茴芹果质量标准研究△

2013-09-11吐送江阿不都艾尼王亚丽沙拉麦提艾力

中国民族医药杂志 2013年8期

吐送江·阿不都艾尼王亚丽沙拉麦提·艾力*

(1．和田地区药品药检所，新疆和田 848000; 2．新疆维吾尔自治区食品药品检验所，新疆乌鲁木齐 830000)

茴芹果系维吾尔族习用药材，为伞形科植物茴芹Pimpinella anisum L．的干燥成熟果实，性质二级干热。生干、生热，成熟异常黏液质，温经健肌，散气止痛，利尿通经，补胃催乳等。主治湿寒性或黏液质性疾病，如瘫痪、面瘫，寒性头痛，偏头痛，眩晕，腹胀，腹痛，耳痛，闭尿，闭经，胃虚乳少［1－3］。现行质量标准收载于《中华人民共和国卫生部药品标准维吾尔分册》［4］。原标准只有性状和显微鉴别，标准控制比较简单。本文对茴芹果药材进行研究，增加了薄层色谱法(TLC)鉴别方法，并采用紫外分光光度法(UV)测定总黄酮的含量，使质量标准得到提高。

1 材料

1．1 仪器:UV2550型紫外可见分光光度计;CAMAG REPROSTAR3薄层色谱成像系统(瑞士卡玛柯公司);KLZUP超纯水仪(台湾艾柯成都康宁实验专用纯水设备厂);KUDOSSK7210LHC型超声仪(上海科导超声仪器有限公司。

1．2 试药:芦丁对照品，批号:100080－200306，供含量测定用;茴香醛对照品，批号:110838－200605，供鉴别用;茴香醚对照品，批号:1556－2001，供鉴别用;均由中国食品药品检定研究院提供。硅胶G薄层预制板，化学纯，由青岛海洋硅胶干燥剂厂出品。化学试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2．1 茴芹果TLC鉴别:取本品粉末1g，加乙醚20mL，超声处理10min，滤过，滤液挥干，残渣加无水乙醇1mL使溶解，作为供试品溶液。另取茴香醛、茴香醚对照品，加无水乙醇制成每1mL含1μL的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法《中国药典》附录Ⅵ B试验［5］，吸取上述3种溶液各2μL，分别点于同一硅胶G板上，以石油醚(60～90℃)－乙酸乙酯(17:2．5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%磷钼酸乙醇试液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(图1)

图1 茴芹果药材茴香醛、茴香醚TLC鉴别图

2．2 总黄酮含量测定

2．2．1 最大波长的选定:分别取芦丁对照品溶液和茴芹果供试品溶液，在200～700nm波长扫描，见图。结果，在500nm波长处有对应的吸收峰。在此波长处，以芦丁作为对照，测定茴芹果总黄酮含量。

图2 芦丁和茴芹果紫外吸收图谱

2．2．2 对照品溶液的制备:取芦丁对照品5mg，精密称定，置于25mL量瓶中，加70%乙醇适量，超声使溶解，加70%乙醇至刻度，摇匀，精密量取10mL，置20mL量瓶中，加70%乙醇至刻度，摇匀，即得(每1mL含芦丁0．1mg)。

2．2．3 标准曲线制备:精密量取对照品溶液、2、3、4、5mL，分别置于10mL量瓶中，分别加70%乙醇至5．0mL，加5%亚硝酸钠．3mL，混匀，放置6nin，加10%硝酸铝．3mL，摇匀，放置6min，加氢氧化钠试液4mL，再加水至刻度，摇匀，放置15min，以相应的试剂为空白，照紫外分光光度法《中国药典》附录Ⅴ A［5］，以500nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。

2．2．4 供试品溶液制备:取本品粉碎成细粉，精密称定1g，置20mL量瓶中，加70%乙醇适量，超声提取10min，放置室温，加70%乙醇稀释至刻度，摇匀，过滤。精密量取滤液3mL，置10mL量瓶中，加70%乙醇稀释至刻度，摇匀。精密量取1mL，置10mL量瓶中，照标准曲线制备项下的方法，自“加70%乙醇至5．0mL”起，依法测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中含芦丁的重量(μg)，计算，即得。

2．2．5 精密度试验:精密吸取芦丁对照品溶液(0．1mg·mL－1)，连续测定6次，测定芦丁吸收度值，计算相对标准偏差，结果芦丁的RSD=0．23%，显示精密度良好。

2．2．6 稳定性试验:取同一供试品溶液(6号样品)，室温下放置，每隔5h测定1次，连续进样6次，依法测定芦丁的吸收度值，计算相对标准偏差，芦丁的RSD=1．07%。结果表明，供试品溶液室温下48h内稳定。

2．2．7 重复性试验 :取同一样品(6号样品)适量，照前述方法分别制备供试品溶液6份，照含量测定法进行测定，结果芦丁的平均含量为．5μg·g－1，RSD=2．7%，测定结果表明，本测定方法的重复性良好。

2．2．8 加样回收率试验:精密称取已知含量的供试品(6号，芦丁含量为11．5mg·g－1)0．5g，共取份，置个具塞锥形瓶中，精密补足甲醇至25mg·mL－1，超声处理10min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。按上述色谱条件下测定，计算回收率。结果，芦丁平均回收率为109．1%(n=9)，RSD=3．10% ，说明回收率良好。

2．2．9 样品测定:取10批不同产地、不同采集期茴芹果粉末各1g，分别制备样品溶液，按上述方法进行测定并计算，测定结果见表1。