心脑宁片对大鼠血栓形成的影响

张中华，吕宏迪，郝少君，张正臣

中风是发病率高、病死率高、致残率高、复发率高的疾病，是世界范围内人口病死的第三位病因和成人残疾的首要原因。近10年来，我国中风的发病率随着人口老龄化以及受行为、社会环境因素的影响，仍有不断上升的趋势，每年新发中风患者约130～150万。我国中风发病率居世界第2位，仅次于前苏联西伯利亚地区。世界卫生组织最近的统计数据表明中风每年要夺去五百多万人生命，因中风致残者超过1500万人。预计到2020年左右，全球每年死于中风的人数将上升至七百多万。缺血性中风占所有类型中风的85%左右。流行病学调查发现，我国近年来出血性中风的发病率明显下降，缺血性中风则明显上升[1]。治疗这一疾病的药物很多，但效果均不很理想，笔者根据多年的临床经验筛选出由人参、当归、川芎、黄芪等组成的中药片剂，具有活血化瘀，益气安神，用于脑血栓形成，冠心病等，亦可用于记忆力减退，抗衰老等的治疗。为探究其疗效原理笔者进行了心脑宁片对大鼠血栓形成影响的实验研究。

1 实验材料

1.1 实验药品 心脑宁片由解放军第371医院制剂室提供，批号20110606；阿司匹林肠溶片，石药集团欧意药业有限公司，批号018110810；脑心通胶囊，咸阳步长制药有限公司，批号 111106；凝血酶原（PT）ELISA检测试剂盒，上海长怡生物技术有限公司，批号20111201B；羧甲基纤维素钠，天津恒兴化学试剂制造有限公司，批号20090723；生理盐水，河南华利制药股份有限公司生产，批号11041806。

1.2 实验动物 大鼠，清洁级，Wistar，河北省实验动物中心提供，合格证号1112027。

1.3 实验仪器 精密天平（AR1140/C），奥豪斯仪器（上海）有限公司生产；离心机（Anke TDL-40B），上海安亭科学仪器厂生产；酶标仪 （680），Bio-Rad生产；可调式移液器（ZX31689），热电（上海）仪器有限公司。

1.4 实验方法 取清洁级体重260～280 g大鼠72只，SD，雄性，随机均匀分为6组，分别灌服大、中、小剂量心脑宁片混悬液 （1.5、0.75、0.375 g/kg， 用 0.5%CMC 配成 75、37.5、18.8 mg/ml，2 ml/100 g），阿司匹林混悬液（0.05 g/kg，用 0.5%CMC 配成 2.5 mg/ml，2 ml/100 g）， 脑心通混悬液 （8 g/kg，用0.5%CMC配成0.4 g/ml，2 ml/100 g）和同体积的0.5%CMC，连续给药7 d，1次/d。末次给药30 min，大鼠用20%乌拉坦（1 g/kg）腹腔注射麻醉后，仰卧固定于鼠板上，解剖颈部、分离气管，插入塑料套管[2]。分离右颈总动脉和左颈外静脉，置入丝线后备用；将丝线游离端聚乙烯管插入左颈外静脉并结扎丝线，用肝素生理盐水（5 U/ml）充盈三段相连的聚乙烯管中（取长约80 mm外径1.6 mm聚乙烯管1根，另取长约60 mm外径1.3 mm聚乙烯管2根，取7-0丝线长约50 mm（干燥至恒重，并称重）置外径1.6 mm聚乙烯管中，用外径1.3 mm聚乙烯管固定，另一外径1.3 mm聚乙烯管插入外径1.6 mm聚乙烯管的另一端，用含肝素5 U/ml的氯化钠注射液充满聚乙烯管备用），将该管一端插入左颈外静脉，再经此管另一端插入右颈总动脉中，立即放开动脉夹，准确记录血流，15 min后终止血流，迅速取出丝线称重，计算血栓湿重[3]。血栓重量（mg）=血栓丝线重量（mg）-丝线重量（mg）。大鼠取血，测凝血时间；离心，取血清，测定大鼠凝血酶原（PT）浓度[4]。

1.5 统计学方法 数据分析用SPSS 13.0 for windows统计软件包进行数据资料的统计学处理，计量资料用平均数±标准差（s）表示，组间比较用方差分析（LSD 法）。

2 结 果

心脑宁对大鼠血栓湿重、凝血时间、凝血酶原浓度的影响见表1。

表 1 心脑宁对大鼠血栓形成的影响±s，n=12）

表 1 心脑宁对大鼠血栓形成的影响±s，n=12）

注：与空白对照组比，*P<0.05；与空白对照组比，#P<0.01

凝血酶原浓度空白对照组 0.036±0.006 105.8±43.6 0.097±0.118阿司匹林组 0.05 0.020±0.003#162.6±37.5#0.424±0.436#脑心通胶囊组 0.8 0.020±0.004#145.6±14.2#0.183±0.142大剂量心脑宁片组 1.5 0.022±0.004#146.9±39.3*0.248±0.143#中剂量心脑宁片组 0.75 0.024±0.004#141.4±31.1*0.180±0.233小剂量心脑宁片组 0.375 0.022±0.006#143.9±47.3 0.196±0.169组别 剂量（g/kg）血栓湿重（g）凝血时间（s）

从表1可看出，大、中、小剂量心脑宁片组、脑心通胶囊组和阿司匹林组与空白对照组比血栓湿重均显著减轻 （P<0.01）；大、中剂量心脑宁片组凝血时间显著延长（P<0.05），脑心通胶囊组和阿司匹林组可显著延长（P<0.01）；大剂量心脑宁片组和阿司匹林组凝血酶原浓度显著提高（P<0.01）。

3 讨 论

心脑宁片是根据中医理论和现代药理研究成果拟定的院内协定处方。该制剂由人参、川芎、当归、黄芪组成。方中以人参为君药，《名医别录》：调中，止消渴，通血脉，破坚疾，令人不忘，以其主补五脏，安精神，定魂魄；黄芪，补中益气，为臣药。当归，活血养血；川芎，其性善降结气，以走肝经，气中之血药，通行十二经，具有理气、活血化瘀的作用为佐药。四药合用，集活血化瘀、抗血栓、益气之功于一体，既重视疏通脉管，以改善脏器供血，又注意改善人体整体功能及代谢，达到扶正祛邪之目的[5]。该制剂适用于气虚血瘀症之缺血性脑血管疾病的治疗。为进一步探讨该药药理作用，本实验进行了心脑宁片对大鼠血栓形成影响的研究。结果显示：大鼠脑血栓模型成功；与模型组比，心脑宁片大、中、小剂量组、脑心通胶囊组和阿司匹林组均可显著减轻血栓湿重 （P<0.01）；大、中剂量心脑宁片组可明显延长凝血时间（P<0.05），大剂量心脑宁片组和阿司匹林组可显著提高凝血酶原浓度 （P<0.01）。实验结果提示：心脑宁片具有明显抗脑血栓形成的作用，其作用机制可能延长凝血时间、提高凝血酶原浓度，其作用优于心脑通胶囊和阿司匹林片。

志谢 本实验在河南中医学院苗明三教授指导下完成，特此致谢

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