恩替卡韦治疗慢性乙型肝炎患者外周血T细胞亚群和补体的变化*

林孟新 苏智军 郭如意 林志鹏

慢性乙型肝炎的发病机制十分复杂，目前认为宿主抗病毒免疫功能低下，尤其是乙型肝炎病毒特异性T细胞功能不全是乙型肝炎慢性化的主要机制之一[1]。本文通过比较慢性乙型肝炎（CHB）患者在恩替卡韦（ETV）治疗前后T淋巴细胞和血清补体水平的变化，旨在了解 ETV治疗对CHB患者免疫功能的影响。

资料与方法

一、病例来源 选取2010年～2012年我科就诊的HBeAg阳性CHB患者63例，男性43例，女性20例，年龄23～65岁，平均年龄33±6岁。诊断符合2010年《慢性乙型肝炎防治指南》的标准[2]，并符合下列入选条件：（1）HBV DNA>1×104拷贝/毫升；（2）入院前未服用过核苷类药物或者其他抗乙型肝炎病毒治疗；（3）ALT>2倍正常值上限。排除HAV、HCV、HEV、HIV感染，排除药物性、酒精性、自身免疫性及遗传代谢性肝病。

二、治疗方法 给予恩替卡韦（上海百时美施贵宝公司）0.5mg口服，1次/日，观察24周。

三、检测 采用Synchron CX9 ALX全自动生化分析仪检测肝功能（美国Beckman-Coulter公司及其配套试剂）；采用化学免疫发光法检测HBV血清标志（美国雅培公司I2000及其配套试剂）；采用荧光定量PCR法检测HBV DNA（上海科华生物公司）；采用流式细胞仪检检测T淋巴细胞亚群（荧光标记单克隆抗体购自Beckman-Coulter公司）；采用免疫比浊法测定血清C3和C4（Beckman-Coulter公司生产的Immage 800，补体C3和C4正常参考值分别为0.79～1.52g/L和0.16～0.38g/L。

四、统计学处理 应用SPSS13.0软件，计量资料以表示，采用t检验，率的比较采用卡方检验，P<0.05为差异有统计学意义。

结果

一、疗效情况 在治疗6月结束时，63例患者肝功能明显好转，HBV DNA转阴，与治疗前比有统计学意义（P<0.05，表1）。HBeAg阴转 16例（25.4%）。

表1 63例慢性乙型肝炎患者治疗前后血生化和HBV DNA水平（±s)变化

表1 63例慢性乙型肝炎患者治疗前后血生化和HBV DNA水平（±s)变化

与治疗前比，①P<0.05

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二、治疗前后外周血T淋巴细胞亚群和补体的变化患者治疗后外周血CD4+T细胞计数较治疗前升高，CD4+/CD8+比值也显著高于治疗前，CD8+计数较治疗前降低，有统计学意义（P<0.05）；C3和 C4在治疗后也明显升高（表2）。

表2 63例患者治疗前后T淋巴细胞亚群和补体（±s）的变化

表2 63例患者治疗前后T淋巴细胞亚群和补体（±s）的变化

与治疗前比，①P<0.05

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讨论

恩替卡韦是新一代核苷酸类似物，通过人体内磷酸化成为具有活性的三磷酸盐，与多聚体的天然底物三磷酸脱氧鸟嘌呤核苷竞争，从而作用于HBV复制的启动、逆转录和合成三个步骤，发挥强大的抗病毒效应[3]，恩替卡韦的短期临床效应明显，主要体现在ALT复常、HBV DNA阴转，HBeAg转阴方面。恩替卡韦可以有效地抑制患者体内的HBV DNA活性，使之不能顺利地完成病毒复制，从而起到抑制病毒复制的功效[4]。本文评估了恩替卡韦在高效抗病毒的同时对慢性乙型肝炎患者免疫功能的影响。

慢性乙型肝炎的发病机制比较复杂，其中既有免疫病理损伤和炎症介质导致的微循环障碍，又有HBV持续感染导致肝细胞广泛病变[5]。本研究通过观察63例患者的治疗效果，发现恩替卡韦能迅速降低HBV DNA水平，使ALT复常，临床疗效好，与Lai CL[6]的观察结果一致。

CD4+T细胞数量下降是导致机体无法有效清除病毒，使感染变得迁徙的重要因素[7]。CD4+/CD8+比值是检测人体细胞免疫功能，反映机体免疫状态的重要指标，该比值失衡可以导致免疫系统紊乱和一系列免疫病理改变。通过此次检测发现，CD4+/CD8+水平与HBV DNA无相关性，与其他报告一致[8]。检测外周血T细胞亚群能反映机体细胞免疫状态，当T淋巴细胞亚群的数量和功能发生异常时，可导致免疫功能紊乱而发生持续的HBV感染。国外研究显示，慢性乙型肝炎患者体内存在细胞免疫功能的紊乱，T淋巴细胞亚群失衡导致机体不能有效清除入侵的HBV，导致疾病的发生和发展。有研究表明[9]，CHB患者CD4+细胞减少，CD8+细胞升高，使CD4+/CD8+比值下降。慢性乙型肝炎患者在HBV DNA复制时，T细胞亚群存在明显的紊乱。本研究也提示，治疗前患者CD4+下降，CD8+升高。有研究报告[10]，宿主的细胞免疫功能特别是CD4+和CD8+T细胞反应对乙型肝炎病毒的清除和疾病的转归有重要的影响。T细胞免疫功能如何在乙型肝炎的病理损伤中发挥作用，具体机制目前仍不清楚。有报道乙型肝炎病毒被抑制后，宿主的T细胞免疫功能失衡将得到很好的纠正。

肝脏是合成补体成分的主要器官，约90%血浆补体由肝细胞合成。理论上讲，肝脏损伤可导致血清补体C3和C4水平下降。国外研究结果提示[11]，急性肝炎患者补体C3和C4水平接近健康人群，中度和重型肝炎患者则显著低于健康人群，提示血清C3和C4可能对慢性乙型肝炎肝组织病理状态有预测作用。另有结果[12]提示补体C3和C4随着肝脏组织炎症活动度和纤维化程度的升高而逐步降低，提示C3和C4水平随肝脏损伤的加重而下降。我们发现CHB患者C3和C4水平明显低于健康对照组，与国外报告一致[13]，表明HBV感染可能抑制C3和C4的合成和分泌。补体系统是固有免疫系统的一部分，参与机体的免疫调节，防御外来病原体的入侵。

本研究提示，在使用恩替卡韦治疗后，患者HBV DNA下降，CD4+升高，C3和C4水平也升高，表明恩替卡韦可能通过抑制HBV复制、降低CHB患者体内病毒载量和HBV相关抗原的表达，间接引起机体细胞免疫功能的改善。

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