多药耐药因子在胃癌中表达的相关性及其临床意义

蔡丽芳,肖琳琳,吴 宁,胡 宇,黄伟明

(福建省莆田市第一医院肿瘤内科,福建莆田,351100)

胃癌是中国消化系统常见的恶性肿瘤,死亡率高居各种恶性肿瘤的第2位[1]。近年辅助化疗能提高胃癌术后生存,是胃癌综合治疗的重要手段之一,但总体疗效并不理想[2-3]。多药耐药(MDR)现象是导致胃癌化疗失败的直接原因[4]。由于MDR的发生机制极为复杂,存在众多的难点和疑点,因此,解决肿瘤的多药耐药问题就益发迫切。MDR相关蛋白是肿瘤耐药研究的一大进展,这些蛋白与胃癌生物学行为、化疗敏感性和评估预后有着紧密的联系。因此,本研究探讨了多药耐药因子在胃癌中表达的相关性及其临床意义,现报告如下。

1 临床资料

收集2005年6月—2011年6月在本院行手术治疗的64例胃癌患者的切除标本,其中男42例,女22例,年龄40～68岁。按组织学分级:高分化6例,中分化28例,低分化27例,未分化4例。TNM分期:Ⅰ期3例,Ⅱ期21例,Ⅲ32例,Ⅳ期8例。按病灶直径:<5 cm 33例,>5 cm 31例,淋巴结转移情况:阳性38例,阴性26例。纳入标准:实验所用蜡块标本取自本院病理科,均经术后病理及胃镜病理确诊胃癌;术前均未进行放疗、化疗或其他针对肿瘤的治疗。

将胃癌标本固定、包埋、苏木精-伊红染色(HE)染色、病理分类。采用链酶抗生物素蛋白-过氧化物酶免疫组织化学法(SP法)检测P-糖蛋白(P-gp)、p53、谷胱甘肽 S 转移酶-π(GST-π)。由2位病理医师分别双盲阅片并记录,每张切片随机取5个400倍视野,每视野计数100个细胞,取平均值。P-gp和GST-π以细胞膜或细胞质染棕黄色为阳性,p53以细胞核染为棕黑色为阳性,阳性细胞>30%为阳性,以癌旁黏膜为阴性对照。

结果见表1、2。

表1 P-gp、p53、GST表达与胃癌病理因素之间的关系[n(%)]

表2 P-gp、p53和GST-表达与胃癌2年无病生存时间的关系[n(%)]

3 讨 论

化疗具有清除术后残余肿瘤细胞、预防肿瘤复发和转移的作用。国外统计资料表明[5],90%肿瘤患者的死亡不同程度受到耐药的影响。胃癌是耐药性较强的恶性肿瘤,目前其化疗有效率不足50%[6]。肿瘤细胞一旦对某种化疗药物产生了耐药作用,即可对其他结构、细胞靶点、作用机制的抗癌药物也产生耐药性,这一现象称为MDR。

P-gp是由位于7q21d的MDR-1基因编码的产物,分子量 170 kD,故称为 P170糖蛋白。P-gp跨膜结构可形成药物通道,具有“药泵”作用,依靠三磷酸腺苷(ATP)释放能量,逆浓度梯度泵出细胞外,降低细胞内药物浓度,从而使化疗药物的细胞毒作用减少甚至消失,诱发MDR发生。本研究中,胃癌组织 P-gp表达率为 75.0%,与 Hu等[7]的研究结果基本一致。P-gp高表达的肿瘤对长春新碱、长春花碱、阿霉素等生物碱类高度耐药,可见本组病例可能对上述抗肿瘤药存在不同程度的耐药。Shi等[8]的研究表明,P-gp高表达与淋巴结转移呈正相关,MDR与肿瘤转移关系密切,推测肿瘤细胞在转移过程中发生细胞黏附和产生多药耐药现象可能有某种共同的途径。关云艳等[5]的研究证实,P-gp在向细胞外泵出药物时,能够促进肿瘤细胞游走、着床,上调金属蛋白酶的数量和活性,增加CD44的表达,共用提高肿瘤侵袭能力及耐药性。本研究显示,P-gp高表达与淋巴结转移有相关性,提示胃癌P-gp高表达容易发生淋巴结转移,预后差[9]。

p53是一段16～20 kb的DNA,分子量约53 kDa,故命名为p53,分为野生型和突变型两种。野生型p53控制细胞周期和诱导凋亡,但半衰期较短,组织含量低,因此临床能够检测的均为突变型p53。突变型p53失去抑制细胞增殖和诱导凋亡作用,促进肿瘤发生、发展。p53基因突变可发生在胃癌的早期,即居于肠化生阶段的癌前病变过程中,有助于胃癌的早期诊断[10]。突变型p53能够增强MDR基因表达,介导大量P-gp表达,增加肿瘤耐药性[11]。本研究显示,p53蛋白与P-gp呈正相关,两者存在协同关系,同时与预后显著相关,与Oliver等[12]的研究结果一致。p53蛋白表达与病灶大小关系尚无统一说法,Tzanakis等[13]认为,p53蛋白高表达与大病灶密切相关,而本研究未发现p53蛋白表达与病灶大小相关。本研究胃癌组织中p53高表达与淋巴结转移、TNM分期存在相关性,说明突变型p53对癌细胞增殖抑制减弱,促进肿瘤细胞转移,是胃癌恶性程度高的标志。

GST-π是一组具有解毒和结合蛋白功能的同工酶家族,分为 α、β、γ、π、μ、θ及膜结合微粒体 。GST-π是由GST-π超基因家族编码基因的相应蛋白,目前认为与MDR关系最密切。其表达在许多癌前病变、癌组织及癌细胞系中高表达并参与MDR的形成。通过催化谷胱甘肽与亲电物质相结合,本身也可与亲脂性细胞毒性物质结合形成GS-X,增加其水溶性,将抗肿瘤药物如阿霉素、环磷酰胺及顺铂等烷化剂类药物,从尿液中排出或代谢为无毒性醇类物质,从而保护癌细胞;还可促进DNA修复,导致MDR发生[14]。Shi等[8]研究证实,GST-π表达与病理分化程度密切相关。本研究中低分化胃癌中GST-π表达率显著低于高中分化者,提示高中分化者比低分化者更容易产生耐药,符合临床上高中分化胃癌对化疗有效率较低,而分化差的神经内分泌癌、印戒细胞癌等对化疗敏感现象[15]。本研究未发现GST-π表达与2年DFS的相关性,可能与本选取的标本数量不足或多数为中晚期有关。

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