祁木香提取物的药效学研究※

王 刚 侯志飞 张利敏 张 静 薛 娜

(河北化工医药职业技术学院药学教研室，河北 石家庄 050026)

祁木香为菊科植物InulaheleniumL.的干燥根，药典中以土木香名收载，由于解放前河北安国(古称祁州)就大量种植，故被医药界人士冠以“祁”字，为安国八大祁药之一。该药辛、苦、温，归肝、脾经，具有健脾和胃、行气止痛、安胎的作用，用于治疗胸胁、脘腹胀痛、呕吐泻痢、胸胁挫伤、岔气作痛及胎动不安[1]。祁木香的化学成分主要包括土木香内酯、异土木香内酯及二氢土木香内酯等[2]。文献中有关于土木香根、茎、叶制剂镇痛作用[3]和土木香中倍半萜内酯抗肿瘤活性研究[4-6]的报道。现对祁木香提取物的药效作用进行了研究，为以后更好的开发利用祁木香提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 药品与试剂 祁木香药材(购自河北省安国市药材市场，经河北化工医药职业技术学院李洪教授鉴定为菊科植物InulaheleniumL.的干燥根)；阿司匹林片(石药集团欧意药业有限公司，国药准字H13022760，批号：018110707)；吗丁啉(西安杨森制药有限公司，国药准字H10910003，批号：130117186)；冰乙酸(分析纯，成都市科龙化工试剂厂)。0.9%氯化钠注射液、纯净水(自制)。

1.1.2 实验动物 清洁级昆明种小鼠(20±2)g，雄性，购自河北医科大学实验动物中心。许可证号：SCXK(冀)2003-1003，合格证号：611036，611057。

1.1.3 实验仪器 JD110-4型电子天平(沈阳龙腾电子有限公司)；YLS-6B智能热板仪(北京众实迪创科技发展有限责任公司)，灌胃针、注射器、量筒。

1.2 实验方法

1.2.1 祁木香提取物的制备[7]祁木香药材于40 ℃干燥40 min，粉碎后取药材2.98 kg，加85%乙醇回流提取2次，每次1 h，合并滤液，减压浓缩至无醇味，加纯净水制成2 000mL。加适量防腐剂，放冷，保存于冰箱中，临用前配制成所需浓度。

1.2.2 实验动物分组及给药方法 动物购进后观察1周，均无异常，随机分为5组，即祁木香提取物高剂量组(1.49 g生药/mL)、中剂量组(0.74 g生药/mL)、低剂量组(0.37 g生药/mL)、空白对照组(0.9%氯化钠注射液10 mL/ kg)及阳性对照组(吗丁啉5×10-3g/kg或阿司匹林0.2 g/kg)，每组10只，连续灌胃5 d，第5 d造模。

1.2.3 各组碳末推进百分率测定[8]取健康昆明种小鼠，雄性，体质量18～22 g，实验室饲养3 d，随机分为5组，分别为空白对照组、阳性对照组、祁木香低剂量组、祁木香中剂量组和祁木香高剂量组，每组10只，禁食不禁水 后，空白对照组给予纯净水，阳性对照组给予吗丁啉(5×10-3g/kg)，各实验组灌胃给予祁木香提取物，每日1次，连续5 d。末次给药30 min后，灌服碳末混悬液(10%活性碳粉末、10%阿拉伯胶，用纯净水溶解)0.2 mL/只，20 min后颈椎脱臼法处死小鼠，打开腹腔，分离肠系膜，测量肠管长度为“小肠总长度”，从幽门至碳末前沿为“碳末推进距离”，计算碳末推进百分率[碳末推进百分率(%)=碳末推进距离(cm)/小肠总长度(cm)×100%]。

1.2.4 祁木香提取物镇痛药效筛选

1.2.4.1 对热板致小鼠镇痛作用[9]实验前将热板仪的温度调节至(55±1) ℃，预热10 min。选用 18～22 g雄性昆明种小鼠进行实验，记录小鼠自投入热板至出现舔后足的时间为痛阈值，每只测2次，以平均值>5 s且不超过30 s者为合格。取合格小鼠随机分为5组，每组10只，分别为空白对照组、阳性对照组、祁木香低剂量组、祁木香中剂量组、祁木香高剂量组。1 d后开始给药，在给药之前每只小鼠再测一次痛阈值，将此痛阈值与该只小鼠筛选时的痛阈值取平均值，以此平均值作为该只小鼠在给药前的正常痛阈值。空白对照组给予纯净水，阳性对照组给予阿司匹林，各实验组灌胃给予祁木香提取物，每日1次，连续给药5 d。分别在末次给药后30、60、90 min时间段用热板仪测定小鼠出现舔足的时间，超过 60 s不舔足者按60 s计。比较用药前后各组出现舔足时间作为动物疼痛反应的指标。

