两种方法检测血清肝纤维化标记物结果对比分析

陈 莉 王全楚 王东琳

检测血清肝纤维化标志物有助于对肝病活动度的判断[1]，但血清检测结果往往受到方法学和各种因素的影响。既往应用的放射免疫分析法（Radioimmunoassay，RIA）由于放射性同位素具有辐射性而逐渐被高灵敏的化学发光分析法（Chemiluminescence analysis，CLIA）所代替。与RIA比，CLIA具有无辐射污染和可实现全自动化检测等优点。我们分别采用RIA和CLIA法对121例慢性乙型肝炎患者血清肝纤维化指标进行了检测，现将结果分析、报道如下。

材料与方法

一、研究对象 选择我科2012年7月～2012年12月期间住院的慢性乙型肝炎患者121例，男84例，女37例，年龄13～69岁，平均年龄45.8岁。符合2005年中华医学会肝病学分会和感染病学分会修订的慢性乙型肝炎防治指南的诊断标准[2]。另选同期健康体检者40例，男女各20例，平均年龄46岁。

二、血清肝纤维化指标的检测 分别采用CLIA法（郑州安图绿科生物工程有限公司）和RIA法（上海海研医学研究所生物技术中心）检测。

三、肝穿刺活检 采用18G肝穿刺针和美国BARD自动活检枪，用40g/L甲醛液固定标本，石蜡包埋，连续切片，HE染色。按照《慢性乙型肝炎防治指南》的标准将慢性肝炎肝组织纤维化程度分为5期（S0～S4）。

四、统计学处理 采用SPSS11.5软件进行分析。计量资料以±s表示，采用两个独立样本的t检验，组间率的比较采用x2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

结 果

两种方法检测血清肝纤维化标记物的结果比较见表1。经CLIA和RIA两种方法检测的121例慢性乙型肝炎患者血清HA、LN、PCⅢ/PⅢNP和CⅣ含量均较对照组明显升高（P<0.01）。

表1 两种方法检测血清肝纤维化标记物（±s，ng/ml）比较

表1 两种方法检测血清肝纤维化标记物（±s，ng/ml）比较

S1～S4与S0期比较，①P<0.05，②P<0.01，CLIA检测的结果与RIA比较，P>0.05

RIA

讨 论

研究表明，血清HA、LN、PCⅢ/PⅢNP和CⅣ水平的变化与肝纤维化的活动水平及程度密切相关，对肝纤维化的诊断有重要意义，但单项测定这些指标有时并不可靠[3～5]。HA反映肝纤维化活动及肝损伤；PCⅢ/PⅢNP反映胶原合成的情况；CⅣ反映胶原降解程度；LN反映基底膜的变化，与门脉高压有一定的关系。这些指标分别从不同角度反映肝纤维化的变化。 因此，联合检测血清HA、LN、PCⅢ/PⅢNP和CⅣ水平可明显提高肝纤维化诊断的准确性和可靠性[6～8]。

肝硬化早期以Ⅲ型胶原合成增加为主，细胞合成胶原时以前胶原形式分泌到细胞外。PⅢN P是Ⅲ型前胶原（PCⅢ）经氨基内切酶作用脱下的多肽，PⅢN P的含量可以反映Ⅲ型胶原的代谢。近年研究表明，血清PⅢNP是反映早期肝纤维化程度和活动性的良好指标[9～12]。

本文采用CLIA和RIA法同时测定临床病人血清肝纤维化标记物，显示两种方法在检测肝纤维化血清标志物上均能取得较好的效果。但CLIA法较RIA法有其特有的优势，RIA法是利用放射性核素标记抗原或抗体，然后与被测的抗体或抗原结合，形成抗原抗体复合物。RIA多为手工操作，反应时间长，所用试剂对操作人员及周围环境有一定程度的污染。CLIA法消除了同位素的污染，大大提高了试剂的稳定性，检测结果可靠。同时样本无需提前预处理，缩短了分析时间[13～15]。

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