乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群的变化

张建春 翁锡定 陈孙云 张菊花

HBV感染主要是通过免疫损害引起肝脏病变，其中细胞免疫在肝脏损害中起主导作用[1，2]，而T细胞是免疫系统发挥功能的重要组成部分,在乙型肝炎病毒的清除和发病机制中,细胞免疫起着重要的作用[3～6]。因此,保证T淋巴细胞的正常免疫功能及各亚群的相对稳定是非常重要的。本研究检测了急性乙型肝炎、慢性乙型肝炎、乙型肝炎肝硬化和慢性肝衰竭患者外周血T淋巴细胞亚群的变化，从细胞免疫的角度分析乙型肝炎患者的免疫状态，为乙型肝炎的临床治疗提供理论依据。

资料与方法

一、病例选择 选择我科2011年11月到2012年6月收治的乙型肝炎患者100例，男65例，女35例，年龄18～75岁，平均年龄44.49岁。诊断均符合2010年中华医学会肝病学分会和感染病学分会联合修订的慢性乙型肝炎防治指南的标准[1]，其中急性乙型肝炎15例，慢性乙型肝炎43例，乙型肝炎肝硬化26例，慢性肝衰竭16例。另选择正常体检健康者20例，男15例，女5例，平均年龄47.5±7.2岁。排除甲、丙、丁、戊型肝炎，入院前3个月内无免疫制剂治疗史。

二、检测方法 采用酶联免疫吸附法检测血清肝炎病毒标记物；采用流式细胞分析技术检测外周血T淋巴细胞亚群，仪器购置美国BECKMAN-COULTER公司。抗淋巴细胞亚群单克隆抗体（simultestTM IMK-Lymphocyte）购自美国BD公司。

三、统计学分析 采用SPSS19.0统计软件，计量资料用表示，组间比较采用配对t检验，以为差异具有统计学意义。

结果

各型乙型肝炎患者与正常对照组T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+细胞百分率及CD4+/CD8+比值检测结果见表1。研究结果表明，与正常对照组比，急性肝炎患者T淋巴细胞亚群无显著性变化（P>0.05），而慢性肝炎、乙型肝炎肝硬化和慢性肝衰竭患者CD3+、CD4+、CD8+细胞百分率及CD4+/CD8+比值均有明显下降，差异有统计学意义（P<0.05），在乙型肝炎肝硬化组尤为显著。慢性肝炎与慢性肝衰竭患者CD3+、CD4+、CD8+细胞百分率及CD4+/CD8+比值的差异无统计学意义（P>0.05）。

表1 乙型肝炎患者与正常人外周血T淋巴细胞亚群（%，±s）比较

表1 乙型肝炎患者与正常人外周血T淋巴细胞亚群（%，±s）比较

与正常人比，①P<0.05；与慢性肝炎和慢性肝衰竭比，②P<0.05

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讨论

有研究发现，HBV感染人体后可引起肝脏和其他脏器的病变。乙型肝炎的发生是机体与病毒相互作用的结果。HBV侵入肝细胞内增殖，可使受染细胞表达HBsAg和HBcAg等，后者可被机体免疫系统所识别，引起一系列免疫应答[7]。人体外周血T淋巴细胞由不同的亚群组成，T淋巴细胞是宿主抗病毒、抗肿瘤免疫反应中起主导作用的免疫活性细胞，构成了免疫系统的主要部分[8～10]。

T淋巴细胞由不同亚群组成。人成熟T细胞按表型不同可将其分为CD4+T细胞和CD8+细胞。CD3+代表总T淋巴细胞，CD4+T细胞为辅助性T细胞，机体CD4+细胞数量减少和功能下降将直接导致细胞免疫功能低下。CD8+细胞为细胞毒性T细胞，对清除感染的肝细胞及清除病毒感染有重要作用，它的功能发挥有赖于CD4+淋巴细胞的存在，而且CD4+淋巴细胞Th1亚型通过直接对肝细胞的溶解而间接清除病毒，同时也使肝脏病变加重[11]。黄玉波[12]等发现HBV感染的肝硬化和肝癌患者CD4+和CD8+细胞亚群较急性肝炎和健康对照组人群显著降低，尤其是肝癌患者CD8+细胞下降更为明显。CD3阳性细胞减少可能与慢性病毒感染状态下病毒诱导T细胞活化凋亡（AICD）和T细胞增殖不足有关，CD3阳性细胞数量下降说明机体参与免疫反应的免疫活性细胞数量不足。CD4除在免疫应答中起辅助和诱导作用外，还分泌细胞因子，启动迟发性过敏反应。CD4细胞减少和功能下降将导致机体免疫功能低下，尤其是细胞免疫功能低下，使得HBV不能被有效清除。CD4/CD8比值是监测人体细胞免疫功能，反映机体免疫状态的重要指标，该比值失衡可以导致免疫系统紊乱和一系列免疫病理改变[13]。

本研究结果表明，急性肝炎患者T淋巴细胞亚群与正常对照组比较，差异无统计学意义（P>0.05），而慢性肝炎、乙型肝炎肝硬化和慢性肝衰竭患者外周血CD3+、CD4+和CD8+细胞百分率及CD4+/CD8+比值均较对照组有明显下降，差异有统计学意义（P<0.05），乙型肝炎肝硬化组尤为显著，提示细胞免疫在乙型肝炎发展为肝硬化进程中是不可忽视的重要因素。慢性肝炎与慢性肝衰竭患者CD3+、CD4+、CD8+细胞百分率及CD4+/CD8+比值的变化差异无统计学意义（P>0.05）。

我们发现所有慢性乙型肝炎患者，包括慢性乙型肝炎、乙型肝炎肝硬化和慢性肝衰竭患者CD8+T细胞数量较正常人明显下降，反映出这类病人的细胞免疫水平低下，可能与HBV感染慢性化有关。从本研究结果可以看出，CD4+/CD8+比值在所有慢性乙型肝炎患者均下降，但在不同乙型肝炎慢性进程中无一定规律，彼此间无显著性差异。研究表明，CD4+/CD8+比值没有出现随着病情的加重而增加或者减少的趋势。因此，不能用外周血T细胞亚群计数或比值的变化来评价乙型肝炎患者病情轻重。

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