1.2.4.2 祁木香提取物对冰醋酸诱发小鼠扭体反应的影响[10]取18～22 g昆明种小鼠，雄性。实验前预先用0.8%冰醋酸0.2 mL腹腔注射，以其15 min内扭体次数作为痛阈值，取15 min内扭体次数在10～60次之间的小鼠为合格小鼠。将其随机分为5组，每组 10只，分别为空白对照组、阳性对照组、祁木香低剂量组、祁木香中剂量组、祁木香高剂量组。空白对照组给予纯净水，阳性对照组给予阿司匹林，各实验组灌胃给予祁木香提取物，每日1次，连续给药5 d。末次给药30 min后，每只小鼠均腹腔注射0.8%冰醋酸0.2 mL，随即观察出现扭体反应的时间(扭体潜伏时间)和20 min内出现扭体反应的次数。计算药物对扭体反应的抑制率[抑制率%=(空白对照组扭体反应均数-给药组扭体反应均数)/空白对照组扭体反应均数]。

2 结 果

2.1 各组碳末推进百分率比较 见表1。

表1 各组碳末推进百分率比较

表1 各组碳末推进百分率比较

组 别n剂量(g/kg)小肠全长(cm)炭末前沿至幽门距离(cm)推进率(%)空白对照组10-50.1±1.920.2±3.840.2±8.0阳性对照组(吗丁啉)105×10-349.3±3.726.8±5.654.3±9.9*祁木香低剂量组105.649.2±4.925.3±3.143.5±6.8祁木香中剂量组1011.249.5±3.725.3±3.451.4±7.6*祁木香高剂量组1022.452.8±4.328.9±4.354.8±8.6*

与空白对照组比较，*P<0.01

由表1可见，炭末推进百分率祁木香低剂量组与空白对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)；但祁木香中、高剂量组与空白对照组相比有明显增加，均有统计学意义(P<0.01)。提示祁木香提取物可提高小鼠小肠的推进率。

2.2 祁木香提取物对热板致小鼠镇痛作用 见表2。

表2 祁木香提取物对热板法致小鼠的镇痛作用

组 别n剂量(g/kg)给药前痛阈[t(s)]给药后痛阈[t(s)]30 min60 min120 min空白对照组10-11.52±2.3612.53±6.0212.37±2.0513.45±638阳性对照组(阿司匹林)100.212.71±2.4941.58±16.32**44.94±15.42**41.53±14.45**祁木香低剂量组105.610.28±3.3820.89±9.2318.81±16.3722.94±6.83祁木香中剂量组1011.210.43±2.6125.77±14.2826.61±11.80**30.33±1875祁木香高剂量组1022.412.30±3.2928.13±15.17*29.53±18.89*30.82±18.51*

与空白对照组同期比较，*P<0.05，**P<0.01

由表2可见，与空白对照组比较，祁木香低剂量组与空白对照组痛阈值比较差异无统计学意义(P>0.05)；祁木香中剂量组在给药后60 min能显著提高小鼠对热反应的痛阈值(P<0.05)，祁木香高剂量组在给药后30、60、120 min时间段对小鼠热反应的痛阈值均有显著的提高(P<0.01)。提示祁木香提取物能对抗热刺激所致小鼠的疼痛性反应。

2.3 祁木香提取物对冰醋酸诱发小鼠扭体反应的影响 见表3。

表3 祁木香提取物对冰醋酸诱发小鼠扭体反应的影响

表3 祁木香提取物对冰醋酸诱发小鼠扭体反应的影响

组 别剂量(g/kg)潜伏期(min)扭体次数抑制率(%)空白对照组-3.61±0.3241.1±18.8-阳性对照组(阿司匹林)0.27.55±1.56**12.6±4.0**94祁木香低剂量组5.64.51±1.0532.8±28.520祁木香中剂量组11.24.75±1.3530.1±17.326祁木香高剂量组22.46.28±1.12*24.0±12.1*42

与空白对照组比较，*P<0.05，**P<0.01

由表3可见，祁木香高剂量组能显著抑制冰醋酸诱发小鼠扭体反应(P<0.05)，抑制率为42%。提示祁木香提取物能对抗冰醋酸所致小鼠的疼痛性反应。

3 讨 论

在祁木香提取物对小鼠肠蠕动的影响实验中，祁木香低剂量组与空白对照组间比较差异无统计学意义(P>0.05)，但祁木香中、高剂量组与空白对照组相比，炭末推进百分率增加(P<0.05)。实验表明祁木香提取物能促进小肠蠕动。

在热板法实验中，祁木香高剂量组在给药后30、60和120 min以及中剂量组在药后60 min均可明显降低热板对小鼠刺激致痛阈值升高(P<0.05，P<0.01)。在扭体实验中，祁木香高剂量组对醋酸所致的小鼠腹腔疼痛有显著抑制作用，但低、中剂量的作用无统计学意义(P>0.05)，具体原因有待进一步研究。实验表明，祁木香对物理性及化学性刺激疼痛均有明显抑制作用。

祁木香具有健脾和胃、行气止痛、安胎的作用，在北方曾代木香用。本研究为祁木香的临床推广使用和新药开发研究提供了药效学方面的依据。

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