婴幼儿哮喘53例外周血Leptin、Eotaxin、总IgE检测及其临床意义

延安大学附属医院儿科（延安716000） 张慧平 李元霞 庞随军 冯 娜 王春芬

支气管哮喘是由多种细胞和细胞因子共同参与的气道慢性炎症性疾病。近年来，国内外对Leptin、Eotaxin及TIgE与哮喘关系的研究不断深入，但大量临床研究多限于成年人及年长儿童，上述因子对婴幼儿哮喘的确切机制及其相互关系并不完全清楚。本组旨在通过测定婴幼儿哮喘患儿外周血中Leptin、Eotaxin及TIgE的表达，并分析其相互关系，为婴幼儿哮喘的防治提供新的思路。

资料与方法

1 临床资料 观察组选择2010年1月至2011年5月延安大学附属医院儿科门诊就诊或住院的急性发作期婴幼儿哮喘患儿53例，其中男34例，女19例，年龄6～36月，平均24.38±8.38月。均符合2008年中华医学会呼吸病学分会哮喘学会修订的支气管哮喘防治指南中的儿童哮喘诊断标准［1］。哮喘急性发作期患儿给予吸氧、糖皮质激素吸人、支气管舒张剂等对症支持治疗。同时除外并发有呼吸衰竭、心力衰竭的极重度患儿、先天性心脏病、结核感染、支气管异物、全身使用糖皮质激素者及肥胖症者。经正规治疗达临床缓解出院。症状缓解后按GINA方案进行分级治疗，并于我院儿科门诊随诊观察或电话联系。患儿定期随诊，症状、体征消失，并维持3个月以上者为临床缓解期。对照组选择健康儿童42例，其中男28例，女14例，年龄6～36月，平均26.63±2.38月，无个人及家族过敏性疾病，无寄生虫感染史，近3个月无糖皮质激素用药史。

2 标本留取及保存 哮喘组于急性发作期、临床缓解期及健康对照组分别留取空腹静脉血3ml，室温下30min后，用离心机以3000r／min离心5min，取其血清，分装在3个0.5ml经高温消毒的无热原、无内毒素EP管，暂时保存于-200C冰箱，2个月内转移至-700C超低温冰箱保存。

3 标本检测 采用酶联免疫吸附法检验Eotaxin，试剂盒由美国ADL公司生产，上海锐聪实验室设备有限公司提供Eotaxin测定值范围：0～240pg／ml，敏感度：0.1pg／ml。荧光酶联免疫法测定TIgE，试剂盒购自天津新传生物技术有限公司生产。用放射免疫分析法测定Leptin，用λ放射免疫计数仪测量标本的放射性，由专人负责检测，检测仪器为FJ2008-G放射免疫计数仪，Leptin试剂盒购于晶美生物技术有限公司。均按试剂盒说明规范操作，标本采用同一批测定。

结 果

1 婴幼儿哮喘患儿外周血中Leptin、Eotaxin及TIgE的表达 见附表。婴幼儿哮喘患儿急性发作期与临床缓解期及健康对照组血清Leptin、Eotaxin及总IgE水平比较均有显著性差异（P＜0.05）；临床缓解期血清Leptin、Eotaxin及TIgE水平与对照组比较均有显著性差异（P＜0.05）。

附表 婴幼儿哮喘患儿外周血中Leptin、Eotaxin及TIgE的表达（±s）

附表 婴幼儿哮喘患儿外周血中Leptin、Eotaxin及TIgE的表达（±s）

组 别 n Leptin（ng／ml） Eotaxin（pg／ml） TIgE（U／L）哮喘组 急性期 53 13.19±3.85 50.32±15.98 498.88±69.93缓解期 53 6.51±2.24 19.56±6.08 208.19±56.84对照组 42 3.96±2.02 6.72±2.49 49.66±10.51

2 相关性分析 婴幼儿哮喘患儿急性发作期Eotaxin与TIgE成正相关（r＝0.686，P＜0.05）；婴幼儿哮喘患儿临床缓解期Eotaxin与TIgE成正相关（r＝0.770，P＜0.05）；婴幼儿哮喘患儿急性发作期Leptin与Eotaxin（r＝0.125，P＞0.05）、Leptin与TIgE（r＝0.102，P＞0.05）均不相关；婴幼儿哮喘患儿临床缓解期Leptin与Eotaxin（r＝0.127，P＞0.05）、Leptin与TIgE（r＝0.261，P ＞0.05），均不相关。

讨 论

嗜酸细胞（Eosinophil，EOS）是哮喘炎症反应中造成组织损伤和肺功能异常的主要效应细胞，EOS浸润是哮喘的基本病理特征。嗜酸粒细胞趋化因子（Eotaxin）是一种选择性嗜酸性粒细胞（EOS）趋化因子和强有力的激活剂，通过结合EOS表面的受体，趋化EOS招募回气管导致一系列级联反应，引起过敏性炎症损伤的各种呼吸道表现。Eotaxin在气管内皮细胞和上皮细胞上表达［2］，参与哮喘气管的炎症反应。本组结果显示：婴幼儿哮喘患儿急性发作期血清Eotaxin水平明显高于临床缓解期及健康对照组，且临床缓解期血清Eotaxin水平也明显高于健康对照组，与国外文献报道相似［3］，提示血清Eotaxin可能作为炎性因子参与婴幼儿哮喘发病，并且哮喘患儿在临床缓解期气道炎症仍持续存在。Eotaxin对EOS具有特异趋化活性，故从抑制EOS募集的角度探讨哮喘治疗可能成为新的方向。

