类风湿性关节炎患者血清白介素-33、肿瘤坏死因子-α、C反应蛋白的水平变化及意义

黄文辉,陈瑞林,曾颖瑜,林泽英

(广州医科大学附属第二医院风湿免疫科,广东广州,510260)

类风湿性关节炎(RA)是自身免疫性慢性炎性疾病,外周对称性多关节炎是其主要临床特征。细胞因子随着细胞分子水平的发展,对多种免疫性疾病发病机制有重要作用。Baekkevold 2005年从内皮细胞中分离的血清白介素-33(IL-33)的分子与犬DVS27蛋白序列相似,通过刺激肥大细胞分泌白介素-6(IL-6)、白介素-13(IL-13)、巨噬细胞炎性蛋白-1a(MIP-1a)等多种炎症因子而促进RA的发病[1]。由单核巨噬细胞分泌合成的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)可参与 RA自身免疫的炎性反应,是一种多功能因子[2]。C反应蛋白(CRP)是急性期反应蛋白,物种进化后保留在脊椎动物中,主要在炎性细胞活素IL-6刺激下产生,包括肝细胞,或巨噬细胞和平滑肌细胞,是目前最好的临床指标,可反映和参与全身或局部炎症反应[3]。本研究通过检测RA患者血清IL-33、TNF-α、CRP 水平,探讨RA 患者血清 IL-33、TNF-α、CRP水平的变化与RA发病机制。

1 资料与方法

选择2010年7月—2012年7月本院收治的RA患者50例(RA组),入选患者均符合美国风湿病学会(ACR)1987年修订的 RA诊断标准。其中男16例,女34例;年龄26～ 72岁,平均(46.5±5.1)岁。入选标准:参考中华医学会风湿病学分会制定的RA活动期判定标准。排除标准:排除患有高血压、糖尿病、肿瘤、急性感染、肝肾疾病和其他自身免疫性疾病的患者。RA组分为活动期RA组和非活动期RA组,每组25例。2组年龄、性别等一般资料无显著差异,具有可比性(P>0.05)。另选择本院体检中心接受体检的健康成年人30例为对照组。各组受试者在研究前3个月内均未服用免疫抑制剂或激素。

各组患者清晨空腹采集肘静脉血5 mL,常温保存30 min后,3000 r/min离心10 min,分离血清,-20℃冰箱保存待测。免疫比浊法测定血清中CRP水平,双抗体夹心酶联免疫吸附实验(Elisa)检测血清中IL-33、TNF-α水平。比较各组血清中IL-33、TNF-α、CRP水平;分析 RA 组患者血清IL-33与TNF-α水平的相关性,及血清IL-33、TNF-α水平与CRP水平间的相关性。

2 结 果

由表1可见,RA组患者(活动期/非活动期)血清中IL-33、TNF-α、CRP水平均明显高于对照组,经比较差异有显著统计学意义(P<0.05);活动期RA组患者血清 IL-33、TNF-α、CRP水平均明显高于非活动期RA组患者,经比较差异有显著统计学意义(P<0.05)。

表1 各组血清中IL-33、TNF-α、CRP水平比较()

表1 各组血清中IL-33、TNF-α、CRP水平比较()

与对照组比较,＊＊P<0.01;与活动期 RA组比较,##P<0.01。

观察指标 对照组(n=30) RA组(n=50) 活动期RA组(n=25) 非活动期RA组(n=25)IL-33/(pg/mL) 77.40±7.54 298.01±27.34＊＊ 335.34±31.47＊＊ 225.50±26.47＊＊##TNF-α/(pg/L) 1.85±0.14 7.56± 0.65＊＊ 10.26± 1.44＊＊ 5.34± 0.56＊＊##CRP/(mg/L) 2.10±0.24 11.14± 1.34＊＊ 15.47± 1.69＊＊ 7.78± 0.80＊＊##

表2 RA组患者血清IL-33与TNF-α水平相关性分析()

表2 RA组患者血清IL-33与TNF-α水平相关性分析()

观察指标 RA组 r P IL-33/(pg/mL) 298.01±27.34 0.65 <0.05 TNF-α/(pg/L) 7.56± 0.65

由表2可见,RA组患者血清IL-33与TNF-α水平的相关性回归分析表明,IL-33与TNF-α水平呈显著正相关(P<0.05)。

表3 RA组患者血清IL-33、TNF-α与CRP水平间相关分析()

表3 RA组患者血清IL-33、TNF-α与CRP水平间相关分析()

观察指标 RA组 r P CRP/(mg/L) 11.14±1.34 IL-33/(pg/mL) 298.01±27.34 0.51 <0.05 TNF-α/(pg/L) 7.56± 0.65 0.66 <0.05

由表3可见,RA组患者血清IL-33、TNF-α与CRP相关性回归分析表明,CRP与IL-33、TNF-α水平均呈显著正相关(P<0.05)。

3 讨 论

RA是自身免疫性疾病,其主要诊断特征外周对称性慢性多关节炎,可并发关节外系统损害,关节滑膜炎是其病理损害特征[4]。RA系多基因疾病,具有遗传性。其患病率在发达国家约为1.0%,在中国为0.32%～0.36%。

RA的发病机制与细胞免疫和体液免疫失衡相关,细胞因子在其间发挥了重要作用,IL-1家族部分细胞因子都具有很强大的促炎作用[5]。IL-33是近年来新发现的一个IL-1家族的细胞因子,IL-33可促进肥大细胞分泌巨噬细胞炎性蛋白-1a(MIP-1a)、IL-6、IL-13、血管内皮生长因子(VEGF)和粒细胞集落刺激因子(GM-CSF),还可刺激小鼠成纤维细胞分泌嗜酸粒细胞趋化因子(CCL11)和IL-6[6]。动物实验证明,IL-33能够加重小鼠的关节炎,用重组IL-33注入小鼠体内,可引起血清IgE、IgA、IL-5和IL-13水平的增高,提示IL-33的致炎作用[7]。本研究表明,IL-33在RA活动组患者的血清中高表达,RA活动组血清IL-33水平高于RA缓解组及对照组,提示IL-33促发了RA的发病,其可能作为一种促炎细胞因子参与了RA病情活动。

CRP是一种急性时相反应蛋白,也是风湿类疾病活动的重要参考指标,由肝脏合成,在机体发生恶性肿瘤、组织损伤或坏死及炎症时升高。研究显示[8-9],风湿性疾病患者血清CRP含量较高。虽然CRP水平在疾病诊断方面无特异性,但其水平上升与组织损伤程度成正比,可有效反映各种原因引起的组织损伤和炎症。本研究结果表明,CRP水平在RA患者血清中明显高于对照组,而活动期RA患者CRP水平又高于非活动期患者,符合上述研究结果。

TNF-α是公认的促炎因子,可促进骨破坏和RA炎症发生。其参与的发病机制包括细胞因子的诱导、内皮细胞的激活、白细胞的聚集、软骨的破坏和破骨细胞的活化等[10-12],可引起软骨与骨的渐进性破坏及炎症反应的持续发生。TNF-α及其可溶性受体在RA患者血清中水平较高。研究[13]证实,TNF-α与多种病情活动的指标相关。有学者用ELISA法分别测定了TNF-α和IL-1的表达水平,结果显示二者的表达水平与患者病情严重程度成正比[14]。而且,关节滑液中 TNF-α和IL-1水平对膝骨性关节炎的发病和发展过程有重要影响作用,可有效评估病情的严重程度[15]。本研究结果证实,与RA非活动期组和对照组相比,RA活动期组患者血清TNF-α水平明显升高,提示TNF-α参与了 RA的炎性病理过程。

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