为临床合理应用银丹心脑通软胶囊预防和治疗动脉粥样硬化性疾病提供依据。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验动物及饲料 雄性ApoE小鼠,C57BL/6J品系,10周龄,体重26g~28g,购自北京大学实验动物中心。无菌高脂高胆固醇饲料购自中国医学科学院实验动物研究所,含21%脂肪和0.15%胆固醇。

1.1.2 实验药品及试剂 银丹心脑通软胶囊:贵州百灵企业集团制药股份有限公司;批号:Z19980015。辛伐他汀:杭州默沙东制药有限公司;批号H19990366。胆固醇(TC)检测试剂盒:北京中生北控生物科技股份有限公司;批号010617。三酰甘油(TG)检测试剂盒:北京中生北控生物科技股份有限公司;批号015626。小鼠高敏C反应蛋白(hs-CRP)ELISA检测试剂盒:尚柏生物医学技术有限公司;批号2B901。戊巴比妥钠:北京盛旭百川科技有限公司;批号090234。

1.2 实验方法

1.2.1 动物分组及给药 雄性ApoE小鼠饲养在SPF动物房中。颈动脉套环实验前两周给予高脂高胆固醇饲料(21%脂肪+0.15%胆固醇)饲养直至实验结束。除对照组外,其余各组ApoE小鼠均于实验初期行颈动脉套管术以诱发颈动脉粥样硬化病变。实验分5组,每组12只,对照组给予普通饲料喂养,其余各组均给予高脂饲料。辛伐他汀于颈动脉套环术后按人体等效剂量给药,为9.1mg/kg。银丹心脑通于颈动脉套环术后给予,按人体等效剂量的1倍、2倍、4倍给药。给药周期为4周。1.2.2 术前准备 将0.3mm内径硅胶管纵向剖开,剪成0.5 cm长的小段,浸泡在95%乙醇中备用。高压灭菌消毒手术用器械、棉球、手术针线等。

1.2.3 手术过程 ApoE-/-小鼠腹腔注射50mg/kg戊巴比妥钠,消毒颈部及周围皮肤,除毛;手术剪剪开皮肤,纵向钝性分离颈部肌群,分离右颈总动脉,小心将准备好的硅胶管套在右颈总动脉上,并用三根0号线分别结扎硅胶管的上、中、下端;术毕,将手术部位组织恢复,缝合颈部皮肤。

1.3 动物采血及组织取材 最后一次注射后24h,小鼠摘眼球取血,3 500r/min离心10min,取血清,-80℃冻存待测。手术剪剪开胸腔,暴露心脏,用一次性输液器针头刺入左心室,剪开右心房,取右颈总动脉置于10%中性缓冲甲醛固定,石蜡包埋,连续切片。

1.4 统计学处理 计量资料以均数±标准差(x±s)表示。应用SPSS 17.0软件处理,采用单因素方差分析(One-Way ANOVA),两组用t检验。

2 结 果

2.1 银丹心脑通软胶囊对小鼠血清脂质及hs-CRP的影响与对照组相比,模型组可明显升高血清总胆固醇水平;阳性药可明显降低血清总胆固醇水平;银丹心脑通各组均可以明显降低血清总胆固醇水平,但各给药组与对照组相比TG水平没有明显变化。与对照组相比,模型组炎症因子表达显著升高;辛伐他汀和银丹心脑通低、中剂量组对hs-CRP的表达显著下降(P<0.05)。详见表1。

表1 银丹心脑通软胶囊对小鼠血清脂质及hs-CRP的影响(x±s)

2.2 银丹心脑通软胶囊对动脉硬化小鼠斑块面积的影响 右侧颈动脉套环6周后,模型对照组小鼠颈动脉出现明显的动脉粥样硬化斑块。银丹心脑通低剂量组与模型对照组相比,斑块面积没有减少,中高剂量组与阳性药组;模型组与对照组相比均能明显较小动脉硬化斑块面积(P<0.05)。详见表2。

表2 银丹心脑通软胶囊对小鼠斑块面积的影响(x±s)

3 讨 论

动脉粥样硬化性疾病是严重危害人类健康的一大类疾病,被称为发达国家的“头号杀手”,在发展中国家发病率也逐年升高。世界卫生组织预测,在世界范围内的传染性疾病病死率得到有效控制之后,到2020年心血管疾病将成为全世界第一死因。AS是多因素疾病,病因复杂,近年来炎症在其发生和发展过程中重要作用越来越被人们关注[1]。

ApoE-/-小鼠是目前研究动脉粥样硬化性疾病最为常用的动物模型之一,可以通过高脂饮食诱发小鼠体内高胆固醇血症和动脉粥样硬化[2]。颈动脉套环可以在保持内皮结构完整性同时快速、定点诱导AS的发生。高脂饮食饲养与颈动脉套环相结合可以促进更多动脉粥样硬化性斑块的快速形成,并且所形成的斑块在斑块形态、内皮表达形式和发病机制方面具有与人类斑块更相似的优点。

多项研究显示,hs-CRP作为目前最可靠的AS炎症标志物,与斑块的进展密切相关[3],hs-CRP对急性冠状动脉综合征的预后和对“健康”成人将来冠状动脉事件具有预报作用[4]。

银丹心脑通胶囊主要成分有银杏叶、丹参、灯盏细辛、三七、绞股蓝、大蒜、山楂、天然冰片八味苗药,具有活血化瘀、行气止痛、消食化滞的功能。现代药理研究显示,具有快速改善心脑血管病引起的相关症状,同时又兼顾了对心脑血管病重要危险因子血脂的调理。本实验结果显示,银丹心脑通软胶囊具有抑制动脉硬化斑块进展的作用,且呈剂量依赖性,其作用的发挥不仅在于银丹心脑通能显著降低血脂,更重要的是它可抑制炎症因子hs-CRP的释放,这也为银丹心脑通软胶囊的临床应用提供了实验依据。

[1] Ross R.Atherosclerosis-an inflammatory disease[J].N EngI J Med,1999,34.115-126.

[2] Baetta R,Silva F,Comparato C,et al.Perivascular carotid collar placement induces neointima formation and outward arterial remodeling in mice independent of apolipoprotein E deficiency or western-type diet feeding[J].Atherosclerosis,2007,195:112-124.

[3] 王卫明.C反应蛋白的研究进展[J].心血管病学进展,2005,26(1):7.

[4] 龚瑞莹,刘明,庞永诚,等.急性冠状动脉综合征患者hs-CRP、血脂和胆红素的临床研究[J].中国医药指南,2011,9(24):275-277.

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