葛根散对酒精性脂肪肝大鼠肝功能损伤的影响

刘森琴 葛 林

(福建省武夷山市立医院药剂科，福建 武夷山 354300)

近年来由于饮食结构的改变，酒精的滥用和依赖，使酒精性脂肪肝患者发病率呈逐年上升趋势，其预防与治疗已成为中、西医临床研究的重要内容。葛根散出自《儒门事亲》，主治饮酒过度，酒毒内蕴者。本研究拟通过观察葛根汤对酒精性脂肪肝模型大鼠丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBiL)以及肝组织病理改变的影响，为临床应用提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物 Wistar种雄性大鼠100只，体质量180～220 g，购自福建医科大学动物实验中心，动物合格证号：SCX(闽)20042002。

1.1.2 药物 葛根散(由甘草、干葛根花、葛根、砂仁、贯众各等份组成)组方药材均购自福建省武夷山市立医院中药房，按原方比例常规制备水煎剂，调整生药浓度为2.5 g/mL备用；联苯双酯滴丸(德州德药制药有限公司，国药准字H20033403)。

1.1.3 仪器与试剂 Beckman-CX5型全自动生化分析仪(美国贝克曼库尔特有限公司)；AB135-S型电子天平[梅特勒托利多仪器(上海)有限公司]；TG16-WS台式高速离心机(湘仪离心机仪器有限公司)。ALT测定试剂盒、AST测定试剂盒、TBiL测定试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。

1.2 实验方法

1.2.1 动物分组 将100只Wistar雄性大鼠随机分为6组，正常对照组20只，模型对照组、联苯双酯滴丸组及葛根散高、中、低剂量组，各16只。

1.2.2 建立模型 正常对照组正常饲养，自由饮水。其余80只给予79.5%玉米粉、20%猪油、0.5%胆固醇制成的混合饲料[1]，另外予30%乙醇做饮料[2]。饲养1个月后，正常对照组与模型对照组各随机取10只大鼠，测定大鼠血清总胆固醇、甘油三酯含量，并取肝组织做病理检查，确定已形成酒精性脂肪肝模型。

1.2.3 给药方法 以成人常规用量折算，葛根散高、中、低剂量组分别以24.84、12.42、6.21 g/kg灌胃给药，联苯双酯滴丸组以3.6 mg/kg灌胃给药，正常对照组与模型对照组以0.9%氯化钠注射液10 mL/kg灌胃给药。均每日1次，连续灌胃30 d。

1.2.4 观察指标及方法 全部大鼠末次给药后均禁食12 h，眶静脉取血，以2 500 r/min离心15 min，取血清，测定血清ALT、AST及TBiL水平变化，并观察各组大鼠肝组织的病理变化，包括脂肪变性、颗粒变性及纤维组织增生。ALT、AST及TBiL的测定均严格按照说明书操作说明执行。肝组织病理等级评分如下：切片中无明显相应病理改变，为“-”；切片中偶见相应病理变化，病变散在分布或单个发生，病变范围占全视野的1/4以下，为“+”；相应病理改变明显，呈片状或集群分布，病变范围占全视野的1/4～1/2，为“++”；相应病变程度严重，病变呈大片状分布，占据全小叶或全视野的1/2以上，为“+++”。

2 结 果

2.1 各组大鼠血清ALT、AST及TBiL的水平比较 见表1。

表1 各组大鼠血清ALT、AST及TBiL的水平比较

组 别nALT(U/L)AST(U/L)TBiL(μmol/L)正常对照组10136.55±18.89167.27±51.850.649 8±0.159 4模型对照组6181.20±23.80*254.11±77.42*1.352 6±0.489 7*葛根散高剂量组16145.62±11.81△167.15±52.97△0.806 1±0.178 7△葛根散中剂量组16158.15±14.02△#182.03±63.10△#0.992 4±0.354 4△#葛根散低剂量组16169.52±32.44△#190.54±14.22△#1.129 8±0.409 2△#联苯双酯滴丸组16143.44±17.67△160.22±55.45△0.721 3±0.167 4△