IgE介导的速发型哮喘及炎症诱导的迟发型哮喘均引起支气管痉挛、气流受阻，而气流受阻是哮喘病理生理改变的核心。近年来虽然哮喘的发病机制有新的发现，但IgE仍是参与哮喘变态反应的主要抗体，哮喘及变态反应性疾病患者多数IgE升高。本组结果显示：哮喘患儿急性发作期血清TIgE水平明显于临床缓解期，急性发作期及临床缓解期血清IgE水平显著高于健康对照组，与国内外研究结果一致［4］。因此，哮喘患儿血清IgE水平的变化与哮喘的病情变化有密切关系，婴幼儿哮喘患儿血IgE的检测可作为观察哮喘的指标之一。

近来研究表明：瘦素（Leptin）可能是哮喘发生的独立危险因素，可能通过BCL-2（Bcell lymphoma／leu-kemia-2，B细胞淋巴瘤／白血病-2）通路，抑制炎症细胞的凋亡，而嗜酸性粒细胞的凋亡障碍亦是近年来提出的支气管哮喘的发病机制之一，喘息儿童中具有高嗜酸性粒细胞血症者是反复喘息发作的危险因素之一［1］。同样是可能发展为支气管哮喘的危险因素，故瘦素是否通过抑制炎症细胞的凋亡参与嗜酸性粒细胞的上调值得关注，但目前未有直接证据表明此点。还有研究指出：瘦素可以通过抑制调节性T细胞的功能而导致哮喘的发生。瘦素除影响炎症细胞外，也与炎症介质的释放密切相关：瘦素可增加白三烯的合成，增加血清特异性IgE，这些炎症因子及炎症介质的上调可能促进炎症细胞的趋化及引起炎症因子瀑布式释放，从而在儿童喘息的气管炎症反应中起到作用。虽然并非所有的喘息儿童都有气管高反应性，但气管的高反应性与持续反复的儿童喘息密切相关［5］。瘦素在哮喘气管炎症发生中起重要作用，气管炎症的发生反过来又引起瘦素产生的增加，从而形成一个恶性循环。而实验表明［6］：给予外源性瘦素可以增强野生型小鼠的气管炎症反应及小鼠气管对乙酰胆碱的反应性，推测瘦素可能参与了气管反应性的调控。本研究结果显示：哮喘患儿急性期血清Leptin水平高于缓解期及对照组，哮喘临床缓解期Leptin水平与对照组比较有显著性差异，与Jang等研究结果相似［7］。表明Leptin可能影响气管功能，增加哮喘发病风险，在哮喘细胞因子的精细网络调节中可能起一定的作用。结合本实验结果考虑哮喘患儿血清Leptin水平的变化是哮喘发作的结果。

哮喘的病因和发病机制相当复杂，细胞因子失衡是导致哮喘患者体内IgE增高的关键。本组结果表明：血清Eotaxin与IgE水平在哮喘急性发作期及临床缓解期均呈正相关关系，与国外研究结论一致［8］。提示哮喘是由多细胞和细胞因子参与的呼吸道慢性炎症性疾病，细胞因子失衡是哮喘的重要表现，Eotaxin与TIgE在哮喘发病中可能彼此之间相互影响，共同参与哮喘的病理生理改变。哮喘的诊断相对更重视症状、体征的价值，本组结果表明：动态观察哮喘患儿血清Eotaxin与TIgE水平，可更全面评价细胞因子在哮喘发病中的作用及相互关系。了解Eotaxin与TIgE之间的关系，有助于探讨哮喘的病理生理机制，对于哮喘的诊断和病情评估有指导性意义，为通过阻断Eotaxin及IgE产生途径治疗哮喘的新思路提供理论依据。

本组结果提示：不论是婴幼儿哮喘患儿急性发作期还是临床缓解期，Leptin与Eotaxin及总IgE无相关性，与目前报道不太一致，研究发现［9］：血清Leptin水平在哮喘儿童中比健康儿童显著升高，哮喘儿童血中IgE与Leptin回归分析仅存在微弱的相关性；Parameswaran等［10］认为 Leptin抑制IL-13诱导的Eotaxin的产生，参与哮喘的发生机制，提示Leptin对Thl／Th2细胞之间平衡的调节尚无一致的结论。但本研究仅对Leptin在婴幼儿哮喘发病中作用做初步探讨，且患儿年龄段在＜3岁，样本含量相对较少，Leptin在婴幼儿哮喘发病中的作用需进一步研究。

［1］中华医学会儿科学分会呼吸学组.儿童支气管哮喘诊断与防治指南［J］.中华儿科杂志，2008，46（10）：745-753.

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［10］Parameswaran N，Katherine R，AdrianF，et al.The Effects of Leptin on airway smooth muscle responses［J］.Am J Respiratory Cell and Molecular Biology，2008，39（1）：475-481.