与正常对照组比较，*P<0.05；与模型对照组比较，△P<0.05；与葛根散高剂量组比较，#P<0.05

由表1可见，与正常对照组比较，模型对照组大鼠血清ALT、AST及TBiL水平均显著升高(P<0.05)；与模型对照组比较，葛根散高、中、低剂量组及联苯双酯滴丸组血清ALT、AST及TBiL水平均有明显降低(P<0.05)，且葛根散高剂量组降低水平与联苯双酯滴丸组相当(P>0.05)，并优于葛根散中、低剂量组(P<0.05)。

2.2 各组大鼠治疗后的肝组织病理检测结果 见表2。

表2 各组大鼠治疗后的肝组织病理检测结果 例

由表2可见，酒精性脂肪肝模型大鼠主要肝组织病理变化为脂肪变性与颗粒变性，纤维组织增生不明显。病理报告显示，正常对照组肝组织较多散在的点状坏死性炎症，部分肝细胞轻度浊肿；模型对照组肝组织较多大小不等散在炎性灶(以慢性炎细胞为主)，大部分肝细胞重度水样变性，部分肝细胞轻重度脂肪变性，肝细胞坏死。经葛根散高、中、低剂量及联苯双脂滴丸治疗后与模型对照组比较，病理改变均有所改善，且葛根散作用强度高剂量组>中剂量组>低剂量组，随用药剂量的增加炎性灶、坏死灶、变性的肝细胞明显减少。

3 讨 论

酒精性脂肪肝是指因摄入酒精所引起的肝细胞内脂质蓄积超过肝湿质量5%的肝损害性疾病，是临床最常见、最早期的酒精性肝病之一，其治疗上目前尚缺乏特效药。现代研究表明，酒精性脂肪肝的肝损伤机制主要为乙醇代谢产物乙醛对肝脏的直接毒性作用，可以造成肝细胞变性坏死，以及乙醇对肝脏线粒体的毒性作用与乙醇诱导肝脏损伤的自由基作用机制[3]。

酒精性脂肪肝属中医学酒伤、胁痛、胁胀、积聚等范畴。中医学对其病因病机早有论述，认为酒为一种特殊的湿热毒邪，可直伤肝胃，大量饮酒，湿热蕴蒸，致肝木失疏，肝气郁滞，肝胃不和，日久血脉瘀阻，痰浊内生，停于胁下，而成本病。病机属实热，以酒毒伤肝、热蕴肝郁、血瘀痰滞为主，或误治失治，继续饮酒，病情由浅入深，由实转虚，虚实夹杂，形成气阴两虚，瘀血积累[4]。葛根散方中葛根清凉下火，开胃消食，利尿解酒有特效，《千金要方》记载以鲜葛根捣汁给治醉不醒者，宋代《本草衍义》以葛根取粉治酒醉者，曰“病酒及渴者，得之甚良”；干葛根花解酒醒脾；饮酒过度者易伤脾胃，出现纳差、呕吐等症，故配入甘草补脾益气，清热解毒；砂仁芳香化湿，行气健脾；贯众可解一切诸热毒或中食毒、酒毒、药毒等(《普济方》)。

本实验结果表明，葛根散可显著降低酒精性脂肪肝模型大鼠血清ALT、AST及TBiL水平，其药物疗效作用强度具有一定的剂量依赖关系，且对大鼠肝组织病理改变有一定改善作用。综上所述，葛根散对酒精性脂肪肝模型大鼠肝损伤有保护作用。

[1] 李仪奎.中药药理实验方法学[M].上海：上海科学技术出版社，1991：468.

[2] 徐叔云.药理实验方法学[M].北京：人民卫生出版社，1982：868.

[3] 邓源，班春林，武晓琼.乙醇诱导肝损伤作用机制的研究进展[J].华北国防医药，2005，17(4)：242-244.